2 курс / Гистология / Гистология,_цитология_и_эмбриология_3

Культуры обычно готовят из суспензии клеток, полученной вышеописанным ме­ тодом диссоциации ткани. Большинство клеток неспособны расти в суспензии, им необходима твердая поверхность, в качестве которой используют поверхность пла­ стиковой культуральной чашки, иногда с компонентами внеклеточного матрикса, например коллагена. Первичными культурами называют культуры, приготовленные непосредственно после первого этапа фракционирования клеток, вторичными — культуры клеток, пересаженные из первичных культур в новую среду. Можно после­ довательно перевивать клетки в течение недель и месяцев, при этом клетки сохраня­ ют характерные для них признаки дифференцировки (например, клетки эпителия образуют слои). Исходным материалом для клеточных культур обычно служат эм­ бриональные ткани и ткани новорожденных.

В качестве питательных сред используют смеси солей, аминокислот, витаминов, лошадиной сыворотки, экстракт куриных эмбрионов, эмбриональную сыворотку и др. В настоящее время разработаны специальные среды для культивирования раз­ личных типов клеток. Они содержат один или несколько белковых факторов роста, необходимых клеткам для жизнедеятельности и размножения. Например, для роста нервных клеток необходим фактор роста нервов (ФРН).

У большинства клеток в культуре наблюдается определенное число делений (50— 100), а затем они погибают. Иногда в культуре появляются мутантные клетки, кото­ рые размножаются бесконечно и образуют клеточную линию (фибробласты, эпителиоциты, миобласты и др.). Мутантные клетки отличаются от раковых клеток, также способных к непрерывному делению, но могущих расти без прикрепления к твердой поверхности. Раковые клетки в культуральных чашках образуют более плотную по­ пуляцию, чем популяции обычных клеток. Аналогичное свойство можно вызвать экспериментально у нормальных клеток путем трансформации их опухолеродными вирусами или химическими соединениями, при этом образуются неопластически трансформированные клеточные линии. Клеточные линии ^трансформированных и трансформированных клеток можно длительно сохранять при низких температурах (-70 °С). Генетическую однородность клеток усиливают клонированием, когда из одной клетки при ее последовательном делении получают большую колонию одно­ родных клеток. Клон — это популяция клеток, происходящих из одной клеткипредшественника. В последние годы клеточные культуры широко применяются для г и б р и д и з а ц и и к л е т о к .

Клеточные гибриды. При слиянии двух клеток различных типов образует­ ся гетерокарион — клетка с двумя ядрами. Для получения гетерокариона суспензию клеток обрабатывают полиэтиленгликолем или инактивирован­ ными вирусами для повреждения плазмолемм клеток, после чего клетки способны к слиянию. Например, неактивное ядро эритроцита курицы ста­ новится активным (синтез РНК, репликация ДНК) при слиянии клеток и переносе в цитоплазму другой клетки, растущей в культуре ткани. Гетерока­ рион способен к митозу, в результате чего образуется гибридная клетка. Оболочки ядер у гетерокариона разрушаются, и их хромосомы объединяют­ ся в одном большом ядре.

Клонирование гибридных клеток приводит к образованию гибридных клеточных линий, которые используются для изучения генома. Например, в гибридной клеточной линии ’’мышь—человек” установлена роль хромосомы 11 человека в синтезе инсулина.

Гибридомы. Клеточные линии гибридом используют для получения мо­ ноклональных антител. Антитела вырабатываются плазмоцитами, которые образуются из В-лимфоцитов при иммунизации. Определенный вид антител получают при иммунизации мышей конкретными антигенами. Если клони­ ровать такие иммунизированные лимфоциты, то можно получить большое количество однородных антител. Однако время жизни В-лимфоцитов в

20

https://t.me/medicina_free

культуре ограничено. Поэтому производят их слияние с "бессмертными" опухолевыми клетками (В-лимфомы). В результате образуются гибридомы (гиб/шд-клетка с геномом от двух разных клеток; ома —■окончание в назва­ ниях опухолей). Такие гибридомы способны размножаться длительно в культуре и синтезировать антитела определенного вида. Каждый клон гиб­ ридомы является источником моноклональных антител. Все молекулы ан­ тител данного вида обладают одинаковой специфичностью связывания ан­ тигенов. Можно получать моноклональные антитела против любого белка, содержащегося в клетке, и использовать их для установления локализации белков в клетке, а также для выделения белка из смеси (очистка белков), что позволяет исследовать структуру и функцию белков. Моноклональные антитела применяют также в технологии клонирования генов.

