Добавил:
kiopkiopkiop18@yandex.ru Вовсе не секретарь, но почту проверяю Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

2 курс / Микробиология 1 кафедра / Доп. материалы / Mechnikov I.I. _Nevospriimchivost v infekcionnyx boleznjax

.pdf
Скачиваний:
0
Добавлен:
24.03.2024
Размер:
32.21 Mб
Скачать

272

ГЛАВА Vlll

твор ·поваренной соли, последняя вызывает наименее сильный фаголиз, хотя еще и достаточно явный. Тотчас после впрыс­ кивания жидкостей количество лейкоцитов в брюшной лимфе

очень значительно .уменьшается, и клетки эти можно найти

сое.циненными в кучки на сальнике.

Многие из них обнаруживают явные признаки ослабле­ ния и частичного разрушения. Рядом с лейкоцитами нахо­

дятся фибринные массы; это подтверждает, что часть лейко­

цитов подверглась сильному повреждению и выпустила

фибрин-фермент, вызвавший свертывание фибi>ина. Когда П н е р а л л и н и впрыскивал жидкости, заключающие су­

спендированные красящие вещества в порошке, как тущь

IJЛИ киноварь, то он видел, что вещества эти скопл~лиеь на

сальнике, который акрашивалея в черный или .красный цвет.

Микроскоnическое исследование обнаруживало слабый фаго­ цитоз и множество свободных красящих. зерен среди фнбрин­

яых волокон.

Лейкоциты, высвобождающие фибрин-фермент во время

этого фаголиза, могут точно так же выделять известное ко­

личество своего

микроцитаза. Последний, переходя в

брюш·

ную жидкость,

и вызывает

пфейфферовское явление.

Если

предположение

это верно,

то устранение фаголиэа должно

бы мешать зернистому перерождению вибрионов. Гипотезу эту .нетрудно проверить, так как мы имеем средство поме­ шать или по крайней мере значительно уменьшить фаголиэ.

В работе, выполнеп.ной в лаборатории П ф е й ф ф е р а,

И с а е в 1 показал, что впрыскивание физиологической воды, бульона, мочи и т. д. возбуждает лейкоциты и притягивает

значительное количество их в брюшную полость. Легко было предвидеть, · что такое впрыскивание у;меньшит фаголиз.

И в самом деле, если сначала' впрыснуть несколько кубиче­

ских сантиметров

физиологической

воды или

свежего буль­

ОI~а в брюшную полость морской свинки и на следующий день

повторить ту же

операцию, то можно удостовериться, что

фаголиз гораздо

слабее, чем после

первого

впрыскивания.

 

...

 

 

1 Zeitschrift fiir Hygierie, 1894, т. XXIV, стр. 287.

ОБЗОР ФАКТОВ ПРИОБРЕТЕННОГО ИММУНИТЕТА

273

П и е р а л л и н и, повторивший эти опыты, наблюдал, что

фагоцитоз красящих зерен гораздо полнее у морских сви­

нок, подготовленных предварительным впрыскиванием в

брюшную полость. В этом случае количество фибрина на

сальнике гораздо слабее и все происходящие при этом явле·

ния вообще показывают, что повреждение лей.коцитов у этих

морских свинок очень ослаблено.

Нам удалось установить, что в том случае, когда фаго­

лиз ослаблен таким образом, пфейфферовское явление не

воспроизводится или же обнаруживается в очень слабой

степени. Если опыт удался, то жидкость, взятая из брюшной·

полости морской свинки, подготовленной накануне и приви­ той холерной культурой, непрозрачна и rуста, как гной. Она заключает множество хорошо сохраненных лейкоцитов, боль­

шое число которых уже через несколько минут наполняется

вибрио·нами. Плазма этого экссудата заключает много виб­

рионов, сохранивших свой нормальный вид и, за немногими

исключениями, не превращенных в зерна.

Немного позже не остается вовсе свободных вибрионов:

все они внутри лейкоцитов.

П ф е й ф ф е р 1 восстал против вышеприведенных мной

фактов, потому что ему никогда не удавалось помешать зер­

нистому перерождению вибрионов, несмотря на предвари­ тельное впрыскивание хлористого натрия. А б е ль 2, повто­

ривший те же опыты, высказывает среднее мнение: в то

время как у морских свинок, подготовленных впрыскиванием

накануне, он наблюдал зернистое превраiцение части вибрио­

нов, другая часть их становилась добычей лейкоцитов. Дело в том, что устранение фаголиза требует особенных

условий:· впрыскиваемый бульон должен быть свежеприготов­

ленным и нагретым до 37-39° до введения в брюшную по­ лость. Даже при таких предосторожностях случается иногда,

что опыт нехорошо удается. Делая его, следует руководство­

ваться видом брюшной жидкости, которую берут с помощью

маленьких стеклянных трубочек. Если жидкость, дроникаю-

1 Deutsche medi;lnlsche Wochenschrlft,

1896, стр.

