3 курс / Патологическая физиология / Кленова_Биохимия_патологических_состояний

В смесь вводится АМФ, который служит ингибитором аденилаткиназы. Хотя эритроциты не содержат КФК, но в них содержится аденилаткиназа, поэтому гемолиз нежелателен.

Аденилаткиназа (К.Ф. 2.4.4.3). Фермент имеет малую молекулярную массу – около 21 кДа и электрофоретически гомогенен. Катализируемая реакция указана выше. Содержится практически во всех клетках (изначально обнаружена в миоцитах). В нормальной плазме активность фермента весьма значительна из-за присутствия тромбоцитов. Клинического значения не имеет, но имитирует активность КФК в нормальной плазме, о чем следует помнить.

В. Гидролазы

Липаза (К.Ф. 3.1.1.3). Фермент ведет себя как эстераза, гидролизуя жиры большой молекулярной массы. Особенно активна липаза по отношению к эфирам жирных кислот. Оптимум рН варьирует в пределах от 7,0 до 9,0. В кислой среде фермент разрушается.

Наиболее важен с клинической точки зрения фермент поджелудочной железы, хотя в клетках различных тканей встречается ряд других липаз. Некоторые из них высоко специфичны: фосфолипаза А, С и другие.

Панкреатическая липаза – водорастворимый фермент и ее действие проявляется только с поверхности жировых капель. Поэтому эффективность действия липазы зависит от степени эмульгирования жиров. Это осуществляется с помощью желчных кислот, гликохолата и таурехолата натрия. Панкреатическая липаза разрушает эфирные связи в α-положении более легко, чем в β-положении. Ингибируется продуктами реакции – жирными кислотами. Активация катионами кальция связана с образованием нерастворимых кальциевых солей жирных кислот и подавлением их ингибирующего действия. Гемоглобин ингибирует липазу, поэтому при определении активности в плазме крови следует избегать гемолиза.

Липаза постоянно поступает в плазму из поджелудочной железы, в норме наблюдаются значительные уровни активности.

Клиническое применение. Повышение активности липазы регистрируется при остром панкреатите, карциноме поджелудочной железы, остром гепатите, острых и хронических заболеваниях почек.

Щелочная фосфатаза (К.Ф. 3.1.3.1). Это целая группа ферментов, неспецифически гидролизующих в щелочных условиях ряд ортофосфорных эфиров. Действуют они либо как гидролазы, либо как фосфотрансферазы:

R – O – PO32– + H2O → R + H3PO4

Гидролаза

R1 – O – PO32– + R2-OH → R1-OH + R2 – PO32–

71

Акцептором фосфата могут стать сахара. Максимальная активность при рН 9,0-10,0. Щелочная фосфатаза широко распространена в тканях человека: особенно много ферментов обнаруживается в слизистой кишечника, остеобластах, плаценте, печени. Они расположены на клеточной мембране, принимают участие в транспорте фосфата. Нативный фермент является димером. Гетерогенен, разнообразие форм связано с локализацией фермента в различных тканях: печеночные, костные, кишечные изоферментные формы.

В сыворотке в норме источником фермента, видимо, являются гепатоциты. Естественные субстраты для данной группы ферментов пока не обнаружены. Для определения активности используется 12 субстратов, наиболее часто – β-глицерофосфат, п-нитрофенилфосфат, фенилфталеинмонофосфат. Щелочные фосфатазы способны гидролизовать и пирофосфат, поэтому в физиологических значениях рН могут действовать как пирофосфатазы.

Основными активаторами щелочной фосфатазы служат ионы Mg2+,

внезначительной степени – Mn2+, Ca2+. При определении в сыворотке крови ионы магния дополнительно не вводят, так как они содержатся в ней

вдостаточном количестве. Ингибиторы щелочной фосфатазы: ЭДТА (связывает ионы магния и кальция), ионы цинка, меди, ртути (двухвалентных), что предполагает наличие в активном центре функциональных SH-групп. Фермент ингибируется также избытком фосфата, желчными кислотами, некоторыми аминокислотами, особенно L-фенилаланином. Ингибирование мочевиной носит сложный характер. Практически все щелочные фосфатазы ингибируются обратимо и неконкурентно, но существует также необратимое ингибирование в зависимости от температуры и рН среды. Это имеет значение при определении источника фермента в плазме. Необратимо и полностью ингибируется изофермент из костной ткани, а печеночный изофермент – частично. Щелочные фосфатазы различаются также по устойчивости к действию низких рН и высоких температур. Щелочная фосфатаза (ЩФ) из костной ткани практически полностью ингибируется при инкубации в течение 20 минут в среде с рН 3,5, тогда как печеночный и ки-

шечный изоферменты сохраняют свою активность соответственно на 50 и 100%. Щелочную фосфатазу из гепатоцитов можно осадить из сыворотки 20% этанолом, тогда как другие формы не осаждаются. Изоформы отличаются также по действию высоких температур. Наиболее устойчив плацентарный изофермент, ЩФ из костной ткани инактивируется при 560С, гепатоцитов – при 610С, слизистой кишечника – при 700С.