Антитела можно использовать для изучения функции различных моле­ кул, вводя их через плазмолемму непосредственно в цитоплазму клеток тон­ кой стеклянной пипеткой. Например, введение антител к миозину в цито­ плазму оплодотворенной яйцеклетки морского ежа останавливает разделе­ ние цитоплазмы.

Технология рекомбинантных ДНК. Классические генетические методы позволяют изучать функцию генов, анализируя фенотипы мутантных орга­ низмов и их потомства. Технология рекомбинантных ДНК дополняет эти методы, позволяет проводить детальный химический анализ генетического материала и получать в больших количествах клеточные белки.

Методы гибридизации широко используют в современной биологии для изучения структуры генов и их экспрессии.

Методы исследования химического состава и метаболизма клеток и тканей

Для изучения химического состава биологических структур — локализа­ ции веществ, их концентрации и динамики в процессах метаболизма при­ меняют специальные методы исследования.

Цито- и гистохимические методы. Эти методы позволяют выявлять лока­ лизацию различных химических веществ в структурах клеток, тканей и ор­ ганов — ДНК, РНК, белков, углеводов, липидов, аминокислот, минераль­ ных веществ, витаминов, активность ферментов. Эти методы основаны на специфичности реакции между химическим реактивом и субстратом, входя­ щим в состав клеточных и тканевых структур, и окрашивании продуктов химических реакций. Для повышения специфичности реакции часто приме­ няют ферментативный контроль. Например, для выявления в клетках рибо­ нуклеиновой кислоты (РНК) часто используют галлоцианин — краситель с основными свойствами, а наличие РНК подтверждают контрольной обра­ боткой рибонуклеазой, расщепляющей РНК. Галлоцианин окрашивает РНК в сине-фиолетовый цвет. Если срез предварительно обработать рибонуклеа­ зой, а затем окрасить галлоцианином, то отсутствие окрашивания подтвер­ ждает наличие в структуре рибонуклеиновой кислоты. Описание многочис­ ленных цито- и гистохимические методов дается в специальных руковод­ ствах.

В последние годы сочетание гистохимических методов с методом элек­

21

https://t.me/medicina_free

тронной микроскопии привело к развитию нового перспективного направ­ ления — э л е к т р о н н о й г и с т о х и м и и . Этот метод позволяет изучать локализацию различных химических веществ не только на клеточном, но и на субклеточном и молекулярном уровнях.

Для изучения макромолекул клеток используют очень чувствительные методы с применением радиоактивных изотопов и антител, позволяющие обнаружить даже небольшое содержание молекул (менее 1000).

Радиоактивные изотопы при распаде ядра испускают заряженные части­ цы (электроны) или излучение (например, гамма-лучи), которые можно за­ регистрировать в специальных приборах. Радиоактивные изотопы использу­ ют в методе радиоавтографии. Например, с помощью радиоизотопов 3Н-ти- мидина исследуют ДНК ядра, с помощью 3Н-уридина — РНК.

Метод радиоавтографии. Этот метод дает возможность наиболее полно изучить обмен веществ в разных структурах. В основе метода лежит исполь­ зование радиоактивных элементов (например, фосфора — 32Р, углерода — 4С, серы — 35S, водорода — 3Н) или меченных ими соединений. Радиоактив­ ные вещества в гистологических срезах обнаруживают с помощью фото­ эмульсии, которую наносят на препарат и затем проявляют. В участках пре­ парата, где фотоэмульсия соприкасается с радиоактивным веществом, про­ исходит фотореакция, в результате которой образуются засвеченные участки (треки). Этим методом можно определять, например, скорость включения меченых аминокислот в белки, образование нуклеиновых кислот, обмен йо­ да в клетках щитовидной железы и др.

Методы иммунофлюоресцентного анализа. Применение антител. Антите­ ла — защитные белки, вырабатываемые плазмоцитами (производными В- лимфоцитов) в ответ на действие чужеродных веществ (антигенов). Количе­ ство различных форм антител достигает миллиона. Каждое антитело имеет участки для "узнавания" молекул, вызвавших синтез этого антитела. В связи с высокой специфичностью антител в отношении антигенов они могут быть использованы для выявления любых белков клетки. Для выявления локали­ зации белков антитела окрашивают флюоресцирующими красителями, а за­ тем клетки изучают с помощью флюоресцентной микроскопии. Антитела можно использовать также для изучения антигенов на ультраструктурном уровне с помощью электронного микроскопа. Для этого антитела метят электронно-плотными частицами (микросферы коллоидного золота). Для усиления специфичности реакции применяют моноклональные антитела, образуемые линией клеток, — клонами, полученной методом гибридом из одной клетки. Метод гибридом позволяет получать моноклональные анти­ тела с одинаковой специфичностью и в неограниченных количествах.

