19. Санитарно-бактериологическое исследование воды

Для отбора проб воды используют специальную одноразовую посуду или емкости многократного применения, изготовленные из нетоксичных материалов. Емкости должны быть оснащены плотно закрывающимися (силиконовыми, рези- 89 новыми) пробками и защитным колпачком (из алюминиевой фольги, плотной бумаги). Многоразовая посуда должна выдерживать стерилизацию сухим жаром или автоклавированием. Пробу отбирают в стерильные емкости с соблюдением правил асептики. Емкость открывают непосредственно перед отбором. Во время отбора пробка и края емкости не должны чего-либо касаться. Ополаскивать посуду запрещается. С поверхности водоема или из крана водопровода пробу берут в стерильные флаконы с притертой пробкой емкостью 0,5 л, а с глубины - привязанным к шесту батометром или стеклянным сосудом с притертой пробкой, к которой прикреплен шнур. Водопроводную воду наливают после предварительного обжигания крана и стекания первых порций воды из него в течение 10-15 мин. Вода из колодца должна быть взята до начала пользования им или через 10-12 ч после прекращения пользования. После наполнения емкость закрывают стерильной пробкой. Отобранную пробу маркируют и сопровождают актом отбора проб воды с указанием названия пробы, места забора, даты, цели исследования, куда направляется проба для исследования, подпись лица, взявшего пробу. К исследованию проб в лаборатории необходимо приступить как можно быстрее (через 2 часа после забора). Доставка проб осуществляется в контейнераххолодильниках при температуре 4-10 °С. В холодный период года необходимо предохранить пробы от промерзания и срок исследования увеличивается до 6 часов с момента забора. Лабораторная посуда должна быть тщательно вымыта, ополоснута дистиллированной водой и высушена. Пробирки, колбы, бутылки, флаконы должны быть заткнуты силиконовыми или ватно-марлевыми пробками и упакованы так, чтобы исключить загрязнение после стерилизации в процессе работы и хранения. Новые резиновые пробки кипятят в 2 % растворе соды 30 минут и 5 раз промывают водопроводной водой (кипячение и промывание повторяют дважды). Затем пробки 30 минут кипятят в дистиллированной воде, высушивают, заворачивают в бумагу или фольгу и стерилизуют в паровом стерилизаторе. Резиновые пробки, использован- 90 ные ранее, обеззараживают, кипятят 30 минут в водопроводной воде с нейтральным моющим средством, промывают в водопроводной воде, высушивают, монтируют и стерилизуют. Пипетки со вставленными тампонами из ваты, чашки Петри должны быть уложены в металлические пеналы или завернуты в бумагу. Подготовленную посуду стерилизуют в сушильном шкафу или автоклаве. После выполнения анализа всю посуду обеззараживают в автоклаве при 130 °С 1 час. Пипетки кипятят в 2 % растворе соды. После ополаскивают дистиллированной водой. Питьевая вода не должна иметь постороннего вкуса, запаха, несвойственной ей окраски, содержать ядовитые вещества и патогенные микроорганизмы. Обнаружить патогенные микроорганизмы в воде ввиду их малой концентрации трудно. О безопасности воды в эпидемиологическом отношении судят по результатам ее санитарно-бактериологического исследования, которое включает определение двух микробиологических показателей: общего микробного числа и количества БГКП (определение коли-титра и коли-индекса).

Определение микробного числа. Это общее количество микробов, выросших на МПА при 37 °С за 24-48 часов. Пробу воды из артезианских колодцев центрифугируют (для концентрирования бактерий); из открытых водоемов - делают 5 – 7 последовательных разведений 1:10. Из каждой пробирки берут по 1 мл и вносят в стерильную чашку Петри, заливают расплавленным МПА (45-50 °С). Осторожным вращением чашки равномерно перемешивают смесь и ставят в термостат (37 °С) на 24-48 ч. Подсчитывают колонии через лупу. Общее количество бактерий в 1 мл водопроводной воды не должно превышать 100, а открытых водоемов - не более 1000. Определение титра кишечной палочки (коли-титра) воды. Это наименьшее количество воды, в котором при посеве обнаруживают хотя бы одну кишечную палочку. Для определения коли-титра используют бродильную пробу и метод мембранных фильтров. При бродильном методе пробу исследуемой воды в определенных разведениях высевают на среду накопления, затем при наличии роста, 91 характерного для кишечной палочки, пересевают на дифференциальнодиагностические среды и выявляют кишечную палочку. Если коли-титр выше установленных норм, исследование повторяют. Для установления фекального загрязнения, посевы культивируют при 43 °С для исключения кишечной палочки холоднокровных, не растущей при этой температуре.

Метод мембранных фильтров. Мембранные фильтры № 2 или № 3, изготовленные из нитроклетчатки или нитрохлорвинила, хорошо промывают горячей водой. Исследуемую воду под давлением пропускают через фильтр не менее 333 мл для водопроводной, воды из открытых водоемов 0,1; 1,0 и 10 мл. Затем фильтры с соблюдением правил асептики переносят на плотную среду Эндо и помещают в термостат при 37 °С. Через 18-24 ч подсчитывают колонии кишечной палочки, их количество множают на 1000, полученный результат делят на объем профильтрованной воды, то есть определяют число кишечных палочек в 1 л воды - колииндекс. Микробиологические показатели для питьевой (водопроводной воды) нормированы ГОСТ 2874-73. Микробное число должно быть не более 100, коли-титр - не менее 300, коли-индекс – не более 3. Количество патогенов в чистой водопроводной воде не допускается. Вода артезианских скважин, распределяемая по водопроводам без очистки и дезинфекции, должна соответствовать следующим нормам: микробное число не более 100, коли-титр не менее 500, коли-индекс не более 2. Вода открытых водоемов считается доброкачественной, если микробное число не более 1000, коли-титр не менее 111, коли-индекс не более 9. В системе санитарно-микробиологического контроля качества питьевой воды различают текущий контроль, экстренный и контроль по эпидпоказаниям. Текущий контроль питьевой воды по микробиологическим и паразитологическим показателям осуществляется в рамках государственного и ведомственного санитарно-эпидемиологического надзора за качеством питьевой воды в соответствии с разработанными региональными программами на соответствующих территориях. 92 Экстренный санитарно-микробиологический контроль питьевой воды осуществляется ведомственными и производственными лабораториями в случае какихлибо внезапных нарушений или аварий в системе водоснабжения, в результате которых происходит микробное загрязнение водопроводной воды в распределительной сети. Контроль воды по эпидпоказаниям производят лаборатории учреждений СЭН и ведомственных служб в случае возникновения подъема заболеваемости населения кишечными бактериальными и вирусными инфекциями, уровень которой превышает среднесезонные показатели, а также при вспышке или эпидемии водного происхождения. Экстренный контроль питьевой воды, а также контроль по эпидпоказаниям предполагают более частые микробиологические исследования, чем установлено по программе. Анализ результатов санитарно-микробиологического контроля проводится регулярно, а также по представлении месячных, квартальных, годовых отчетов организациями, ответственными за подготовку питьевой воды. При анализе вод источника и по этапам очистки исследуемый объем воды выбирают исходя из предполагаемого загрязнения для получения изолированных колоний и, соответственно, количественного результата. При обнаружении искомых бактерий их число пересчитывают на объем воды и выражают в числе колониеобразующих единиц (КОЕ) бактерий или бляшкообразующих единиц (БОЕ) колифагов. При наличии показаний к исследованию питьевой воды на патогенные бактерии или вирусы поиск возбудителя определяется эпидемической ситуацией и его циркуляцией в объектах окружающей среды данного региона.