- •Молекулярная биология
- •ТРАНСМЕМБРАННАЯ ТРАНСЛОКАЦИЯ РАСТУЩЕГО ПОЛИПЕПТИДА
- •СИГНАЛЬНЫЙ ПЕПТИД
- •СИГНАЛЬНЫЙ ПЕПТИД
- •ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ СОБЫТИЙ В ПРОЦЕССЕ КОТРАНСЛЯЦИОННОГО ПРИКРЕПЛЕНИЯ РАСТУЩЕГО ПОЛИПЕПТИДА К МЕМБРАНЕ ЭНДОПЛАЗМАТИЧЕСКОГО РЕТИКУЛУМА
- •Узнавание
- •Структура бактериальной SRP частицы в комплексе с рецептором (SR)
- •ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ СОБЫТИЙ ИНИЦИАЦИИ ТРАНСМЕМБРАННОЙ ТРАНСЛОКАЦИИ
- •Белок Sec61p/SecY – трансмембранный пептид-проводящий канал (РСС) (или транслокон, или ТС)
- •Трансмембранный пептид-проводящий канал (вид с торца, со стороны цитоплазмы)
- •Схема расположения трансмембранных спиралей пептид-проводящего канала (белка Sec61 ) –
- •Схема расположения трансмембранных спиралей пептид-проводящего канала (белка Sec61 ) –
- •Трансмембранный пептид-проводящий канал (вид с торца, со стороны цитоплазмы) –
- •«Пробка» трансмембранного пептид-проводящего канала (a) и ее открывание при прохождении растущего пептида (b)
- •Стадии котрансляционной трансмембранной транслокации секреторного белка
- •Котрансляционная и посттрансляционная трансмембранная транслокация новосинтезированного белка у грам-отрицательных бактерий
- •ГИПОТЕЗА НЕСТРОГОГО СООТВЕТСТВИЯ
- •РАБОЧИЙ (ЭЛОНГАЦИОННЫЙ) ЦИКЛ РИБОСОМЫ
- •Антипараллельное кодон-антикодоновое взаимодействие
- •ЧТО ВЫЯВИЛОСЬ В ЭКСПЕРИМЕНТАХ К 1966 ГОДУ?
- •Антипараллельное кодон-антикодоновое спаривание
- •Спаривание
- •ЧТО ВЫЯВИЛОСЬ В ЭКСПЕРИМЕНТАХ К 1966 ГОДУ?
- •Спаривание
- •Спаривание 1-го основания антикодона с 3-им основанием кодона
- •Гипотеза Крика о “шатании” положений азотистых оснований при спаривании положения 1 антикодона с
- •Спаривание 1-го основания антикодона с 3-им основанием кодона
- •WOBBLE RULES
- •WOBBLE RULES
- •Модифицированные нуклеозиды, типичные для первого положения антикодона:
- •ИНГИБИТОРЫ ТРАНСЛЯЦИИ
- •Антибиотики – ингибиторы корректного связывания аминоацил-тРНК
- •АНТИБИОТИКИ – ИНГИБИТОРЫ АМИНОАЦИЛ-тРНК-СВЯЗЫВАЮЩЕГО УЧАСТКА (А-УЧАСТКА) НА МАЛОЙ (30S) РИБОСОМНОЙ СУБЪЕДИНИЦЕ
- •Место связывания тетрациклинов в непосредственной близости от А участка связывания
- •ЭЛОНГАЦИОННЫЙ ЦИКЛ:
- •АНТИБИОТИКИ – ИНГИБИТОРЫ АМИНОАЦИЛ-тРНК-СВЯЗЫВАЮЩЕГО УЧАСТКА (А-УЧАСТКА) НА МАЛОЙ (30S) РИБОСОМНОЙ СУБЪЕДИНИЦЕ
- •Рибосомная 30S субъединица, контактирующая сторона: район связывания аминогликозидов и аминоциклитолов
- •Связывание паромомицина с основанием спирали 44 16S рибосомной РНК
- •Рибосомная 30S субъединица, контактирующая сторона: расположение антикодоновых шпилек тРНК в А и Р
- •Ингибиторы транспептидации и около …
- •АНТИБИОТИКИ – ИНГИБИТОРЫ ТРАНСПЕПТИДАЦИИ
- •ЭЛОНГАЦИОННЫЙ ЦИКЛ: ИНГИБИТОРЫ ТРАНСПЕПТИДАЦИИ
- •МАКРОЛИДЫ – ИНГИБИТОРЫ ПРОДВИЖЕНИЯ РАСТУЩЕГО ПОЛИПЕПТИДА?
- •Ингибиторы транслокации
- •АНТИБИОТИКИ – ИНГИБИТОРЫ ТРАНСЛОКАЦИИ
- •ЭЛОНГАЦИОННЫЙ ЦИКЛ: ИНГИБИТОРЫ ТРАНСЛОКАЦИИ
- •АМИНОГЛИКОЗИДЫ И АМИНОЦИКЛИТОЛЫ КАК ИНГИБИТОРЫ ТРАНСЛОКАЦИИ?