Методы иммунофлюоресцентного анализа широко и эффективно ис­ пользуются в современной гистологии. Эти методы применяются для изуче­ ния процессов дифференцировки клеток, выявления в них специфических химических соединений и структур. Они основаны на реакциях антигенантитело. Каждая клетка организма имеет специфический антигенный со­ став, который главным образом определяется белками. Продукты реакции можно окрашивать и выявлять в люминесцентном микроскопе, например выявление актина и тубулина в клетке с помощью метода иммунофлюорес­ центного анализа.

Современные методы исследований позволяют проводить анализ хими­ ческого состава различных структурных компонентов клеток, как фиксиро­

22

https://t.me/medicina_free

ванных, так и живых. Изучение отдельных внутриклеточных структур стало возможным после разработки технологий фракционирования клеточного содержимого.

Фракционирование клеточного содержимого

Фракционировать (т. е. разделять и выделять) структуры и макромолеку­ лы клеток можно различными методами — ультрацентрифугированием, хроматографией, электрофорезом. Подробнее эти методы описаны в учеб­ никах биохимии.

Улътрацентрифугирование. С помощью этого метода клетки можно разде­ лить на органеллы и макромолекулы. Вначале разрушают клетки осмотиче­ ским шоком, ультразвуком или механическим воздействием. При этом мем­ браны (плазмолемма, эндоплазматический ретикулум) распадаются на фраг­ менты, из которых формируются мельчайшие пузырьки, а ядра и органеллы (митохондрии, аппарат Гольджи, лизосомы и пероксисомы) сохраняются интактными и находятся в образующей суспензии.

Для разделения вышеуказанных компонентов клетки применяют высоко­ скоростную центрифугу (80 000—150 000 оборотов/мин). Вначале оседают (седиментируют) на дне пробирки более крупные части (ядра, цитоскелет). При дальнейшем увеличении скоростей центрифугирования надосадочных фракций последовательно оседают более мелкие частицы — сначала мито­ хондрии, лизосомы и пероксисомы, затем микросомы и мельчайшие пу­ зырьки и, наконец, рибосомы и крупные макромолекулы. При центрифуги­ ровании различные фракции оседают с различной скоростью, образуя в пробирке отдельные полосы, которые можно выделить и исследовать. Фракционированные клеточные экстракты (бесклеточные системы) широко используют для изучения внутриклеточных процессов, например для изуче­ ния биосинтеза белка, расшифровки генетического кода и др.

Хроматография широко используется для фракционирования белков. Электрофорез позволяет разделить белковые молекулы с различным заря­

дом при помещении их водных растворов (или в твердом пористом матрик­ се) в электрическом поле.

Методы хроматографии и электрофореза применяют для анализа пепти­ дов, получаемых при расщеплении белковой молекулы, и получения так на­ зываемых пептидных карт белков. Подробно эти методы описаны в учебни­ ках биохимии.

Изучение химического состава живых клеток. Для изучения распределе­ ния веществ и их метаболизма в живых клетках используют методы ядерного магнитного резонанса и микроэлектродную технику.

Я д е р н ы й м а г н и т н ы й р е з о н а н с (ЯМР) позволяет изучать малые молеку­ лы низкомолекулярных веществ. Образец ткани содержит атомы в различных моле­ кулах ив различном окружении, поэтому он будет поглощать энергию на различных резонансных частотах. Диаграмма поглощения на резонансных частотах для данного образца составит его спектр ЯМ Р. В биологии сигнал ЯМР от протонов (ядер водо­ рода) широко используется для изучения белков, нуклеиновых кислот и др. Для изу­ чения макромолекул внутри живой клетки часто применяют изотопы 3Н, ПС, 35К, 31Р для получения сигнала ЯМР и слежения за его изменением в процессе жизнедея­ тельности клетки. Так, 31Р используется для изучения мышечного сокращения — из­

23

https://t.me/medicina_free

менений содержания в тканях АТФ и неорганического фосфата. Изотоп 13С позво­ ляет с помощью ЯМР исследовать многие процессы, в которых участвует глюкоза. Использование ЯМР ограничено его низкой чувствительностью: в 1 г живой ткани должно содержаться не менее 0,2 мМ исследуемого вещества. Преимуществом мето­ да является его безвредность для живых клеток.

