Частная бактериология

581

8.2. Боррелии

Таксономическое положение боррелий. Род Borrelia относится к типу

(филуму) Spirochaetes, классу Spirochaetia, порядку Spirochaetales, семейству

Borreliaceae. Боррелии названы в честь французского бактериолога А. Борреля

(рисунок 8.29).

Рисунок 8.29 - Амедей Боррель (Amedee Borrel, 1867-1936 гг.). Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Род Borrelia объединяет более 30 видов. Представители этого рода вызывают у человека различные заболевания: эпидемический (вшивый) возвратный тиф, аргасовые клещевые боррелиозы – АКБ (например, эндемический возвратный тиф), иксодовые клещевые боррелиозы - ИКБ (заболевания группы болезни Лайма). Эти инфекционные болезни имеют трансмиссивный механизм передачи возбудителей (переносчики - клещи и вши). Патогенными для человека являются B. burgdorferi, B. garini, B. afzelii, B. recurrentis, B. duttoni, B. persica и другие виды боррелий.

Род Borrelia подразделяется на две подгруппы:

-возбудители эпидемической и эндемической возвратных лихорадок (B. recurrentis, B. duttonii, B. hispanica, B. crocidurae, B. merionesi и др.);

-возбудители иксодовых клещевых боррелиозов - представители комплекса B. burgdorferi sensu lato (то есть в широком смысле), в который включены более 10 видов боррелий, в том числе патогенные для человека виды B. burgdorferi sensu stricto (то есть в узком смысле, непосредственно боррелия Бургдорфера), B. garinii и B. afzelii (таблица 8.1).

Таблица 8.1 – Боррелии, патогенные для человека

582

Морфологические и тинкториальные свойства боррелий. Боррелии представляют собой извитые подвижные аспорогенные бактерии длиной 2-30 мкм и шириной 0,2-0,6 мкм. По форме они напоминают спираль, имеющую от 3 до 10 крупных завитков (рисунок 8.30).

Рисунок 8.30 – Внешний вид боррелий. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

При электронной микроскопии на поверхности боррелий выявляется непостоянный мукоидный S-слой. Основным структурным элементом клетки боррелий является протоплазматический цилиндр, который представляет собой цитоплазму, окруженную цитоплазматической мембраной и пептидогликановым слоем. Вокруг протоплазматического цилиндра закручено 15-20 осевых (аксиальных) фибрилл (эндофлагелл, жгутиков), объединенных в периплазматическую нить и являющихся двигательным аппаратом клетки. Для боррелий характерно сгибательно-поступательное и вращательно-поступательное движение. Протоплазматический цилиндр и осевые фибриллы покрыты внешней мембраной (оболочкой). На рисунке 8.31 представлена схема строения клетки боррелий.

поперечный разрез; 1 – протоплазматический цилиндр, 2 – наружная (внешняя) мембрана, 3 – аксиальные фибриллы, 4 – место прикрепления аксиальных фибрилл, 5 – пептидогликановый слой клеточной стенки, 6 – цитоплазматическая мембрана. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

583

Один конец каждой фибриллы закреплен с помощью крюка (блефаропласта) в цитоплазматической мембране вблизи полюса протоплазматического цилиндра, а другой конец остается свободным. Пространство между цитоплазматической мембраной и внешней оболочкой, в котором располагаются фибриллы, называется периплазматическим пространством или эндофлагеллярным комплексом.

В цитоплазме протоплазматического цилиндра располагается нуклеоид боррелий, который включает линейную хромосому небольших размеров и несколько циркулярных и линейных плазмид (микрохромосомы). Отдельные изоляты одного и того же вида боррелий отличаются друг от друга как по количеству, так и по размерам плазмид. Плазмиды обнаруживаются преимущественно при первичном выделении штаммов. При последующих пересевах количество плазмид уменьшается. Плазмиды детерминируют факторы патогенности боррелий. Уменьшение числа плазмид или их полная утрата приводит к снижению патогенности возбудителя и изменению антигенного профиля.

Боррелии хорошо воспринимают анилиновые красители, по Граму окрашиваются отрицательно, по Романовскому-Гимзе - в сине-фиолетовый цвет (рисунок 8.32).

Рисунок 8.32 – Микроскопическая картина боррелий, окраска по РомановскомуГимзе. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Культуральные свойства. Боррелии очень требовательны к условиям выращивания и культивируются только на сложных питательных средах, содержащих сыворотку крови, асцитическую жидкость, тканевые экстракты, аминокислоты, витамины и другие факторы роста. Боррелии – микроаэрофилы. Оптимальными условиями культивирования является температура 28-35°С и атмосфера углекислого газа (5-10%). Боррелии возможно культивировать в желточных мешках куриных эмбрионов. Высокие требования к условиям культивирования объясняются недостатков у боррелий генов, кодирующих ферменты цикла трикарбоновых кислот, синтез аминокислот, кофакторов и других соединений.

