Лекции / 8_Генетический подход
.pdfИзменение голубой окраски клеток волосков тычиночных нитей на розовую рассматривают как фенотипическое проявление мутации в гетерозиготных по окраске клетках
Информацию по данному методу можно получить
Евсеева Т.И., Гераськин С.А.
Сочетанное действие факторов радиационной и нерадиационной природы на традесканцию. − Екатеринбург: УрО РАН, 2001. − 156 с.
Генетические тесты на животных
Мутагенные вещества можно оценить в отношении их способности индуцировать хромосомные повреждения у млекопитающих и насекомых.
Обычной тест-системой является культура клеток млекопитающих (например, культура лимфоцитов человека, клетки костного мозга лабораторных животных ).
Лимфоциты периферической крови человека в качестве тест-системы
не способны к делению в культуре,
могут быть стимулированы путем обработки митогеном (например, фитогемагглютиннином (ФГА),
культуру получают из образца свежевзятой крови и проводят культивирование на протяжении нескольких циклов делений.
Генетический тест оценки мутагенной активности вещества по частоте образования хромосомных аберраций
Хромосомные
аберрации анализируются в метафазах митотического деления клеток пролиферирующих тканей.
Типы аберраций
На верхнем рисунке сестринские хроматидные обмены.
На рисунке внизу метафазная пластинка с дицентриком.
Информацию по данному методу можно получить
Биологическая дозиметрия по хромосомным аберрациям в культуре лимфоцитов человека. Методические рекомендации. – Обнинск, 1979. – 16с.
Радиация и патология: Учеб. пособие / А.Ф.Цыб, Р.С.Будагов, И.А. Замулаева и др. / Под общ. ред. А.Ф. Цыба. –
М.: Высш. шк., 2005. – 341 с.
Балльная шкала
для получения интегральной характеристики цитогенетического состояния живых организмов
1 балл – условно нормальное состояние –
частота аберрантных клеток до 5% (в лимфоцитах человека 1 – 2%).
2 балла – низкая степень изменения –
частота аберрантных клеток в пределах 6 –
10%.
3 балла – средняя степень изменения –
частота аберрантных клеток в пределах 11 –
15%.
4 балла – высокая степень изменения –
частота аберрантных клеток в пределах 16 –
20%.
5 баллов – критическое состояние – частота аберрантных клеток выше 20%.
Микроядерный тест
заключается в количественной регистрации микроядер в клетках, находящихся на стадии телофазы митоза.
лимфоциты периферической крови сохраняют полученные повреждения в течение длительного времени.
Микроядра обнаруживаются в лимфоцитах сразу после первого митоза.
Для построения дозовой зависимости кровь облучают in vitro (или вносят в культуру мутаген) и спустя 72 ч от начала ФГА-стимуляции анализируют.