М и к р о э л е к т р о д н а я т е х н и к а . Микроэлектроды представляют собой стек­ лянные трубочки, заполненные электропроводным раствором (обычно раствор КС1 в воде), диаметр конца которых измеряется долями микрона. Кончик такой трубоч­ ки можно вводить в цитоплазму клетки через плазмолемму и определять концентра­ цию ионов Н+, Na+, К+, СГ, Са2+, Mg2+, разность потенциалов на плазмолемме, а также производить инъекцию молекул в клетку. Для определения концентрации конкретного иона используют ионселективные электроды, которые заполняют ионо­ обменной смолой, проницаемой только для данного иона. В последние годы микроэлектродную технику применяют для изучения транспорта ионов через специальные ионные каналы (специализированные белковые каналы) в плазмолемме. При этом используют микроэлектрод с более толстым кончиком, который плотно прижимают к соответствующему участку плазмолеммы. Этот метод позволяет исследовать функ­ цию одиночной белковой молекулы. Изменение концентрации ионов внутри клетки можно определить с помощью люминесцирующих индикаторов. Например, для изу­ чения внутриклеточной концентрации Са2+ используют люминесцентный белок акварин (выделен из медузы), который излучает свет в присутствии ионов Са2+ и реа­ гирует на изменение концентрации последнего в пределах 0,5—10 мкМ. Синтезиро­ ваны также флюоресцентные индикаторы, прочно связывающиеся с Са2+. Создание различных новых типов внутриклеточных индикаторов и современных способов анализа изображений позволяет точно и быстро определять внутриклеточную кон­ центрацию многих низкомолекулярных веществ.

Количественные методы

В настоящее время наряду с качественными методами разработаны и применяются к о л и ч е с т в е н н ы е г и с т о х и м и ч е с к и е м е т о д ы оп­ ределения содержания различных веществ в клетках и тканях. Особенность количественно-гистохимических (в отличие от биохимических) методов ис­ следования заключается в возможности изучения концентрации и содержа­ ния химических компонентов в конкретных структурах клеток и тканей.

Цитоспектрофотометрия — метод количественного изучения внутрикле­ точных веществ по их абсорбционным спектрам.

Цитоспектрофлюориметрия — метод количественного изучения внутри­ клеточных веществ по спектрам их флюоресценции или по интенсивности флюоресценции на одной заранее выбранной волне (цитофлюориметрия).

Современные микроскопы — цитофлюориметры позволяют обнаружить в различных структурах малые количества вещества (до 10~14—10“16 г) и оце­ нить локализацию исследуемых веществ в микроструктурах.

Интерферометрия. Этот метод позволяет оценить сухую массу и концен­ трацию плотных веществ в живой и фиксированной клетках. С помощью этого метода, например, можно установить суммарное содержание белков в живых и фиксированных клетках.

24

https://t.me/medicina_free

XVII в.), является собственно предысторией гистологической науки, основан­ ной на макроскопической технике. В этот период фактически создавались лишь общие представления о тканях как об "однородных" частях организма, отличающихся друг от друга физическими свойствами ("твердые", "мягкие"), удельным весом ("тонущие в воде", "нетонущие") и пр. Но так как представ­ ления о тканях в то время складывались лишь на основании анатомического расчленения трупов, то все классификации тканей строились на их внешнем сходстве и различиях. Вследствие этого в одну группу попадали иногда такие различные ткани, как нервная и соединительная (нерв и сухожилие), поэтому в середине XVII в., когда английским физиком Р. Гуком был усовершенство­ ван микроскоп1 (1665), позволивший изучить тонкое строение тканей расте­ ний и животных, начинается второй период в учении о тканях. С этого време­ ни усилились разработка технических методов исследования невидимых не­ вооруженным глазом структурных единиц тканей и накопление фактического материала об их строении. В этот период "зуд познания", по выражению М. Мальпиги, и "желание постичь дела творца" (Н. Грю) побуждали многих исследователей к микроскопическим исследованиям.