Щелочные фосфатазы обнаруживаются и в других биологических субстанциях кроме сыворотки: моче, кале, желчи, слюне, молоке, лимфе.

Определение активности. Измеряется по скорости гидролиза субстратов. Для каждого субстрата подбираются оптимальные условия катализа, особенно рН. Дляβ-глицерофосфатаоптимум– 9,4; дляп-нитрофенилфосфата – 9,8.

72

Если в качестве субстрата используется п-нитрофенилфосфат, то в щелочной среде образуется нитрофенол, имеющий желтую окраску, интенсивность которой измеряется фотометрически. Данный метод имеет преимущественное значение, так как позволяет изучать кинетику реакции. Недостаток – изофермент из слизистой кишечника плохо гидролизует п-нитрофенилфосфат.

Клиническое значение. Увеличение активности происходит при заболеваниях костной системы: рахитах, болезни Педжета (деформирующее воспаление костей), остеогенной саркоме; при заболеваниях печени: механической желтухе (наиболее чувствительный тест для регистрации закупорки желчевыводящих путей). Вирусный гепатит – норма. Исследование изоферментов имеет существенное значение для диагностики злокачественных опухолей, определения локализации метастазов. Снижение активности в лейкоцитах регистрируется при болезни Дауна, лейкемии.

Кислая фосфатаза (К.Ф. 3.1.3.2). Наибольшее содержание данного фермента обнаруживается в предстательной железе, где активность в 1000 раз выше, чем в печени, селезенке, почках, костной ткани. Активность в нормальной плазме появляется после достижения половой зрелости. Оптимум рН составляет 5,0. Кислая фосфатаза относительно нестабильна при рН, превышающих 7,0. Эритроциты, лейкоциты, тромбоциты содержат значительное количество кислой фосфатазы (КФ), поэтому при хранении образца результаты искажаются за счет выхода фермента из форменных элементов, тогда как активность других изоферментов падает. Изофермент из клеток крови более устойчив к действию высоких рН. Если образцы необходимо хранить, то рекомендуется сразу отделить сыворотку от форменных элементов и закислить до рН 5,0-6,0.

Электрофорез определяет от 4-х до 14-ти полос активности КФ. Для определения источника фермента целесообразно использовать избирательное ингибирование. В клетках кислая фосфатаза локализована в основном в лизосомах. Эритроцитарный изофермент полностью можно ингибировать формальдегидом, а изоформу из предстательной железы – L-тартратом.

Определение активности. Используются те же субстраты, что и для определения ЩФ. В качестве буферов применяется ацетатный или цитратный со значением рН от 4,9 до 5,6. Об активности судят по накоплению фенола, если субстрат фенилфосфат, или по накоплению фосфата, если субстрат β-глицерофосфат.

Клиническое применение. В основном применяется для ранней диагностики и наблюдения за ходом лечения карциномы предстательной железы. Повышение активности регистрируется также при карциноме молочной железы и лимфобластной лейкемии.

5΄-Нуклеотидаза (К.Ф. 3.1.3.5). Фермент является фосфомоноэстеразой, специфически гидролизирующей нуклеозид-5΄-фосфаты. Типичными

73

субстратами являются аденозин-5΄-фосфат и инозил-5΄-фосфат. Сложность состоит в том, что те же субстраты гидролизует и щелочная фосфатаза.

Фермент активируется ионами магния и ингибируется ионами никеля. Есть практически во всех клетках, локализован в мембранах. Наибольшее количество обнаруживается в гепатоцитах, лейкоцитах, эритроцитах.

Клиническое значение. Фермент служит маркером структурной деградации фосфолипидного слоя мембран, так как его активность зависит от микроокружения. Кроме того, он одним из первых выходит из поврежденной мембраны. Часто используется для оценки функционального состояния печени при других заболеваниях, прямо не касающихся данного органа (инфаркт миокарда, инсульт), обнаружения метастазирования опухолей в печень. В лейкоцитах фермент определяет функциональную активность по производству активных форм кислорода («респираторный взрыв»), так как непосредственно связан с обменом аденозина, выполняющего регуляторную роль в нейтрофилах.