Устойчивость к факторам внешней среды. Боррелии чувствительны к высыханию и нагреванию. Во внешней среде неустойчивы. При температуре 4548°С погибают в течение 30 минут. Устойчивы к низким температурам (минус 7090ОС) и замораживанию.

585

Морфологические, тинкториальные, культуральные и биохимические свойства. Возбудителем эпидемического возвратного тифа является В. recurrentis, имеющая извитое спиралевидное тело длиной 20-40 мкм. Клетки возбудителя образуют 3-12 крупных неравномерных завитков. Концы клеток заострены. Бактерии подвижные за счет наличия 7-30 периплазматических жгутиков на каждом конце. Спор и капсул не образуют. Грамотрицательные, по Романовскому-Гимзе окрашиваются в сине-фиолетовый цвет (рисунок 8.35).

Рисунок 8.35 - В. recurrentis, окраска по Романовскому-Гимзе. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Культивируют возбудителя эпидемического возвратного тифа в анаэробных условиях на питательных средах с добавлением асцитической жидкости или сыворотки крови (среды Клиглера-Робертсона, Аристовского-Гельцера, Келли и др.) залитых тонким слоем вазелинового масла. Рост проявляется на 4-7 день. Но при культивировании на питательных средах боррелии утрачивают патогенность.

В. recurrentis утилизирует глюкозу с образованием газа.

Антигенная структура. Поверхностные белковые антигены являются общими для всех боррелий. Они чрезвычайно вариабельны в результате внутригеномных рекомбинаций. Имеются также вариантоспецифические антигены. Для В. recurrentis характерна высокая антигенная изменчивость: каждое новое поколение боррелий отличается структурой поверхностных антигенов, что обусловливает волнообразное течение заболевания.

Факторами патогенности В. recurrentis являются эндотоксин, белки наружной мембраны, адгезины и высокая подвижность возбудителя.

Резистентность. Во внешней среде В. recurrentis малоустойчива, чувствительна к нагреванию (при 500С остаются жизнеспособными в течение 20-30 минут), УФО, антибиотикам (пенициллинового ряда, тетрациклину, левомицетину).

Эпидемиология. Источником инфекции при эпидемическом возвратном тифе служит больной человек в стадии лихорадки, в периферической крови которого находятся боррелии. Эпидемический возвратный тиф относится к группе

антропонозных инфекций. Переносчиками являются вши рода Pediculus

(платяная, головная и лобковая), которые становятся наиболее заразными с 6 по 28 день после кровососания (рисунок 8.36).

586

а б Рисунок 8.36 – Головная (а) и платяная (б) вши. Заимствовано из Интернет-

ресурсов.

При кровососании заражаются все виды вшей, паразитирующих на человеке, однако роль лобковых вшей в передаче возвратного тифа ничтожна. Основная роль в передаче этой инфекции принадлежит головным и особенно платяным вшам

(рисунок 8.37).

а б Рисунок 8.37 – Головная вошь (а) и ее ротовой аппарат (б). Заимствовано из

Интернет-ресурсов.

При кровососании возбудитель проникает в желудок вши. Через 6-24 часа боррелии исчезают из просвета кишечника вшей. Большая часть их разрушается, а отдельные боррелии попадают в полость тела вшей (в гемолимфу), где они активно размножаются. С 5 дня после кровососания вошь становится заразной. К 6-7 дню с момента сосания крови спирохеты распространяются по всему телу вши, свободными остаются кишечник и слюнные железы. Боррелии сохраняются в гемолимфе вши в течение 19-25 дней. С гибелью вши отмирают и боррелии.

С испражнениями вшей боррелии во внешнюю среду не выделяются. Трансовариально (через яйца вшей) передача боррелий не происходит.

Человек заражается эпидемическим возвратным тифом при втирании гемолимфы раздавленных вшей в кожу при расчесывании места укуса или трении одежды (контаминативное заражение). Сам по себе укус инфицированной вши не опасен. Заболевание отмечается при скученности населения, в антисанитарных условиях, что встречается во время социальных бедствий, войн. На территории РФ в настоящее время эпидемический возвратный тиф не регистрируется. Случаи болезни сохраняются в некоторых странах Азии, Африки, Южной Америки.

Патогенез. После втирания человеком гемолимфы раздавленной вши в ранку (место укуса) боррелии поглощаются фагоцитами, внутри которых они размножаются. Эта фаза соответствует инкубационному периоду болезни. К окончанию инкубационного периода микробные клетки в большом количестве поступают в кровь (спирохетемия). В крови во время лихорадки содержится

588

Во время лихорадочного периода наблюдаются покраснение лица, инъекция склер. К концу приступа отмечается желтушность кожных покровов. В течение болезни отмечается несколько лихорадочных приступов. Каждый последующий приступ короче предыдущего, а период апирексии, наоборот, продолжительнее. В безлихорадочном периоде болевые симптомы снижаются. Летальность при эпидемическом возвратном тифе составляет не более 1%.

Иммунитет к эпидемическому возвратному тифу гуморальный, непродолжительный.