Первые микроскописты второй половины XVII в. — физик Р. Гук, ана­ том М. Мальпиги, ботаник Н. Грю, оптик-любитель А. Левенгук и др. с по­ мощью микроскопа описали строение кожи, селезенки, крови, мышц, се­ менной жидкости и др. Каждое исследование по существу являлось откры­ тием, которое плохо уживалось с метафизическим взглядом на природу, складывавшимся веками. Случайный характер открытий, несовершенство

шаги вперед в познании закономерностей строения животных и растений, хотя и делались попытки обобщений (теории "волокнистого" и "зернистого" строения организмов и др.).

В конце XVIII—начале XIX в. трудами многих отечественных (петербург­ ских), а также голландских ученых и мастеров были созданы ахроматиче­ ские микроскопы, которые сделали более достоверными микроскопические наблюдения и позволили перейти к систематическому изучению структур­ ных элементов самых разнообразных животных и растительных организмов.

Применение ахроматического микроскопа в научных исследованиях по­ служило новым импульсом к развитию гистологии. В начале XIX в. сделано первое изображение ядер растительных клеток. Я. Пуркинье (в 1825— 1827 гг.) описал ядро в яйцеклетке курицы, а затем ядра в клетках различ­ ных тканей животных. Позднее им было введено понятие "протоплазма" (цитоплазма) клеток, охарактеризованы форма нервных клеток, строение желез и др. Р. Броун сделал заключение о том, что ядро является обязатель­ ной частью растительной клетки. Таким образом, постепенно стал накапли­ ваться материал о микроскопической организации животных и растений и строении "клеток" (cellula), увиденных впервые Р. Гуком.

Завершением этого периода являются исследования А. Дютроше,

П.Ф. Горянинова, Г. Валентина (ученика Я. Пуркине), Я. Генле (ученика

И.Мюллера), М. Шлейдена и особенно Т. Шванна, который обобщил все

1Создание первой модели микроскопа относится ко второму десятилетию XVII в.

27

https://t.me/medicina_free

(1838—1839). Т. Шванн рассматривал клетку как универсальный структур­ ный компонент животного и растительного мира. Это поставило на мате­ риалистическую основу биологию и патологию.

Создание клеточной теории оказало огромное прогрессивное влияние на развитие биологии и медицины. В середине XIX в. начался период бурного развития о п и с а т е л ь н о й г и с т о л о г и и . На основе клеточной теории были изучены состав различных органов и тканей, их развитие, что позво­ лило уже тогда создать в основных чертах м и к р о с к о п и ч е с к у ю а н а ­ т о м и ю и уточнить классификацию тканей с учетом их микроскопического строения (А. Келликер и др.). Но научная мысль во второй половине XIX в. не могла плодотворно развиваться без дальнейших успехов гистологической техники и методов микроскопического исследования. В этот период были введены в практику и усовершенствованы водные и масляные иммерсион­ ные объективы, изобретен микротом, применены новые фиксаторы (форма­ лин, осмиевая кислота, хромовая кислота). Весьма плодотворным оказался метод импрегнации солями серебра, разработанный итальянским ученым К. Гольджи, описавшим внутриклеточный сетчатый аппарат (аппарат Гольджи). Этот метод и его модификации позволили провести фундаментальные исследования нервной системы (Р. Кахаль) и создать о с н о в ы н е й р о г и ­ с т о л о г и и . Признанием научных заслуг К. Гольджи и Р. Кахаля явилось присуждение им в 1906 г. Нобелевской премии. В последней четверти XIX в. были открыты и другие органеллы клетки.

Благодаря успехам, достигнутым в области изучения строения клетки, в конце XIX в. были заложены основы цитологии. Но микроскопирование фиксированных клеток не позволяло говорить о процессах жизнедеятельно­ сти в них. Поэтому внимание ученых привлекли методы культивирования клеток и тканей (И. П. Скворцов, Р. Гаррисон, А. Каррель и др.).

Методы прижизненного введения красителей, примененные многими исследователями в то время, введение инородных тел в организм и другие методы сделали возможным изучение физиологии гистологических струк­ тур. В 1900 г. Н. М. Гайдуковым был предложен метод микроскопирования живых объектов в темном поле. В это же время был изобретен микромани­ пулятор, с помощью которого можно было производить операции на от­ дельных клетках (удаление ядер, разрезы клеток и др.) в целях выяснения роли и значения их в жизнедеятельности организма.