Определение активности. В качестве субстрата используют АМФ, ЩФ ингибируется добавлением ЭДТА, фермент активируется ионами магния. Активность определяют по количеству освобожденного фосфата за единицу времени.

α-Амилаза (К.Ф. 3.2.1.1). Открыта в 1833 г., гидролизует α-1,4-гликозидную связь в амилозе. Представляет собой эндогликозидгидролазу, для проявления активности необходимо присутствие хотя бы трех α-1,4-гликозидных связей. Конечные продукты гидролиза амилозы – мальтоза и мальтотриоза; крахмала – мальтоза, мальтотриоза, изомальтоза. Две связи на нередуцирующем конце и одна связь на редуцирующем конце устойчивы к действию амилазы.

Методы определения. Принцип определения основан на реакции крахмала с йодом. Обычно используется фосфатный буфер с рН 7,2, 0,24% раствор крахмала и 30-минутная инкубация при 370С. Затем количество оставшегося крахмала определяется по реакции с йодом. Интенсивность синего окрашивания измеряется фотометрически.

Фермент имеет малую молекулярную массу (48 кДа), это приводит к тому, что фермент легко фильтруется почечными клетками и появляется

вмоче. Основными источниками α-амилазы у человека являются соки поджелудочной и слюнных желез, незначительная активность обнаруживается

вдругих тканях. Активность амилазы значительно возрастает в присутст-

вии NaCl, оптимум рН колеблется от 6,5 до 7,5 в зависимости от индивидуальных особенностей фермента. Амилаза содержит 1 грамм-атом Са2+на 1 молекулу и ингибируется в присутствии ЭДТА, оксалоацетата, цитрата.

Ферменты из поджелудочной и слюнных желез не имеют существенных отличий, не различаются иммунохимически и почти идентичны по электрофоретической подвижности (располагается в области γ-глобулинов.

74

Клиническое применение. Повышение активности фиксируется при остром панкреатите (в 10-50 от нормы). Резко увеличивается также содержание фермента в моче. Тест применяется для дифференциальной диагностики приступа острого холецистита (нет повышения активности) и панкреатита, так как клинические симптомы схожи.

Интересным является факт обнаружения значительной активности в сыворотке крови некоторых людей, не страдающих панкреатитом, причем активность в моче остается в пределах нормы. Это явление получило название «макроамилаземия» и объясняется склонностью амилазы данных людей к образованию макромолекулярных комплексов с γ-глобулинами, которые не фильтруются почками.

β-Глюкуронидаза (К.Ф. 3.2.1.31). Фермент гидролизует большое количество алифатических и ароматических эфиров β-D-глюкуроновой и определенных эфиров β-галактуроновой кислот. β-Глюкуронидаза (β-ГУ) встречается практически во всех тканях, но особенно много ее в печени, где она распределена в различных субклеточных частицах.

β-ГУ проявляет свою активность при относительно низких значениях рН, имеет три оптимума рН для трех различных изоформ: 3,8; 4,5 и 5,2. Фермент специфически ингибируется сахарозо-1,4-лактином и инактивируется ионами тяжелых металлов.

Определение активности. Субстратами служат различные фенольные глюкурониды. Обычно после инкубации определяют фенол с реактивом Фолина-Чекалтэу. Если в качестве субстрата используется фенолфталеинглюкуронид, то применяется глициновый буфер с рН 10,4 и измеряют интенсивность розового окрашивания (λ550 нм). Следует помнить, что активность фермента в щелочной среде достаточно низка.

Клиническое применение. Основные заболевания, при которых отмечается повышение активности β-ГУ, – злокачественные заболевания и болезни печени. Активность β-ГУ прогрессивно нарастает во время беремен-

с N-концевыми остатками фенилаланина, триптофана, гистидина или тирозина.

Лейцинаминопептидаза широко распространена в тканях человека, причем наиболее богатые источники ее тонкий кишечник, почки и печень. Молекулярная масса фермента 80 кДа, он активируется ионами кальция, марганца и магния в зависимости от используемого субстрата и тканевого источника фермента. Ингибируют лейцинаминопептидазу цианиды и ЭДТА. Обнаружено существование множественных форм фермента в сыворотке крови человека, которые представляют собой изоферменты из пече-

75

ни, плаценты, почек, поджелудочной железы, кишечника. Больше всего в сыворотке изофермента из гепатоцитов.

