Микра ответы на 1 рубеж

В зависимости от источника углерода бактерии бывают:

- автотрофы – используют углерод в виде СО2

- гетеротрофы – используют готовый органический углерод, источниками которого являются гексозы, многоатомные спирты, аминокислоты

В зависимости от источника энергии:

-фототрофы – источник энергии – свет

-хемотрофы – источник энергии – ОВР, среди них выделяют:

•Литотрофы, способные использовать неорганические доноры электронов (Н2, NH3, H2S, Fe2+)

•Органотрофы, которые используют в качестве донора электронов органические соединения

Среди гетеро-хемо-органотрофов выделяют:

-сапрофиты, питающиеся мертвым органическим материалом и независимые от других организмов

-паразитыгетеротрофы, получаемые питательные в-ва от макроорганизма, бывают:

•Облигатные паразиты, полностью лишенные возможности вне клеток, размножаются только внутри клеток организма-хозяина

•Факультативные, которые могут жить и размножаться без хозяина

Питательные субстраты поступают внутрь бактериальной клетки через её пов-ть, обеспечивая высокую скорость процессов метаболизма и адаптацию к меняющимся условиям внешней среды.

19. ферменты бактерий (сахаролитические, протеолитические). Ферменты агрессии. Определение биохимических свойств бактерий. Пигменты бактерий.

Ферменты – это специфические белки, которые катализируют биохимические реакции

Гидролазы – ферменты, катализирующие реакции расщепления белков, жиров и углеводов. К этому классу относятся протеазы- ферменты, разрушающие белки, и гликозидазы – ферменты, расщепляющие углеводы.

Способность бактерий расщеплять углеводы – сахаролитическая активность Способность бактерий расщеплять белки – протеолитическая активность

Ферменты агрессии – это ферменты, которые защищают бактерии от агрессивных факторов внешней среды, способствующие облегчению адгезии и проникновению бактерии в ткани

Биохимические свойства – это способность микроорганизмов под действием своих ферментов расщеплять органические соединения. Различают сахаролитическое, протеолитическое, а также гемолитическое свойства.

Сахаролитические и протеолитические св-ва см. выше

Определение гемолитической активности:

Пигменты бактерий – это красящие в-ва, которые образуют бактерии в процессе метаболизма

Значение пигментов:

-защита от солнечного света, УФ

-участие в обмене в-в

-повышает устойчивость к хим. В-вам

Условия образования пигментов:

-солнечный

-наличие О2

20. Культивирование бактерий. Условия культивирования. Культуральные свойства Классификация бактерий по условиям культивирования (время, отношение к кислороду, температура).

Культивирование – это выращивание микроорганизмов на специальных питательных средах

Условия культивирования:

1)Оптимальная питательная среда

2)Атмосфера культивирования (с доступом или без доступа к кислороду)

3)Температура культивирования

4)Время культивирования

5)Стерильные условия

6)Оптимальная реакция среды (рН)

7)Необходимость добавления доп. Питательных в-в ауксотрофам

8)Освещение

9)Влажность

Питательная среда – это субстрат, применяемый для культивирования микроорганизмов

Классификация питательных сред:

1)По происхождению:

•Естественные – натуральные продукты (сыворотка крови, яйца, животные ткани, желчь)

•Искусственные – среды, приготовленные из специально подготовленных природных компонентов (пептона, аминопептида, дрожжевого экстракта)

•Синтетические – среды известного состава, приготовленные из химически чистых органических и неорганических в-в (солей, аминокислот, углеводов) в определённых пропорциях

2)По консистенции:

•Жидкие – пептонная вода (ПВ), мясопептонный бульон (МПБ)

•Полужидкие – полужидкий мясопептонный агар (МПА)

•Плотные – МПА, мясопептонный желатин, агар-агар ! к полужидким добавляют 0,3-0,7% агара, к плотным- 1,5-2% агара!

3)По составу:

•Простые – МПА, МПБ

•Сложные – простые с добавлением дополнительного компонента (кровяного, шоколадного агара): сахарный бульон, желчный бульон, желточно-солевой агар, среда Китта-Тароцци

4)По назначению:

•Основные – используют для культивирования большинства м/о (ПВ, МПБ, МПА)

•Специальные (среды насыщения) – используют для м/о, не растущих на простых средах, т.е. добавляют определённые компоненты (сахарный МПА, кровяной МПА)

•Элективные (избирательные) – используют для определенных видов, при этом создают условия, чтобы другие не исследуемые м/о не смогли расти на этой среде (щелочная ПВ для холерного вибриона, желточно-солевой агар для стафилококка (впервые использовал Кох))