120•.

ZentraiЬiatt fiir Bakteriologie, 1896,

т. ХХ, стр.

761.

274

ГЛАВА VIII

щая в трубку, прозрачна или же мутна, то это указывает

· на то, . что nроизошел фаголиз, несмотря на nодготовитель­

ное впрыскивание.

Опыт хорошо удается в случае, когда брюшной экссудат

очень мутен и походит на гной.

Так как очень существенно установить совместное уст­

ранение пфейфферовского явления и фаголиза, то я просил

Г а р н ь е 1. выnолнить новые оnыты с цеJ}ью окончательно

решить этот вопрос. Он испробовал целый ряд жидкостей

для nредварительной nодготовки животных и nок.азал, что

свежий бульон дает наилучшие результаты. У морских сви­

нок, у ·которых удалось свести фаголиз до минимума, фаго­

цитоз наступал после вnрыскивания вибрионов. Уже от двух

до nяти минут вслед за тем множество ·микробов находилось

внутри лейкоцитов; свободные же микробы в то время были

малочисленны и не nретерпевали nфейфферовского nревра­

щения.

Г а р н ь е nрисоединяет к своей статье фотографическИе

снимки лейкоцитов, nереnолненных вибриоltами, вид которых

должен убедить наиболее скептического читателя. Со вре­

мени п.оявления этой статьи не было высказано ни одноГо

возражения, так что воnрос об устранении зернис_того nре­ вращения вибрионов может считаться окончательно установ­ ленным. Я, вnрочем, показал это многим наблюдателям, ко­ торые могли удостовериться в действительности этого фа,кта.

Итак, следует признать, что nфейфферовское явление про­ исходит в брюшной полости только под условием фаголиза.

И так как ввиду этого очень вероятно, что микроцитаз.

необходимый для nревращения вибрионов, высвобождается

из поврежденных лейкоцитов, то следует nроверить это nред­

положение рядом других опытов.

Если гипотеза эта верна, то nфейфферовское · явление

не должно было бы совершаться в тех частях тела, где нет

или почти нет предсуществующих лейкоцитов. Условия эти могут быть выполнены при впрыскивании холерных вибрио­

нов в подкожную клетчатку или в""переднюю камеру глаза

1 Annales de I'lnstitut Pasteur, 1897, т. Xl, стр. 767.

ОБЗОР ФАНТОВ ПРИОБРЕТЕННОГО ИММУНИТЕТА

27,5

морских свинок, хорошо вакцинированных против холерного

вибриона. При этих условиях вибрионы сохраняют свою нор·

мальную форму и никогда не превращаются в зерна, как мне

удалось показать это в своей работе о внеклеточном разру·

шении холерных вибрионов.

П ф е й ф ф ер возражал про:rив этого результата, утверждая, что под кожей вакцинированной морской свинки

правильным образом происходит зернистое преврашение,

хотя слабее и позже, чем в брюшной полости.

Противоречие между опьrrами П ф е й ф ф ер а и моими объясняется следующим образом.

l(огда прививают вибрионы в подкожную клетчатку или когда берут образовавшийся в ней экссудат, то иногда про·

изводят при этом маленькие кровоизлияния: это вызывает

освобождение известного количества микроцитаза из лейко­

цитов, находящихся в кровоизлиянии и также выделяющих в

излившуюся кровь часть своего фибрин-фермента. Когда

оnыт удается, т. е. когда не происходит никакого кровоизлия­

ния во время оперирования, то экссудат nодкожной клет­

ча.тки содержит одни нормальные вибрионы без следа nфейф·

феровскоrо явленАя в жидкости.

Если бы настоящей nричиной nриобретенного иммуни­

тета было внеклеточное зернистое превращение вибрионов, то

отсутствие этого явления в ·nодкожной клетчатке вакцини· ровэнных морских свинок должно было бы nривести к

смерти.

В действительности же ничего nодобного не происходит,

и животное отлично выдерживает прививку вибрионов. Вы­ вод этот, однако, допускает серьезное возражение. Так как

вбольшинстве случаев холерный вибрион, привитый под

кожу, не в состоянии вызвать смертельной инфекции лаже у

новых, не вакцинированных, свинок, тd nример этот надо от­

нести к естественному иммунитету. В действительности же

этот роц иммунитета может зависеть от других причин, чем

приобретенная невосприимчивость.

