6. Опишите методы определения количества эритроцитов и гемоглобина. Чем разводят кровь для подсчета эритроцитов и лейкоцитов в камере Горяева?
Эритроциты. Ход работы: в сухую, чистую пробирку наливают 4 мл 3% раствора NaCl для разведения крови. Кровь набирают в капилляр до метки (0,02 мл) и добавляют в пробирку, тщательно перемешивают, достигая разведения в 200 раз. Затем суспензией эритроцитов заполняют камеру Горяева и, поместив ее под микроскоп, производят подсчет эритроцитов в маленьких квадратах, расположенных пj диагонали. При подсчете количества эритроцитов руководствуются правилом Егорова: к данному квадрату относятся эритроциты, лежащие внутри квадрата, а также на его верхней и левой границах. Эритроциты, лежащие на правой и нижней границах в данном квадрате не подсчитываются. Количество эритроцитов (Эр) в 1 л крови рассчитывают по формуле:
где А – сумма эритроцитов в 80 маленьких квадратах,
1/4000 мм3
– объем камеры Горяева над одним маленьким квадратом,
200 – разведение крови в 3% NaCl,
80 – число маленьких квадратов, в которых подсчитывают эритроциты.
В градуированную пипетку гемометра Сали до метки "2" глазной пипеткой наливают
раствор соляной кислоты. В капиллярную пипетку от гемометра Сали
набирают кровь до метки 20 мкл и выдувают ее в раствор соляной кислоты. Полученную смесь
перемешивают стеклянной палочкой и оставляют на 10 минут. По истечении этого времени в
пробирку по каплям доливают дистиллированную воду и, перемешивая стеклянной палочкой,
Количество гемоглобина отсчитывают по нижнему мениску рабочего раствора на
градуированной пробирке (показатели в г % выражают в г/л), 1 г % равен 10 г/л.
Для подсчета лейкоцитов в камере Горяева кровь разводят в 20 раз 3% раствором уксусной кислоты.
4 мл 3% раствора NaCl для разведения крови.
7. Физиологическая роль лейкоцитов. Лейкоцитарная формула. Т- и b-лимфоциты и их значение в процессах иммунитета.
Лейкоциты, или белые (бесцветные) кровяные тельца, представляют собой бесцветные клетки, содержащие ядро и протоплазму, размером от 8 до 20 мкм.
За счет наличия ряда физиологических особенностей лейкоциты способны выполнять множество функций, основными из которых являются защитная, деструктивная, регенеративная и ферментативная.
Защитная функция связана с бактерицидным и антитоксическим действием агранулоцитов, участием в процессах свертывания крови и фибринолиза.
Деструктивное действие лейкоцитов заключается в фагоцитозе отмирающих клеток.
Регенеративная активность лейкоцитов направлена на заживление ран.
Ферментативная роль лейкоцитов связана с наличием у них ряда ферментов.
Лейкоцитарная формула – процентное соотношение различных видов лейкоцитов, определяемое при подсчёте их в окрашенном мазке крови под микроскопом. Существует такое понятие, как сдвиг формулы влево и вправо.
Ядерный сдвиг лейкоцитарной формулы влево – увеличение молодых форм и появление в периферической крови незрелых клеток (миелоциты, промиелоциты). Увеличение количества нейтрофилов с гиперсегментированными ядрами называется сдвиг вправо. Сдвиг влево отражает высокие потенциальные возможности костного мозга в отношении продукции лейкоцитов и является хорошим прогностическим признаком при заболеваниях.
В-клетки – В-лимфоциты. При первом контакте антигена с В-лимфоцитами часть их сразу превращается в клетки, образующие антитела, а часть превращается в долгоживущие изменённые клетки, которые «помнят» об антигене и при повторном контакте с этим же антигеном сразу начинают выделять антитела – иммуноглобулины (Ig) крови. Их 5 классов: IgA, IgE, IgG, IgM, IgD. В-клетки составляют систему гуморального иммунитета, который обеспечивает невосприимчивость организма к определенным вирусам и микробам (например, после вакцинации или ранее перенесенного заболевания).
Т-клетки – это Т-лимфоциты (вырабатываются в тимусе). Их делят на Ткиллеры (при взаимодействии с чужеродной клеткой уничтожают ее), Т-хелперы (усиливают синтез антител В-лимфоцитами), Т-супрессоры (угнетают образование антител), Т-амплифайеры (способспособствуют образованию В- и Т-лимфоцитов). Т-лимфоциты составляют систему клеточного иммунитета, который защищает организм от поступающих грибков, паразитов, опухолевых клеток и чужеродной ткани.