Лекции / 8_Генетический подход

Микроядерный тест

Принцип метода заключается в образовании

микроядер вследствие нарушения распределения генетического материала между дочерними клетками (5%) или формирующихся из обломков хромосом (до 95%) при митотическом делении.

Подсчитывают обычно 500 бинуклеарных клеток, используя метод цитокинетического блока (цитохолазина-Б блокирует разделение цитоплазмы).

Возможность применения теста для биодозиметрии ограничена 2 – 4 годами после облучения.

Для проявления биологического эффекта в лимфоцитах крови необходимо, вероятно, несколько месяцев, т.ч. существует органические и «снизу».

Образование

микроядер

в митозе

Правила подсчета микроядер

Микроядра имеют округлую или овальную форму и обладают типичной ядерной окраской,

в цитоплазме одной бинуклеарной клетки может присутствовать одно микроядро и более,

микроядра меньше половины основного ядра,

регистрировать следует те микроядра, между которыми и основным ядром четко выявляется ядерная мембрана.

Реконструкция дозы γ-облучения по микроядерному тесту

При дозах от 1 до 4 – 5 Гр увеличение количества микроядер в клетках линейно для всех видов излучений.

При дозах от 0.05 до 2 Гр выход микроядер описан линейноквадратичной зависимостью.

В диапазоне доз 0.05 – 0.1 Гр имеется плато (дозонезависимый участок).

Реконструкция дозы γ-облучения по микроядерному тесту

Y 0,029 0,111D 0,011D2

где Y – количество микроядер на одну двуядерную клетку,

D – доза облучения.

Информацию по данному методу можно получить

Использование микроядерного теста для индикации пострадиационных эффектов у человека. Методические указания. – Л., 1991. – 14 с.

Микроядерный тест на растительных объектах

Этапы работы

Фиксация

Микроядра в клетках традесканции

Литература

Гераськин С.А., Сарапульцева Е.И., Цаценко Л.В. и др. Биологический контроль окружающей среды: генетический мониторинг: уч.пособие для студентов вузов / Под ред. С.А.Гераськина и Е.И.Сарапульцевой. – М.: Академия, 2010. 208 с.

Гриф УМО по классическому университетскому образованию

2. Мелехова О.П., Сарапульцева Е.И., Евсеева Т.И. и др. Биологический контроль окружающей среды: биоиндикация и биотестирование:

уч.пособие для студентов вузов / Под ред. О.П. Мелеховой и Е.И. Сарапульцевой. Изд. 3-е. – М.:

Академия, 2010. 288 с. Гриф Минобрнауки