•Дифференциально-диагностические – используют для изучения биохимических св-в бактерий и их дифференцировки (см. вопрос 22)

22. Дифференциально-диагностические питательные среды. Среды Гисса, Ресселя, Эндо, Левина, Плоскирева - характеристика сред

Дифференциально-диагностические – используют для изучения биохимических св-в бактерий и их дифференцировки

Среда

Ресселя

Среда Эндо

Используют для дифференцировки E. Coli, т. к. в среде есть лактоза, она её расщепляет и окрашивается в малиновый цвет с металлическим отблеском А, например, сальмонеллы будут прозрачные, т.к. не расщепляют лактозу

Среда Левина

Используется для дифференцировки энтеробактерий

Среда

Плоскирева

Используется для дифференцировки шигелл, сальмонелл

23. Бактериологический метод диагностики инфекционных заболеваний. Достоинства и недостатки бактериологического метола исследования. Этапы выделения чистой культуры

Бактериологический метод диагностики – это выделение и идентификация возбудителя из слизи, носоглотки, ликвора по их росту на питательных средах, биохимическим св-вам

Преимущества бактериологического метода:

- высокая специфичность (т.е. перекрестных ложных реакций не наблюдается)

-возможность исследования любой биологической жидкости человека

-лечебная цель, т.е. определение чувствительности м/о к антибиотику и курсу лечения

-быстрота и точность выявления

-относительная дешевизна

Недостатки бактериологического метода:

-длительность получения результатов (не менее 7 суток)

-иногда использование дорогостоящих питательных сред и компонентов

-преимущественное определение просветной и транзиторной флоры

-неоднородность выделения м/о из разных отделов, например, кишечника

-выявляет не весь спектр возможных возбудителей

Этапы выделения чистой культуры:

24. Фазы развития бактериальной популяции при периодическом культивировании. Особенности культивирования анаэробных бактерий.

Периодическое культивирование – это культивирование, при котором не происходит добавления питательных в-в и удаления конечных продуктов обмена из среды

Периодическая культура – это популяция м/о в ограниченном жизненном пространстве при периодическом культивировании

Если построить график, оп осям которого отложить:

-по оси Х – время

-по оси Y – число клеток м/о

То получим кривую роста м/о в жидкой питательной среде

Фазы развития:

1)Лаг-фаза (от англ. lag — отставать) — начальная фаза, которая охватывает промежуток времени между посевом бактерий и началом размножения. Ее продолжительность составляет в среднем 2–5 ч и зависит от состава питательной среды и возраста засеваемой культуры. Во время лаг-фазы бактерии адаптируются к новым условиям культивирования, идет синтез индуцибельных ферментов.

2)Экспоненциальная (логарифмическая) фаза характеризуется постоянной максимальной скоростью деления клеток, которая зависит от вида бактерий и питательной среды. Период удвоения клеток называется, которое варьирует от вида бактериальной культуры - от 10 мин до 24 ч. Величина клеток и содержание белка в них во время экспоненциальной фазы остаются постоянными. Бактериальная культура в этой фазе состоит из стандартных клеток.

3)Стационарная фаза наступает тогда, когда число клеток перестает увеличиваться. Так как скорость роста зависит от концентрации питательных веществ, то при уменьшении содержания последних в питательной среде уменьшается и скорость роста. Снижение происходит также из-за большой плотности бактериальных клеток, снижения парциального давления кислорода, накопления токсических продуктов обмена. Продолжительность стационарной фазы составляет несколько часов и зависит от вида бактерий и особенностей их культивирования.

4)Фаза отмирания наступает вследствие накопления кислых продуктов обмена или в результате автолиза под влиянием собственных ферментов. Продолжительность этой фазы колеблется от десятка часов до нескольких недель.

Особенности культивирования анаэробных бактерий:

- использование анаэростатов – аппаратов, в которых откачивается атмосферный воздух и вкачивается инертный газ, специальная дыхательная смесь, бытовой газ

-использование и добавление в среду химических поглотителей кислорода (щелочной раствор пирогаллола, дитионит натрия Na2S2O4)

-использование специальных газовых пакетов, наполненных газом

-метод Фортнерасовместное выращивание аэробов и анаэробов

-метод Вильяла-Вейона- расплавленный и остуженный агар с засеянным материалом набирают в стеклянные трубки с запаянными концами и выращивают в термостате

-посев на среду Китто-Тароцци – в глюкозный бульон с добавлением кусочков мяса (печени, которая будет поглощать О2) засеивают культуру, сверху заливая стерильным вазелиновым маслом (преграда для О2)