2 курс / Микробиология 1 кафедра / Доп. материалы / Микра
.pdf-определяет фенотип организма
-лежит в основе эволюции всех клеточных форм жизни
7) РНК
-центральная роль в реализации генетической информации
-трансляция
-регуляция активности генов
-иногда фермент (рибозимы)
-иногда рецепторы (РНК-переключатели)
-мономеры и димеры переносят энергию (АТФ, ГТФ)
-сигнальные молекулы (Цамф)
-коферменты (НАД+, ФАД, коэнзим А)
8) Липиды
-фосфолипиды. Гликолипиды. Триглицериды
-формируют биологические мембраны
-барьер
-запасные вещества
9) Углеводы
-в виде полисахаридов в бактериях
-формируют капсулу, слизистые чехлы бактерий
-структурный компонент бактериальных биоплёнок
-состав ЛПС грамбактерий
-запасные вещества (крахмал, гликоген)
-остатки НК, пептидогликана, тейхоевых, липотейхоевых кислот
10) Пептидогликан
-уникальный компонент бактерий
-основа клеточной стенки бактерий
-механическая функция
Счастье любит смс и зачисление денег: 89015052596 (сбербанк онлайн)
Спасите нас от тараканов и моли, они сожрали всю крупу и все нервы
-барьер для проникновения крупных частиц
-формирование перетяжки при делении клеток
23. Основные требования, предъявляемые к питательным средам, их подразделение по консистенции, составу и назначению. Простые питательные среды, обогащённые питательные среды. Примеры, применение.
Основные требования к питательным средам:
1)Оптимальное содержание питательных веществ в легкоусваиваемой форме (органические источники углерода, минеральных солей, факторы роста)
2)Адекватные значения рН, ОВ потенциала
3)Достаточное содержание воды, стерильность
Разделение питательных сред по консистенции:
1)Жидкие среды (бульоны)
-трудность получения чистых культур микроорганизмов (микробные клетки распределяются по ее объему в виде суспензии, не формируют колонии)
+ удобство работы с большими и малыми объемами
Спктр применения: 1. Получение больших объемов микробной биомассы (промышленность)
2.Выделение микроорганизмов малых концентраций в больших объемах исходного материала (10 мл крови на 100 мл жидкой питательной среды)
3.Биохимическая идентификация бактерий с использованием коммерческих тест-систем
2) Плотные среды
добавляют в жидкие 1.5-2% агара (экстракт из морских водорослей, основной компонент агароза
плавится при 90 градусах
Счастье любит смс и зачисление денег: 89015052596 (сбербанк онлайн)
Спасите нас от тараканов и моли, они сожрали всю крупу и все нервы
застывает при 40 градусах
после застывания консистенция геля
агар не расщепляется большинством микроорганизмов
выступает в средах как инертный формообразующий компонент
заливают в чашки Петри
посев микроорганизмов бактериологической петлёй/растирание суспензии с помощью шпателя
питательные вещества легко диффундируют
движение бактерий внутрь среды и по ее поверхности затруднено
происходит образование колоний на поверхности среды
каждая колония – чистая культура
+простота механического разобщения микроорганизмов пи выделении чисты культур, для подсчета колоний
+можно определить количество жизнеспособных микроорганизмов
3)Полужидкие среды
-0.3-0.9% агара
-для культивирования спирохет, определения подвижности бактерий, титрования бактериофагов
Получение всех сред:
Сухие порошки растворяют в воде, расплавляют агар в его составе,
стерилизация, асептически добавляют нетермостойкие добавки, разливают
стерильную лабораторную посуду
Классификаци питательных сред по назначению:
1) Простые (основные, универсальные)
Счастье любит смс и зачисление денег: 89015052596 (сбербанк онлайн)
Спасите нас от тараканов и моли, они сожрали всю крупу и все нервы
-в основе пептоны (готовятся из природных источников с высоким содержанием белка, путем их частичного гидролиза, который осуществляется обработанной трипсином или пепсином)
-пептоны содержат АК, пептиды, липиды, витамины, минеральные вещества
-к пептонам добавляют хлорид натрия
-иногда дрожжевой или мясной экстракт
-подходит для культивирования широкого спектра неприхотливых микроорганизмов (Escherichia coli, Staphylococcus Aureus, Pseudomonas aeruginosa)
-мясо-пептонный агар, мясо-пептонный бульон, питательный агар, триптон-соевый агар, ГРМ-агар (гидролизат рыбной муки)
2) Обогащенные питательные среды
-компоненты простых сред + дополнительные ингредиенты, стимулирующие рост прихотливых организмов
-«шоколадный» агар (эритроциты, разрушенные нагреванием, и вещества из них: гемоглобин, НАД): Haemophilus influenzae, Neisseria meningifdis
-бульон с сердечно-мозговой вытяжкой (для Streptococsuc pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningifdis, Bacteroides fragilis)
3) Селективные питательные среды
-подавляют рост сопутствующей микрофлоры
-разные способы создания неблагоприятных условий
Минимальные питательные среды