Развитие эмбриологии. Эмбриология, изучающая закономерности прена­ тального развития организмов, имеет еще более продолжительную историю своего формирования как науки. Тайна зарождения, развития и становле­ ния различных живых существ, возможности создания условий для прояв­ ления этих процессов (по крайней мере у птиц) возникали еще в древности. Так, упоминания о выведении цыплят в искусственных условиях (инкубато­ ры) в Древнем Египте, а затем в Индии, Китае имеются в трудах греческих философов. Задолго до нашей эры появились упоминание о плаценте в свя­ зи с рождением ребенка и некоторые другие сведения.

Однако первые медицинские эмбриологические наблюдения и формиро­ вание важных эмбриологических представлений, по-видимому, принадле­ жат Гиппократу (IV в. до н. э.) и его последователям ("О природе женщи­ ны", "О семимесячном плоде", "О сверхоплодотворении", "О семени", "О природе ребенка" и др.). Многие высказывания врачей того этапа развития медицины, скорее всего, представляли умозрительные заключения, которые

28

https://t.me/medicina_free

тем не менее были близки к истине. Например, утверждение "о высыхании” зародыша по мере его развития, т. е. об уменьшении содержания воды в нем, или о необходимости смешения мужского и женского семени (муж­ ские и женские половые клетки были обнаружены с помощью микроскопа соответственно лишь в XVII и XIX столетиях).

Современник Гиппократа Аристотель в своих сочинениях ”0 возникно­ вении животных” и др. по существу положил начало общей и сравнитель­ ной эмбриологии. Предложенная им классификация животных по эмбрио­ логическим признакам явилась итогом научного анализа рассматриваемых им в 5 книгах вопросов ("О происхождении семени", "О формах матки у различных животных", ”0 живорождении и ящеророждении" и др.). Следует заметить, что уже Аристотелем был поднят вопрос о механике развития и сформировано положение об э п и г е н е з е (от греч. epi — над и genesis — происхождение). Отстаивая идею развития, Аристотель основывался на не­ верных умозрительных заключениях о том, что зародыш развивается из женской крови ("материи”) и внесенного мужчиной семени ("души"), одухо­ творившего эту кровь. Подобные идеалистические рассуждения о нематери­ альном факторе (энтелехии) существовали долго и после Аристотеля в связи с сильным влиянием теологии на мировоззрение ученых, пытавшихся разо­ браться в причинности развития и конечной цели.

До середины XVII в. история эмбриологии не была ознаменована суще­ ственными достижениями, хотя известно, что некоторые конкретные опи­ сания зародышей, их временных и постоянных органов были сделаны к этому времени в разных странах.

В эпоху Возрождения определенный вклад в эмбриологию внес В. Гар­ вей — автор открытия кровообращения, который, проанализировав разви­ тие зародышей, описал их в книге ’’Зарождение животных” (1651). Он вы­ сказал ряд принципиально важных утверждений. В частности, Гарвей отри­ цал возможность самозарождения и утверждал тезис о развитии животных только из яйца ("Живое — из яйца”). Он первый высказал предположение, которое позже было подтверждено, что "пятно" на желтке яйца птиц "есть начало цыпленка", а прыгающая "кровяная точка” является зачатком сердца. Гарвей правильно в принципе трактовал значение раннего развития крови как элемента, обеспечивающего трофику зародыша. "Жизнь заключается в крови, а кровь возникает прежде, чем начинает существовать какая-либо часть тела, и она является перед всеми прочими частями плода перворож­ денной", — утверждал Гарвей. Несмотря на то что Гарвей тяготел к витализ­ му, он стремился проникнуть в причинно-следственные отношения. Он пи­ сал: "В порождении животных всякое исследование надо вести от причин, в особенности от материальной и действующей”.

Острая борьба мировоззрений разыгралась во второй половине XVII в., когда с диссертацией "Теория зарождения" (1759) выступил молодой немец­ кий ученый К. Ф. Вольф (1733—1794). Он подверг резкой критике взгляды преформистов и обосновал теорию эпигенеза. Согласно теории преформиз­ ма, развитие по существу представляло развертывание в пространстве зало­ женных при сотворении жизни готовых частей организма. Теория же эпиге­ неза, напротив, отстаивала новообразование органов, полностью отрицая предопределенность, или преформацию. К. Ф. Вольф впервые наблюдал у зародышей животных образование органов из листовидных пластинок (за­ родышевых листков), описал развитие сердца у цыпленка, развитие почки

29

https://t.me/medicina_free