- •АНТИБИОТИКИ – ИНГИБИТОРЫ ТРАНСЛОКАЦИИ НА ЭУКАРИОТИЧЕСКИХ РИБОСОМАХ
- •АНТИБИОТИКИ – ИНГИБИТОРЫ ТРАНСЛОКАЦИИ НА ЭУКАРИОТИЧЕСКИХ РИБОСОМАХ
- •Ингибиторы факторов элонгации
- •Гуанозинтрифосфат и его негидролизуемые и медленно гидролизуемые аналоги
- •АНТИБИОТИК – ИНГИБИТОР ОСВОБОЖДЕНИЯ ФАКТОРА ЭЛОНГАЦИИ EF-Tu ИЗ РИБОСОМЫ
- •ЭЛОНГАЦИОННЫЙ ЦИКЛ:
- •АНТИБИОТИКИ – ИНГИБИТОРЫ ОСВОБОЖДЕНИЯ БЕЛКОВЫХ ФАКТОРОВ ЭЛОНГАЦИИ
- •АНТИБИОТИКИ – ИНГИБИТОРЫ СВЯЗЫВАНИЯ БЕЛКОВЫХ ФАКТОРОВ ЭЛОНГАЦИИ
- •ЭЛОНГАЦИОННЫЙ ЦИКЛ: ИНГИБИТОРЫ ФАКТОРОВ ЭЛОНГАЦИИ
- •Схема доменной структуры фактора элонгации EF-G
- •«Молекулярная мимикрия»:
- •ПУРОМИЦИН – АНАЛОГ АМИНОАЦИЛ-тРНК, ИНГИБИТОР ТРАНСЛЯЦИИ
- •Ошибки связывания аминоацил-тРНК: «ложное кодирование»
- •Трансляция poly(U) в бесклеточной системе:
- •Трансляция poly(U) в бесклеточной системе:
- •Ложное кодирование на poly(U)
- •Ложное кодирование: проскок терминирующих кодонов
- •ЛОЖНОЕ КОДИРОВАНИЕ:
- •КИНЕТИЧЕСКАЯ ОСНОВА ЛОЖНОГО КОДИРОВАНИЯ
- •КИНЕТИЧЕСКАЯ ОСНОВА ЛОЖНОГО КОДИРОВАНИЯ
- •КИНЕТИЧЕСКАЯ КОРРЕКЦИЯ («РЕДАКТИРОВАНИЕ») КОДИРОВАНИЯ
- •КОНЕЦ.
Молекулярная биология
Лекция 10 курс А.С. Спирина
Трансмембранная транслокация. Ингибиторы трансляции.
Ложное кодирование.
15 апреля 2015 г.
ТРАНСМЕМБРАННАЯ ТРАНСЛОКАЦИЯ РАСТУЩЕГО ПОЛИПЕПТИДА
СИГНАЛЬНЫЙ ПЕПТИД
Отщепляемая сигнальная последовательность (n – h – c):
N-конец растущего полипептида, 15 – 30 аминокислотных остатков. Короткий «+»-участок (группа Lys, Arg, His) –
–гидрофобный участок (7 - 13 остатков, Leu, Ile, Phe, Trp, Ala) –
–консервативный участок (5 – 7 остатков, место расщепления).
G. Blobel and D.D. Sabatini (1970) Controlled proteolysis of nascent polypeptides in rat liver cell fractions. J. Cell Biol. 45:130-145.
G. Blobel and B. Dobberstein (1975) Transfer of proteins across membranes. J. Cell Biol. 67: 835-851.
СИГНАЛЬНЫЙ ПЕПТИД
Отщепляемая сигнальная последовательность (n – h – c):
N-конец растущего полипептида, 15 – 30 аминокислотных остатков. Короткий «+»-участок (группа Lys, Arg, His) –
–гидрофобный участок (7 - 13 остатков, Leu, Ile, Phe, Trp, Ala) –
–консервативный участок (5 - 7остатков, место расщепления).
Не отщепляемая сигнальная последовательность: Внутренняя часть растущего полипептида.
Группа «+»-аминокислот (Lys, Arg, His) –
– гидрофобный участок (20 - 25 остатков).
ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ СОБЫТИЙ В ПРОЦЕССЕ КОТРАНСЛЯЦИОННОГО ПРИКРЕПЛЕНИЯ РАСТУЩЕГО ПОЛИПЕПТИДА К МЕМБРАНЕ ЭНДОПЛАЗМАТИЧЕСКОГО РЕТИКУЛУМА
Arrest of elongation!
Узнавание |
Остановка |
|
сигнального |
||
трансляции |
||
пептида и |
||
|
||
мембранного |
|
|
рецептора. |
|
|
ГТФ-связывающий |
|
|
домен |
|
Структура бактериальной SRP частицы в комплексе с рецептором (SR)
Белок-рецептор SR
Белок
SRP54
ГТФ
4,5S РНК
S.F. Ataide, N. Schmitz, K. Shen, A. Ke, S. Shan, J.A. Dudna and N. Ban (2011) Science 331, 881- 886.
ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ СОБЫТИЙ ИНИЦИАЦИИ ТРАНСМЕМБРАННОЙ ТРАНСЛОКАЦИИ
Белок Sec61p/SecY – трансмембранный пептид-проводящий канал (РСС) (или транслокон, или ТС)
– вид сбоку
B. van den Berg, W.M. Clemons, I. Collinson, Y. Modls, E. Hartmann, S.C. Harrison and T.A. Rapoport (2004) X-ray structure of a protein-conducting channel. Nature 427: 36-44.