Определение активности. Для определения активности используется субстрат L-лейцил-β-нафтиламид, количество отщепленного β-нафтиламида оценивается флуориметрически или колориметрически по реакции с соответствующимхромогеном.

Клиническое значение. Используется для диагностики заболеваний печени. Активность заметно повышена при механической желтухе, метастазах в печень, холециститах.

Аланинаминопептидаза (К.Ф. 3.4.1.2). Представляет собой фермент, гидролизующий N-концевые пептидные связи, в основном представленные остатком аланина. Больше всего фермента в тканях почек, в меньшей степени содержится в кишечнике, поджелудочной железе и гепатоцитах. В разных клетках встречаются различные изоферменты, в настоящее время выделены пять изоферментов. По своим свойствам встречающийся в сыворотке изофермент наиболее близок к гепатоцитарному.

Для определения активности используется субстрат L-аланин-β- нафтиламид.

Клиническое применение. Повышение активности в сыворотке крови отмечается при заболеваниях поджелудочной железы и печени, обычно сопровождается увеличением также активности щелочной фосфатазы.

Эндопептидгидролаза желудочного сока (пепсин) (К.Ф. 3.4.4.1). Ос-

новной фермент желудочного сока секретируется в виде неактивного предшественника – пепсиногена. Пепсиноген устойчив в нейтральной и слабощелочной среде. При попадании пепсиногена в кислую среду начинается активирование фермента, которое затем осуществляется аутокаталитически уже образовавшимся пепсином. Молекулярная масса пепсиногена составляет 48 кДа, пепсина 34 кДа, что свидетельствует о механизме активации по принципу ограниченного протеолиза. Наивысшая активность пепсина наблюдается в интервале рН 1,5-2,0, но имеется изофермент с оптимумом рН от 3,3 до 4,0. Кроме желудочного сока пепсиноген обнаруживается почти во всех тканях, но происхождение сывороточного фермента из желудочного сока.

Благодаря малой молекулярной массе пепсиноген легко фильтруется клубочками почечных канальцев и появляется в моче. Пепсин по свойствам представляет собой эндопептидгидролазу, расщепляющую пептидные связи, лежащие в глубине молекулы белка, поэтому для эффективного гидролиза необходима денатурация белковой молекулы под действием соляной кислоты желудочного сока. Природа аминокислотных остатков, образующих пептидную связь не имеет значения, то есть пепсин – неспецифическая эндопептидгидролаза.

В диагностических целях определяют активность фермента в основном в желудочном соке, реже в плазме или моче.

76

Определение активности. Метод основан на инкубации образцов с белковым субстратом (гемоглобин, казеин, альбумин) в термостате в течение достаточно длительного времени (2-4 часа) в кислой среде. Затем определяют (после удаления остатков белка) количество ароматических аминокислотных остатков с реактивом Фолина-Чекалтеу.

Трипсин и химотрипсин (К.Ф. 3.4.4.4) и (3.4.4.5). Оба фермента сек-

ретируются в виде неактивных предшественников. Трипсинген активируется специфической энтерокиназой, образующийся трипсин осуществляет дальнейшую активацию аутокаталитически. Процесс активации сопровождается отщеплением от трипсиногена гексапептида с N-конца. Так как молекулярная масса отщепляемого гексапептида незначительна, то молярная масса трипсина принимается за 23 800 Да. Химотрипсиноген активируется трипсином. При исследовании было выявлено, что оба фермента имеют идентичные активные центры, содержащие остатки серина и два гистидиновых остатка в петле, образуемой дисульфидными связями цистеинов.

Трипсин и химотрипсин действуют на пептидные связи различной химической природы: трипсин гидролизует пептидные связи, включающие в состав карбоксильные группы лизина и аргинина; химотрипсин – пептидные связи, образованные карбоксильными группами тирозина и фенилаланина. Оба фермента ведут себя как эстеразы и амидазы в такой же степени, как и пептидазы.

Трипсин стабилен в кислой среде и быстро разрушается при действии щелочей. Его оптимум рН составляет 8,0-9,0, но в этих условиях он, повидимому, подвергается самоперевариванию.

Оба фермента инактивируются ионами тяжелых металлов и тиоловыми реагентами (п-хлормеркуриобензоат), фосфоорганические соединения также блокируют их активность. Конкурентно ингибируют трипсин и химотрипсин диэтиловый эфир и ряд ароматических углеводородов. В сыворотке крови присутствуют ингибиторы трипсина белковой природы: α1- и α2-антитрипсины, концентрация их возрастатет при беременности и воспалительных процессах. Наследственная недостаточность α1-антитрипсина сопровождается ранним развитием эмфиземы (перерождение) легких.

