19. Правила заражения лабораторных животных

Методы исследования, связанные с заражением животных, называются биологическими или биопробой. Используемые для этих целей животные называются лабораторными или экспериментальными. Наиболее широко в микробиологических лабораториях используют кроликов, морских свинок, белых мышей, крыс, голубей, цыплят. Экспериментальное заражение лабораторных животных проводится с целью определения патогенности, вирулентности и токсичности микробов; выделения чистой культуры из патматериала, а также для определения активности и безвредности приготовленных вакцин.

Способы заражения лабораторных животных

В зависимости от цели исследования и предполагаемого возбудителя выбирают восприимчивое лабораторное животное и подбирают способ его заражения. Перед заражением животных метят: кроликов и морских свинок - металлическими ушными номерами; мышей и крыс – растворами фуксина, метиленового синего и т.д. Для удобства и безопасности работы животных фиксируют. Взвесь микробной культуры или суспензию из зараженных органов осторожно набирают в шприц, после чего конец иглы осторожно закрывают ватой, смоченным 70 °С этиловым спиртом. Повернув шприц иглой вверх, медленно и аккуратно выпускают из него пузырьки воздуха. Загрязненную вату помещают в банку с дезраствором.

Внутрикожный способ применяется редко. Материал вводят тонкой иглой непосредственно в кожу в область спины или живота в дозе 0,1-0,2 мл. Чаще всего метод используют для обнаружения некротоксина (у стафилококков, листерий и др.). Метод заражения представлении на рисунке 63.

Подкожный способ заражения применяется при многих болезнях. Кожу животного захватывают пальцами и образующуюся складку прокалывают иглой, материал вводят медленно (рисунок 64). Затем отпускают складку, на иглу накладывают вату, смоченную 70 ° этиловым спиртом, и быстро извлекают иглу. Наиболее часто подкожно заражают в область спины, крестца или живота. Доза – в зависимости от вида микроба.

Внутримышечный способ применяется довольно часто, например, при исследовании анаэробов. Материал вводят в толщу мускулатуры в области бедра, а птицам – в грудную мышцу.

Внутрибрюшинный способ применяется очень часто. Животное фиксируют головой вниз, чтобы внутренние органы сместились к диафрагме. Материал вводят в заднюю часть живота, с боку от средней линии. Сначала оттягивают кожу живота и прокалывают ее под острым углом, толчком прокалывают брюшную стенку, при этом ощущается как бы провал иглы в полость живота (рисунок 65).

Внутривенное заражение чаще всего проводят для выявления токсинов у микробов (при ботулизме, при энтеротоксемии и др.). Кроликам материал вводят в краевую вену уха. Рукой сдавливают вену ближе к основанию уха, вследствие чего вена лучше наполняется. Тонкой иглой прокалывают кожу и вену, иглу вводят по направлению к корню уха. Затем убирают пальцы, сдавливающие вену, и медленно инъецируют материал (рисунок 66). По окончании инъекции иглу прижимают ватой, пропитанной 70 ° этиловым спиртом, и прижимают ватой. Мышам и крысам материал вводят в боковую вену хвоста, курам и голубям в подкрыльцовую вену.

Интраназальное заражение осуществляют капельным способом, используя глазную пипетку. Предварительно животное слегка наркотизируют, прикладывая к носу вату, смоченную эфиром. При оральном заражении исследуемый материал добавляют в корм, воду или вводят через небольшой зонд.

Интрацеребральное заражение, заражение в переднюю камеру глаза, метод скарификации и другие методы используют очень редко. Место инъекции обрабатывают 70 ° этиловым спиртом, чтобы не внести в организм микробы, содержащиеся на коже животного. На месте введения выстригают шерсть. Сведения о заражении записывают в журнал. Кроликов помещают в клетки, морских свинок и мышей – в металлические биксы, наклеивают этикетки, на которых указывают сведения о заражении, животных обеспечивают полноценным кормом и питьевой водой.

Вскрытие трупов лабораторных животных Вскрытие трупов животных производят стерильными инструментами, в боксе, с соблюдением правил асептики. Труп животного фиксируют брюшком вверх на деревянной доске или на пластинке застывшего парафина с помощью препаровальных игл. Кожно-шерстный покров обрабатывают антисептиком. Сначала исследуют кожу и подкожную клетчатку, затем проводят вскрытие, готовят мазки и делают посевы из органов грудной полости и из брюшной полости. При вскрытии обращают внимание на патологоанатомические изменения (рисунок 67). Посевы на МПБ и МПА из сердца или паренхиматозных органов делают после их прижигания шпателем пастеровской пипеткой. Из крови и из органов делают мазки. После окончания работы трупы сжигают или автоклавируют. При хранении до утилизации трупы засыпают хлорной известью или заливают дезрастворами.