Лекции / 8_Генетический подход
.pdfУчет аберраций хромосом в клетках корневой меристемы растений
Готовятся «давленные» препараты из апикальной меристемы и окрашиваются ацетоорсеином (ацетокармином).
В каждом препарате анализируются все метафазы.
Учитывается долю клеток с аберрациями хромосом.
Основные типы аберраций
Рассчитывается частота хромосомных аберраций (Ч, %), по формуле
ЧА 100
В
где А – число клеток с нарушениями,
В – общее число просмотренных клеток.
Рассчитывается спектр аберраций (К, %) :
К Д 100
В
где Д – число аберраций определенного типа, В – число просмотренных клеток.
Обзор методов оценки генотоксичности среды
Оценка по мейотическому индексу
Для оценки стабильности мейоза
используют интегральный показатель – мейотический индекс, который представляет собой процент нормальных тетрад к общему числу изученных клеток.
При мейотическом индексе 90% и выше растение считается цитологически стабильным, т.е. оно будет воспроизводить в потомстве число хромосом.
Геномные мутации
тетрада и 2 пентады |
пентада |
триада |
|
Обзор методов оценки генотоксичности среды
Оценка по митотическому индексу
Митотическая активность ткани определяется относительным числом клеток, находящихся в митозе.
Митотический индекс (МИ) – это отношение числа клеток, находящихся в митозе, к общему числу клеток исследуемой ткани (чаще всего на 1000 клеток).
Обзор методов оценки генотоксичности среды
Использование традесканции клон 02 для оценки мутагенности и токсичности среды.
1.Клон 02 гетерозиготен по окраске Дикий тип окраски цветков и клеток волосков тычинок − голубой − является доминантным, розовый − рецессивным.
2.Традесканция размножается вегетативно и поэтому ее генетическая изменчивость минимальна.
Метод учета соматических мутаций
Принцип метода оценки мутагенного воздействия факторов основан на учете соматических мутаций в клетках волосков тычинок традесканции.
Этапы работы
После 7-дневного проращивания срезать цветки в чашку Петри и поместить их на 15 мин в холодильник
Тычинки аккуратно отделить и поместить в смесь глицерина и воды на
предметное стекло