Определение активности. В качестве субстратов применяют как искусственные – α-бензоил-L-аргининамид; N-ацетил-L-тирозин – так и белковые субстраты: гемоглобин, казеин, альбумин. О скорости гидролиза судят по накоплению пептидов и аминокислот. Эти методы для сыворотки не являются специфическими, поскольку в получаемые результаты включается также активность других пептидгидролаз, содержащихся в плазме крови.

Клиническое значение. Появление пищеварительных ферментов в плазме крови и моче может дать ценную информацию о состоянии желу- дочно-кишечного тракта в условиях патологии. Однако определить точно активность трипсина и других пептидгидролаз затруднительно, так как

77

мешает присутствие плазменных пептидаз. Трипсин в плазме взаимодействует с α2-макроглобулином, при остром панкреатите количество α2- макроглобулиновых центров у трипсина снижается. Хронические панкреатиты сопровождаются увеличением α2-макроглобулинсвязывающей способности трипсина.

Аргиназа (К.Ф. 3.5.3.1). Это фермент цикла мочевины, специфически гидролизует аргинин с образованием орнитина и мочевины. Наиболее богаты этим ферментом гепатоциты, так как цикл мочевины характерен только для этих клеток. В нормальной плазме не обнаруживается.

Очищенный фермент имеет молярную массу 140 кДа, активируется ионами двухвалентного марганца, L-лейцин и L-орнитин оказывают ингибирующий эффект. Оптимум рН наблюдается при 9,0-9,5.

Определение активности. Аргиназную активность обычно определяют при помощи измерения количества образующейся мочевины при инкубации ферментного препарата с аргинином. Определение в сыворотке требует освобождения от мочевины, которая всегда присутствует здесь. Это осуществляют с помощью гель-фильтрации.

Клиническое применение. Активность аргиназы в сыворотке крови является высокочувствительным индикатором повреждения клеток печени. Высокие значения аргиназной активности отмечаются при циррозе, гепатите. Несмотря на специфичность, сложность метода определения активности фермента затрудняет применение его в клинической практике.

Общая характеристика сывороточных ферментных тестов

Большинство ферментов, представляющих интерес с точки зрения диагностики, имеют молярную массу свыше 90 кДа и не могут проникать через клеточные мембраны и поступать во внутреннюю среду, если мембраны клеток не повреждены.

Уровень ферментативной активности в кровяном русле после повреждения ткани зависит в первую очередь от концентрации данного фермента

вткани, от степени повреждения клеток, от устойчивости и каталитической активности фермента вне клетки, скорости его разрушения и экскреции.

Механизмы выхода ферментов из клеток еще недостаточно изучены. Было показано, что этому могут способствовать гипоксия и аноксия, глюкозное голодание и высокие концентрации калия, уменьшение скорости производства АТФ. Sweetin и Thomson [1973] обнаружили, что значимые количества альдолазы и лактатдегидрогеназы не выходят из эритроцитов человека до тех пор, пока имеющаяся глюкоза не израсходована почти полностью, из чего следует вывод, что для сохранения ферментных белков

вклетках необходимо соответствующее количество АТФ. Учитывая тот факт, что клеточные мембраны содержат фосфолипиды, от состояния которых зависит мембранная проницаемость, изучали влияние фосфолипаз

78

на выход ферментов из лейкоцитов человека и лимфоцитов крысы. Фосфолипазы А и С усиливают выход внутриклеточных ферментов из обоих типов клеток, причем эффект более выражен для ферментов цитозоля [8]. Включение АТФ в среду инкубации защищало лимфоциты крысы от действия фосфолипазы А, вызывающей выход лактатдегидрогеназы. АТФ также уменьшает потерю ферментов лейкоцитов человека и лимфоцитов крысы при длительной инкубации в растворе Кребса-Рингера (370С). Таким же действием обладают УТФ и фосфоенолпируват. Важная роль АТФ в процессе выхода ферментов из клеток объясняет влияние гипоксии и глюкозного голодания. Высокие концентрации калия стимулируют действие К+, Na+-АТФ-азы, гидролизующей АТФ.