Диагностика заболевания основывается на эпидемиологическом анализе, клинической картине и данных лабораторных исследований. Основным методом лабораторной диагностики является бактериоскопический метод – исследование на наличие возбудителя крови, взятой на высоте лихорадки. Приготовленный мазок окрашивают по Романовскому-Гимзе. Для обнаружения боррелий используют также микроскопию висячей капли крови в темном поле, микроскопию препаратов крови, окрашенных по методу Бурри (тушью) или серебрением по Морозову. При микроскопии висячей капли в темном поле и при окраске тушью по Бурри возбудитель обнаруживается в виде серебристых извитых нитей.

В качестве вспомогательных методов используют серологические реакции – реакцию непрямой иммунофлюоресценции (РНИФ), иммуноферментный анализ (ИФА), а также полимеразную цепную реакцию (ПЦР).

Биопробу проводят для дифференциальной диагностики возбудителей эпидемического (вшивого) возвратного тифа и эндемического (клещевого) возвратного тифа: боррелии клещевого возвратного тифа вызывают заболевание у морских свинок, а возбудитель вшивого возвратного тифа вызывает заболевание у белых мышей и крыс.

Лечение и профилактика. Больные подлежат госпитализации с обязательной санитарной обработкой и дезинсекцией одежды. В качестве основных лечебных препаратов используют антибиотики тетрациклинового ряда, эритромицин, левомицетин, пенициллин, ампициллин, цефалоспорин.

Специфическая профилактика при эпидемическом возвратном тифе не проводится. Неспецифическая профилактика заключается в своевременном проведении противоэпидемических мероприятий (борьба с переносчиками, госпитализация больных, дезинфекционная обработка вещей больных, наблюдение за контактировавшими лицами).

Эндемический возвратный тиф

Эндемический возвратный тиф (клещевой возвратный тиф, аргасовый клещевой боррелиоз) – острое зоонозное природно-очаговое заболевание, протекающее в виде приступов лихорадки, чередующихся с периодами нормализации температуры. Заболевание встречается в отдельных субтропических и тропических зонах.

Историческая справка. В 1857 г. шотландский доктор Д. Ливингстон (рисунок 8.39) в Южной Африке описал лихорадочные заболевания людей, возникающие после укуса клещей.

589

Рисунок 8.39 - Давид Ливингстон (David Livingstone, 1813 – 1873 гг.). Заимствовано из Интернет-ресурсов.

В 1912 г. в мазках крови больных солдат русской армии в Иране Евгений Петрович Джунковский (1867 – 1953 гг.) обнаружил новый вид возбудителя и описал его под названием Spirochaeta persica. С 1927 г. под руководством Е.Н. Павловского (рисунок 8.40) проводились широкие исследования по изучению этиологии и эпидемиологии эндемического возвратного тифа.

Рисунок 8.40 – Евгений Никанорович Павловский (1884-1965 гг.). Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Возбудителями эндемического возвратного тифа являются более 20 видов боррелий, среди которых наиболее часто вызывают заболевание В. duttoni (африканский вид боррелий) и В. persica (азиатский вид боррелий).

Возбудители эндемического возвратного тифа имеют штопорообразный вид с 12 и более завитками (рисунок 8.41).

590

Рисунок 8.41 - В. duttoni, темнопольная микроскопия. Заимствовано из Интернетресурсов.

Культивирование возбудителей возможно в организме клещей, морских свинок, кроликов, белых мышей и на искусственных питательных средах (среды Аристовского-Гельтцера, Клиглера-Робертсона, Келли и др.).

Эпидемиология. Резервуаром возбудителя в природе (бессимптомными носителями) являются грызуны, а также аргасовые клещи. У клещей отмечается трансфазовая и трансовариальная передача возбудителя на протяжении 5-6 поколений. Человеку боррелии передаются во время укуса со слюной инфицированных клещей семейства Argasidae. Аргасовые клещи насасываются кровью в течение 3-30 минут. Основными переносчиками являются Ornithodorus papillares - поселковый клещ и Argas persicus - персидский клещ (рисунок 8.42).

а б

Рисунок 8.42 - Клещи Ornithodorus papillares (а) и Argas persicus (б). Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Эти клещи распространены в зонах жаркого климата: в пустынях, предгорных районах и горах, где они обитают в норах диких животных, гнездах птиц, пещерах, под камнями. В природных очагах происходит циркуляция боррелий между клещами и дикими млекопитающими, птицами и рептилиями. В антропургических очагах в цепь циркуляции возбудителя включаются человек и домашние животные. При отсутствии прокормителей клещи способны длительное время голодать, при этом в их организме боррелии сохраняются в течение всего времени голодания.

Эндемический возвратный тиф встречается в основном в летний период года у приезжих лиц, так как местное население переносит заболевание в раннем возрасте, приобретая устойчивость к последующему заражению. Чаще заболевают геологи, туристы, охотники. Очаги инфекции известны в Казахстане, Киргизии, на