Чтобы ответить на это возражение, пришлось выбрать

такую расу вибрионов, ко;ТОRаЯ была бы сnособна убивать

при nодкожном впрыскивании.

276

ГЛАВА VIII

М е н и л ь 1 взялся в моей лаборатории выполни.ть опы­ ты с вибрионом М а с с а у а, призванным некоторыми наблю­

дателями за холеравидного вибриона.

Привитый под кожу новых морских свинок, он вызы­

вает образование отека, в котором кишат микробы; в<;коре

,они распрьстраняются в организме и убивают его в 24 часа,. И, однако, вибрионы эти, впрыс~утые под кожу хорошо вак­

цинированной морской свинки, вполне переносятся · ею, без

малейшего пфейфферовского явления. При этих условиях

часть вибрионов сначала соединяется в кучки, хотя остается довольно значительная часть. изолированных и свободных

микробов. Через несколько часов после прививки числq

скоплений уменьшается; ~золированные вибрионы становятся многочисленнее, что указывает на известное приспособление

микроба к среде, в которой он находится. Но вибрионы ни·

когда не превращаются в зерна, пока они остаютс'я свобод­

ными в экссудате подкожной клетчатки.

С а л и м б е н и 2 в работе, выполненной в моей лабора­ тории, хотел убедиться, происходит ли пфейфферовское явле­ ние в подкожной клетчатке лошади, усиленно иммунизиро­

ванной против холерного вибриона. Животному этому в те·

чение 14 месяцев прививали его в значительном количестве

и серум крови очень сильно и быстро превращал вибрионов

в зерна. И тем не менее, несмотря на столь благоприятные

условия для пфейфферовского явления, последнее никогда

не происходило под кожей лошади. Впрыснутые вибрионы

через короткое время становились совершенно неподвиж­

ными, но сохраняли свою форму и жили в течение несколь­

ких часов. Экссудат, взятый через 48 часов после прививки,

давал еще культуру холерного вибриона.

Так как в nереднюю глазную ·камеру легче ввести хо­

л'ерные вибрионы, чем под кожу, не производя кровоизлия­

ния, и. так как глазная влага не содержит фиксатора, то

П ф е й ф ф е р

сам мог убедиться

в

отсутс·rвии зернистого

иревращения

в

ней. НаблюденJ,~.е

этого

факта

не · представ·

1

Attnales

de

l'lnstitut Pasteur, 1896, т. Х,

стр. 315.

 

11

Annales

de

I'Institut Pasteur, 1898,

т.

XII, стр.

199.

ОБЗОР ФАНТОВ ПРИОБРЕТЕННОГО ИММУНИТЕТА

277

ляет никакого затруднения, и можно видеть в течение дол­

гого времени, как свободные и вполне nодвижные вибрионы

быстро двигаются в глазной влаге.

Глазной' экссудат заключает много таких живых вибрио­

нов ·и сделаные из него посевы прорастают даже тогда, когда

жиДкость взята из глаза через несколько дней после прививки.

Совокупность всех этих тщательно установленных фак­

тов вполне доказывает, что микродитаз в жидкостях живого

животного находится только там, где есть много nредсуще­

ствующих лейкоцитов и при условии более или менее силь­

ного фаголиза. Вывод этот можно подтвердить опытом,

имеющим решающее значение. Если хорошо вакцинированной

против хо;Iерного вибриона морской свинке, серум которой in vitro очень быстро производит пфейфферовское явление, впр·ыснуть эмульсию этих микробов прямо в вену, то послед­

ние не претерпевают зернистого перерождения.

Опыт этот быЛ выполнен и описан Б о р д э 1Впрыснув

в яремную вену хорошо вакцинированной против холерного

вибриона морской свинки эмульсию этого микроба, он вскрыл

животное через полчаса и нашел в крови сердца вибрИоны,

не изменившие свою форму и способные окрашиваться мети­ леновой синькой. Посевы из крови ~ердца, из печени и се­

лезенrш дали культуры этих вибрионов. У другой, гипервак­

цинированной к этому микробу и привитой тем же способом морской свинки кровь, взятая .вскоре (4-15 минут) затем,

содержаЛа, как было видно на nрепаратах, окрашенных ме­ тиленовой синькой, хорошо окрашенные вибрионы; не изме­ нившие своей формы и. совершенно неповрежденные.

Это служит наиболее прямым доказательством отсут­

ствия пфейфферQвского яВления в кровяной жндкос:ги живого

животного, имеющего очень сильно развитую искусственную

невосприимчивость. Не изменившие форму вибрионы находи­

лись внутри лейкоцитов.