-имеют строго определенный химический состав благодаря использованию выосокоочищенных синтетических компонентов
-обычно содержат одно или несколько органических веществ, набор минеральных солей
Счастье любит смс и зачисление денег: 89015052596 (сбербанк онлайн)
Спасите нас от тараканов и моли, они сожрали всю крупу и все нервы
-селективность достигается за счет нехватки источников энергии, АК, витаминов для посторонних микроорганизмов
-среда, не содержащая триптофан, будет ингибировать рост штаммов несинтезируюих самостоятельно триптофан
-в исследовании метаболизма и генетики бактерий
Питательные среды с нестандартным рН
-для избирательного выделения ацидофильных или алкалифильных микроорганизмов
-Lactobacillus (закисленные), Vibrio cholerae (щелочные)
Питательные среды с селективными добавками
-содержат вещества, токсичные для нежелательных микроорганизмов
-среды с желчью для выделения сальмонелл
-высокая концентрация соли для стафилококков
-в качестве селективных добавок используют антибиотики
4) Дифференциально-диагностические питательные среды
- состав данных сред подобран так, чтобы микроорганизмы с разными физиолого-биохимическими свойствами различались внешне по характеру роста (окрашивали среду в разные цвета или отличались бы по цвету колоний)
Среды, содержащие субстрат и индикатор
-позволяю определить способность бактерий утилизировать соответствующие субстраты
-углеводы (сахароха, лактоза, арабиноза) / многоатомные спирты (сорбитол, маннитол, инозитол) могут подвергаться брожению с образованием в качестве конечных продуктов органических кислот, закисление среды
-лимонная кислота, мочевина, аргинин, орнитин, лизин приводят к
защелачиванию при их расщеплении бактериями
Счастье любит смс и зачисление денег: 89015052596 (сбербанк онлайн)
Спасите нас от тараканов и моли, они сожрали всю крупу и все нервы
- соответствующие изменения рН приводят к изменению цвета добавленного в среду вещества-индикатора
Среды с хромогенными субстратами
- содержат вещества, которые дают окрашенные продукты при их расщеплении бактериальными ферментами (X-Gluc расщепляется бетаглюкуронидазами с образованием синего пигмента)
Среды для выявления продукции H2S
-Содержат SO42- или SO32- в качестве источника серы
-Содержат ионы железа
-Производимые бактериями ионы серы будут образовывать черный и нерастворимый сульфид железа
!ИСПОЛЬЗУЮТ КОМБИНАЦИИ ПЕРЕЧИСЛЕННЫХ ПОДХОДОВ В ОДНОЙ
ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЕ ДЛЯ ДИФФЕРЕНЦИРОВКИ СРАЗУ НЕСКОЛЬКИХ ГРУПП
ОРГАНИЗМОВ (КОМБИНАЦИИ ХРОМАГЕННЫХ СУБСТРАТОВ)
5) Питательные среды с комбинированными свойствами
- основная группа питательных сред
Кровяной агар и его производные
– одновременно обогащенные и дифференциально-диагностические питательные среды
-5-10% крови, которая стимулирует рост разных прихотливых микроорганизмов
-дифференциально-диагностические свойства проявляются в образовании зон гемолиза вокруг колоний некоторых микрорганизмов, хорошо заметных на фоне непрозрачно-красного кровяного агара
Альфа-гемолиз: зеленовато-коричневая зона в результате перехода гемоглобина в метгемоглобин, Streptococcus pneumoniae
Бета-гемолиз (полный гемолиз): полное разрушение эритроцитов, выглядит как прозрачная зона вокруг колоний, характерен для streptococcus pyogenes и Staphylococcus aureus
Счастье любит смс и зачисление денег: 89015052596 (сбербанк онлайн)
Спасите нас от тараканов и моли, они сожрали всю крупу и все нервы
Желточно-солевой агар (среда Чистовича)
-для выделения золотистых стафилококков
-селективная + дифференциально-диагностическая питательная среда
-селективный компонент (7.5-10% NaCl), ингибирует рост большинства бактерий кроме стафилококков
-дифференциально-диагностические свойства обеспечиваются яичным желтком (для стафилококка характерна продукция лецитиназы, расщепляющейт лецитин желтка, проявляется образованием венчиков вокруг колоний)
Маннитол-солевой агар (среда Чапмэна)
-содержит высокую концентрацию соли в качестве селективного компонента
-сбраживание маннитола стафилококком приводит к изменению цвета индикатора вокруг колоний ( с красного на желтый)
Среда Эндо
-для выделения Enterobacteriaceae (роды: Escherichia, Shigella, Salmonella, Yersinia)
-фуксинсернистая кислота (реактив ШИФФА) выступает как селективный компонент, подавляет рост посторонних грам+ организмов
-розовый цвет среды
-лактозанегативные бактерии (не сбраживают лактозу) образуют прозрачные колонии)
-лактозапозитивные бактерии – пурпурные с металлическим блеском
-аналог среды Эндо – среда Левина (EMB-агар), вместо фуксинсернистой кислоты содержит красители: эозин, метеленовый синий, формирующие темный осадок с металлическим блеском при снижении рН вокруг лактозапозитивных колоний
24. Селективные питательные среды. Примеры,
применение.