Вероятно, одним из первых последствий нарушения клеточных функций при заболеваниях являются поломки в системе сложных взаимосвязанных реакций энергетического катаболизма, ведущих к синтезу АТФ. Снижение скорости производства АТФ клеткой сопровождается повреждением мембран и способствует выходу прежде всего неструктурированных или плохо структурированных ферментов из клеток.

Для диагностических целей важна не только скорость поступления фермента из клеток и его источник, но и возможность выявления каталитической активности и скорость исчезновения фермента из кровяного русла. Данные механизмы также еще недостаточно изучены. Лабильность ферментного белка, поступившего из клеток, обусловлена сильным разведением, отсутствием необходимого микроокружения, коферментов и субстратов, модификаторов его активности, которые имеются в клетке. Фермент может быть расщеплен в плазме имеющимися протеазами. Показано, что Кm клеточных ферментов, поступивших в плазму крови, постепенно повышается, что свидетельствует о снижении сродства к субстрату и прогрессирующей деградации белка. За исключением некоторых ферментов

смалой молекулярной массой, которые фильтруются почками, моча может содержать только следы ферментов, поступивших в плазму из клеток. Возможно, ферменты захватываются клетками активного эпителия кишечника, где подвергаются расщеплению как обычные пищевые белки.

Приведенные факты указывают на то, что активность любого фермента есть функция скорости его выхода из клеток и скорости его исчезновения из кровяного русла. При острых состояниях происходит внезапное освобождение ферментов из поврежденных и омертвевших клеток, которое может продолжаться всего несколько часов.

Очень важным является в использовании ферментативной активности

сдиагностической целью понятие «границы нормы». Есть внушительный список факторов, влияющий на границы сывороторной активности ферментов у здоровых людей: возраст, пол, раса, масса тела, физическая активность, время суток, сезон. Установить эталонные значения очень трудно, а для некоторых тестов невозможно. Поэтому используются нормы,

79

полученные в конкретных условиях, конкретной лабораторией, а также границы нормальных значений, указанных в стандартно применяемых методах. Появление и исчезновение в сыворотке определенных ферментативных активностей при различных патологических состояниях называются ферментным спектром данного заболевания.

Рассмотрим примеры ферментных спектров характерные для сердеч- но-сосудистых заболеваний. Сердечная мышца использует глюкозу как основной источник энергии, которая окисляется по гликолитическому пути и в цикле трикарбоновых кислот. Кардиомиоциты не могут переносить гипоксию, так как гликолиз не способен обеспечить энергетические потребности сокращения миокарда, поэтому недостаток кислорода приводит к появлению болей, приступу ишемии. Важную роль в метаболизме кардиомиоцитов имеют реакции переаминирования и креатинкиназная реакция, позволяющая резервировать энергетические ресурсы на некоторое время в виде креатинфосфата. При инфаркте миокарда внезапная и полная закупорка коронарной артерии тромбом приводит к нарушению кровообращения в определенной зоне миокарда. Возникающая боль связана с некрозом ткани в этой зоне. Повреждение миокарда ведет к появлению ферментов из кардиомиоцитов в плазме крови. Их удаление идет с разной скоростью, поэтому для диагностики большое значение имеет временной фактор. Активность креатинфосфокиназы нарастает раньше других, определяется в первые 3-6 часов и иногда опережает явные нарушения ЭКГ. Максимальных значений активность КФК достигает через 24 часа и возвращается к исходным значениям к третьему дню (если нет рецидивов). Конечно, увеличение активности КФК – очень чувствительный тест, но на нее оказывают влияние физическая нагрузка, состояние щитовидной железы и внутримышечные инъекции лекарств. Наиболее надежным тестом, позволяющим также рассчитать зону некроза, служит определение МВ изофермента креатинфосфокиназы. В более поздние сроки наблюдается увеличение активности лактатдегидрогеназы и аспартатаминотрансферазы. Повышение активностей данных ферментов начинается через 6-8 часов после инфаркта и достигает максимума через 24-36 часов. Нормализация наступает к пятому дню. Упомянутые сроки могут варьировать у конкретных больных в зависимости от размера зоны некроза, наличия рецидивов, анамнеза.

Распространение инфаркта (расширение зоны некроза) приводит к появлению второго пика активности сывороточной АсАТ, это важный диагностический тест, поскольку интерпретация данных ЭКГ в данном случае затруднена за счет уже имеющихся изменений и лечения. Лактатдегидрогеназа содержится во многих клетках других тканей, поэтому важно исключить или учесть наличие других заболеваний. Эффективным является определение изофермента ЛДГ-1, содержание которого в кардиомиоцитах наибольшее.

80