Л е в а·д и т и 2 повторил эти опыты у меня в лаборато­ рии. Он разнообразил условия, при которых впрьiскивал виб-

1 Annales de Societe des sciences medicales et naturel!es de Bruxelles, 1895, т. IV.

111 Annales de l'lnstitut Pasteur, 1901, т. XV.

278

ГЛАВА VIII

рионы в кровяные сосуды. Иногда ему удавалось наблюдать

фаголиз лейкоцитов в кровИ и их почти полное исчезновение

из периферического кровообращения.

В этих случаях поврежденные лейкоциты .скоплялись в

легочных капиллярах, причем множество их окружало массу

в•1брионов, превращенных в зерна. Но фаголиза можно легко избегнуть, подготовив животных впрыски~анием физиологи­

ческой воды или бульона. При эти:к условиях фагоциты остаются в кровяном потоt<:е и вскоре поглощают вибрионов.

Но, в то время как вибрионы, остающиеся еще свободными

вкровяной плазме, сохраняют неприкосновеннь1ми свою

форму и способность окрашиваться, те из них, которые за­

ключены внутри микрофагов, большей частью превращены в

зерна. Быстрота, с которой фагоциты эти поглощают и видо·

изменяют вибрионов, поистине удивительна.

Итак, в этом случае, представляющем нам типичный при­

мер реакции организма при приобретенном иммунитете, мы

видим очень резкий и почти мгновенный фагоцитоз. Процесс

этот тот же, как и описанный нами у вакtrинированных мор­ ских свинок, у которых фаголиз отсутствовал вследствие под­ готовительных впрыскиваний. В подкожной клетчатке и в передней камере глаза, где пфейфферовское явление по­ стояннQ отсутствует, фагоцитоз следует своему обыкновен­ ному nути и приводит к уничтожению вибрионов. Результат этот был много раз подтвержден, как это видно из работ

Б о р д э, М е н и л .и и С а л и м б е н и.

Стоит TOJJЬKO сравнить распространенность пфейфферов­

ского явления с фагоцитозом у животных, иммунизированных против холерного вибриона, чтобы убедиться в ограничен­

ности первого явления и в общности второго. МоЖно было

бы противоnоставить этому последнему выводу отсутствие

поглошения вибрионов. в брюшной жидкости морских сви­

нок, иммунизированных, но не предохраненных против фа­

rолиза.

Когда вскоре после впрыскивания вибрионов в брюшную

...

полость из нее вытягивают немного перитонеального экссу-

дата помощью тоненькой трубочки, то действительно набл.ю­ дают одно только очень сильное пфейфферовское явление;

ОБЗОР ФАКТОВ ПРИОБРЕТЕННОГО ИММУНИТЕТА

279

фагоцитоз же почти или вполне оrсутствует. Но этот способ

не удовлетворителен. l{ля того чтобы составить себе понятие о том, что действительно происходит в брюшной полости,

необходимо вскрыть животное и тщательно осмотреть брю­

шину и особенно сальник.

Как было показано сначала М а к с о м Г руб ер о м\ а

позднее К а н т а кузен о м 2, сальник в этом случае покрьrr то.1стым слоем. соДержащим большое количество лейкоцитов,

часть которых наполнена вибрионами. Кроме того, слой этот

заклюttает массу вибрионов, отчасти превращенных в зерна,

отчасти агглютинированных или изолированных и не изме­

нивших своей формы вибриона. С течением времени фагоци­

тоз становится все более и более резким, так что невоз­

можно отрицать его существование или же приписывать ему

второстепенную роль. ·

Мы видели, что устранение пфейфферовского явления в

брюшной полости и в крови или же полное отсутствие его в nодкожной клетчатке и в передней глазной камере tшсколько не лишало вакцинированную свинку ее приобретенного имму.

нитета. Она отлично выносит прививку вибрионов, причем

последние в жидкостях ее не превращаются в зерна.

И, однако, превращение это существует, но исключительно внутри фагоцитов. Как было уже изложено относительно

естественной невосприимчивости (глава VI, VII), nоглощен­

ные микрофагами вибрионы почти тотчас претерnевают в них совершенно сходное пзменение формы с тем, которое

наблюдается при настоящем пфейфферовском явлени·и.

Микрофаги часто наполнень1 множеством зерен, nронешед­ ших из поглошенных вибрионов, -которые вскоре совершенно

перевариваются.

Этот постоянный nри фагоцитозе вибрионов факт дает

нам еше лишнt:'е доказательство микрофагнаГо происхожде­

ния микроцитаза.

Если пфейфферовское явление представляет только част­

ный

случай, .