Селективные питательные среды
Счастье любит смс и зачисление денег: 89015052596 (сбербанк онлайн)
Спасите нас от тараканов и моли, они сожрали всю крупу и все нервы
-подавляют рост сопутствующей микрофлоры
-разные способы создания неблагоприятных условий
Минимальные питательные среды
-имеют строго определенный химический состав благодаря использованию выосокоочищенных синтетических компонентов
-обычно содержат одно или несколько органических веществ, набор минеральных солей
-селективность достигается за счет нехватки источников энергии, АК, витаминов для посторонних микроорганизмов
-среда, не содержащая триптофан, будет ингибировать рост штаммов несинтезируюих самостоятельно триптофан
-в исследовании метаболизма и генетики бактерий
Питательные среды с нестандартным рН
-для избирательного выделения ацидофильных или алкалифильных микроорганизмов
-Lactobacillus (закисленные), Vibrio cholerae (щелочные)
Питательные среды с селективными добавками
-содержат вещества, токсичные для нежелательных микроорганизмов
-среды с желчью для выделения сальмонелл
-высокая концентрация соли для стафилококков
-в качестве селективных добавок используют антибиотики
25. Дифференциально-диагностические среды. Примеры,
применение.
Дифференциально-диагностические питательные среды
Счастье любит смс и зачисление денег: 89015052596 (сбербанк онлайн)
Спасите нас от тараканов и моли, они сожрали всю крупу и все нервы
- состав данных сред подобран так, чтобы микроорганизмы с разными физиолого-биохимическими свойствами различались внешне по характеру роста (окрашивали среду в разные цвета или отличались бы по цвету колоний)
Среды, содержащие субстрат и индикатор
-позволяю определить способность бактерий утилизировать соответствующие субстраты
-углеводы (сахароха, лактоза, арабиноза) / многоатомные спирты (сорбитол, маннитол, инозитол) могут подвергаться брожению с образованием в качестве конечных продуктов органических кислот, закисление среды
-лимонная кислота, мочевина, аргинин, орнитин, лизин приводят к защелачиванию при их расщеплении бактериями
-соответствующие изменения рН приводят к изменению цвета добавленного в среду вещества-индикатора
Среды с хромогенными субстратами
- содержат вещества, которые дают окрашенные продукты при их расщеплении бактериальными ферментами (X-Gluc расщепляется бетаглюкуронидазами с образованием синего пигмента)
Среды для выявления продукции H2S
-Содержат SO42- или SO32- в качестве источника серы
-Содержат ионы железа
-Производимые бактериями ионы серы будут образовывать черный и нерастворимый сульфид железа
!ИСПОЛЬЗУЮТ КОМБИНАЦИИ ПЕРЕЧИСЛЕННЫХ ПОДХОДОВ В ОДНОЙ
ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЕ ДЛЯ ДИФФЕРЕНЦИРОВКИ СРАЗУ НЕСКОЛЬКИХ ГРУПП
ОРГАНИЗМОВ (КОМБИНАЦИИ ХРОМАГЕННЫХ СУБСТРАТОВ)
26. Среды с комбинированными свойствами. Примеры,
применение.
Питательные среды с комбинированными свойствами
Счастье любит смс и зачисление денег: 89015052596 (сбербанк онлайн)
Спасите нас от тараканов и моли, они сожрали всю крупу и все нервы
- основная группа питательных сред
Кровяной агар и его производные
– одновременно обогащенные и дифференциально-диагностические питательные среды
-5-10% крови, которая стимулирует рост разных прихотливых микроорганизмов
-дифференциально-диагностические свойства проявляются в образовании зон гемолиза вокруг колоний некоторых микроорганизмов, хорошо заметных на фоне непрозрачно-красного кровяного агара
Альфа-гемолиз: зеленовато-коричневая зона в результате перехода гемоглобина в метгемоглобин, Streptococcus pneumoniae
Бета-гемолиз (полный гемолиз): полное разрушение эритроцитов, выглядит как прозрачная зона вокруг колоний, характерен для streptococcus pyogenes и Staphylococcus aureus
Желточно-солевой агар (среда Чистовича)
-для выделения золотистых стафилококков
-селективная + дифференциально-диагностическая питательная среда
-селективный компонент (7.5-10% NaCl), ингибирует рост большинства бактерий кроме стафилококков
-дифференциально-диагностические свойства обеспечиваются яичным желтком (для стафилококка характерна продукция лецитиназы, расщепляющей лецитин желтка, проявляется образованием венчиков вокруг колоний)
Маннитол-солевой агар (среда Чапмэна)
-содержит высокую концентрацию соли в качестве селективного компонента
-сбраживание маннитола стафилококком приводит к изменению цвета индикатора вокруг колоний ( с красного на желтый)
Счастье любит смс и зачисление денег: 89015052596 (сбербанк онлайн)
Спасите нас от тараканов и моли, они сожрали всю крупу и все нервы