2) Определение групп крови стандартными сыворотками.
Нанести обозначения двух серий стандартных сывороток I, II и III групп крови в объёме 0,1 мл, образующие два ряда по три капли слева направо: 0 (I), А (II), В (III). Забрать кровь из вены. Шесть капель исследуемой крови пациента перенести стеклянной палочкой на пластину в шесть точек рядом с каплей стандартной сыворотки и перемешать. Агглютинация начнется через 30 сек. В те капли, где произошла агглютинация, добавить по одной капле NaCl 0,9% и оценить результат.
Расшифровка результатов:
Если сыворотки всех трёх групп дали положительную реакцию, это указывает на то, что испытуемая кровь содержит оба агглютиногена (А и В) и принадлежит к группе AB (IV). Однако в таких случаях для исключения неспецифической реакции агглютинации необходимо провести дополнительное контрольное исследование испытуемой крови со стандартной изогемагглютинирующей сывороткой группы AB (IV), не содержащей агглютининов. Лишь отсутствие агглютинации в этой капле при наличии агглютинации в каплях, содержащих стандартные сыворотки групп 0 (I), А (II) и В (III), позволяет считать реакцию специфической и отнести исследуемую кровь к группе АВ (IV).
3) Определение группы крови перекрёстным способом.
Кровь для исследования берут из вены в пробирку, центрифугируют или оставляют на 30 мин для получения сыворотки. На тарелку наносят три больших капли (0,1 мл) сыворотки крови из пробирки, а рядом с ними по одной маленькой капле (0,01 мл) стандартных эритроцитов групп. Соответствующие капли смешивают стеклянными палочками, планшет покачивают, наблюдают в течение 5 мин, в капли с агглютинацией добавляют NaCl 0,9% и оценивают результат.
Расшифровка результатов:
Особенность результатов реакции со стандартными эритроцитами — эритроциты группы 0 (I) считают контрольными. Результат перекрёстного способа считают достоверным, если при реакции со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и со стандартными эритроцитами ответы о группе исследуемой крови совпадают. Если этого не происходит, обе реакции следует переделать.
На сегодняшний день для определения систем групп крови используют стандартизированные наборы моноспецифических сывороток, которые позволят определять и классифицировать животных в единой системе, исключающей ошибки и их последствия.
По схеме кровь от животного-донора, имеющего антигены Аc, Вa, и Са вводят реципиенту с антигеном Ас, но не имеющему антигенов Вa и Сa. Антитела против Аc, не образуются, так как у реципиента есть этот фактор. В сырой сыворотке абсорбируют ненужные антитела, в данном случае анти-Ca, эритроцитами третьего животного, имеющего антиген Сa. Затем из сыворотки путем центрифугирования удаляют эритроциты с абсорбированными на них антителами Сa. Полученную моноспецифическую сыворотку можно использовать для выявления антигена Вa, в эритроцитах других животных.
Пример получения моноспецифической сыворотки:
46. Первичные и вторичные половые признаки.
Пол– важнейшая фенотипическая характеристика, представляющая собой совокупность признаков и свойств организма, обеспечивающих половое размножение.
В кариотипе мужчин и женщин 22 пары идентичных хромосом – аутосомные, 23я пара – половые. У женщины XX, у мужчин XY. Женский пол – гомогаметный, мужской – гетерогаметный (согласно генетической теории Моргана).
Первичные половые признаки – признаки, которые обеспечивают непосредственно процесс образования половых клеток, оплодотворения и развития потомства. Формирование обусловлено генами, расположенными в половых хромосомах.
К числу их относятся, например, гонады, половые пути и наружные гениталии у высших животных, андроцей и гинецей у высших растений.
Вторичные половые признаки – признаки, которые не принимают непосредственного участия в воспроизводстве потомства, но связанны с ним и косвенным образом влияют на него. Сюда относятся фенотипические различия между мужчинами и женщинами. Например, наличие/отсутствие молочных желез, рост, масса тела, тип телосложения, тип оволосения, тембр голоса.