при котором зернистое перерождение виб-

1

Milnchener

medizinische Wochenschrift,

1896,

стр. 277 и 310.

2

Annales de

l'lnstitut Pasteur, 1898, т.

Xll,

стр. 273.

280

ГЛАВА VIII

рионов происходит в жидкости, содержащей микроцитаз, 1'0

совершенно естественно, что устранение его не. влечет за

собой смертельной инфекции предохраненных животных. На­

оборот, если столь распространенная фагоцитарная реакция

играет действительно существенную роль в приобретенном

иммунитете, то все, что мешает ей, должно в то же время

нарушать и невосприимчивость..С целью 'разрешить эту за­

дачу I< а н т а к уз е н 1 предпринял в моей лаборатории по­

дробное исследование на этот счет.

Он установил, что впрыскивание опиума в несмерте.'lьной

дозе наркотизирует морскую свинку и в то же время оста­

навливает подвижность лейкоцитов.

Еr~и под кожу вакцинированной морскоn свинки ввести маленькие стеклянные трубочки с холерными вибрионами,

то у ненаркотизированного животного они наполняются мно·

жеством лейкоцитов. У морской же свинки, получившей

опиум, введенные трубочки в течение нескольких часов не заключают лейкоцитов и клетки эти проникают в них только позднее. Итак, когда I< а н т а кузен впрыскивал в брюш­ ную полость прочно вакцинированной морской свинки боль­

шую дозу холерного вибриона, то животное легко выносило прививку. Но свинки эти, подверженные влияниiо . опиума, умирали от такой же. дозы вибрионов:

Несмотря на значительное расширение и гиперемию со­

судов и на сильное увеличение количества лейкоцитов крови,

в первые часьr после впрыскивания опиума у наркотизиро­

ванных животных не происходит диапедеза. Только ·позднее

(через 5-6 часов после впрыскивания). в брюшной полости начинают появляться лейкоциты. Вибрионы пользуются nе­ риодом бездействия фагоцитов ~ размножаются, сохраняя свою подвижность и способность окрашиваться Qсновными анилиновыми красками. I<огда запоздалые лейкоциты прите­

кают в брюшную полость, они находят ее уже наводненной

массой вибрионов. Несмотря на это, лейкоциты, а именно ·

микрофаги, поглощают г.Ромадное количество микробов. Это,

однако, не мешает гибели морских свинок, хотя и наступаю·

1 Annales de l'lnstitut Pasteur, 1898, т. Xll, стр. 288.

ОБЗОР ФАКТОВ ПРИОБРЕТЕННОГО ИММУНИТЕТА

281

щей несколько часов nозднее, чем у непредохраненных сви­ детелей.

В минуту смерти экссудат не содержит больше свобод­ ных вибрионов, так как все они поглощены микрофагами,

внутри которых nодверглись зернистому превращению. При

вскрытии животного на сальнике наблюдается большое ко~

личество маленьких вибрионов, никогда не встречающихся

уненаркотизированных животных.

Итак, достаточно было только на несколько часов за­

медлить фагоцитарную реакцию, для того чтобы прочно вак­

цинированные морские свинки погИбли ·от вибрионов. По­

нятно, что ввиду такого результата можно, не колеблясь, приписать фагоцитозу гораздо более существенную роль в приобретенной невосприимчивости, чем пфейфферовскому

явлению.

Изучение других болезней, вызванных вибрионами,

только подтверждает общие выводы, вытекающие из подроб­

ноrо исследования внутренних nроцессов nриобретенной не­

восnриимчивости к холерному вибриону. Мы должны здесь

наnомнить читателю открытие Бери н г а и Н и с э н а _очень резкой бактерицидной способности кровяной сыворотки мор­

ских свинок, предохраненных nротив гамалеевского вибри­

она. В те времена, когда впервые был найден этот факт, :можно было думать, что сnособность крови убивать вибрио­

нов могла одна, сама по себе, объяснить приобретение имму­

нитета.

Но сравнительное изучение явлений, происходящих вне

живого организма и внутри него, вскоре доказа-ло неоснова­

тельность этой гиnотезы.

В то время как вибрионы, посеянные в серуме гипервак­

цинированных морских свинок, погибают в нем в очень

большом количестве, а иногда и вnолне, те же микробы, при­

витые в подкожную клетчатку тех же животных, остаются

живыми в течение нескольких дней. Вибрион Г а м а л е и

гораздо менее холерного склонен к зернистому nерерожде­

нию и встречается .невидоизмененным даже внутри лейкоци­

тов. Следовательно, в этом случае нечего искать пфейффе­

ровского явления.