Диагностика.

Диагностика парвовирусных болезней плотоядных, как и других инфекционных болезней, предполагает учет комплекса признаков, характеризующих эпизоотологические параметры болезни, клиническую и патологоанатомическую картину, использование комплекса биохимических, серологических и других лабораторных методов для постановки окончательного диагноза.

Указанные параметры существенно различаются в зависимости от таких характеристик, как группа парвовирусов, вид животного, его физиологическое состояние, возраст. Различия в эпизоотологических параметрах в зависимости от этих характеристик могут быть очень большими – до полярных, даже если в популяции практически отсутствует иммунный фон. При наличии последнего, эпизоотологическая картина становится еще более трудно интерпретируемой. Так, например, парвовирусный энтерит норок обычно протекает в виде опустошительных эпизоотий с высоким уровнем заболеваемости и уровнем смертности среди заболевших 60-100%. Панлейкопения кошек, обычно протекает в виде спорадических случаев, энтериты собак (СПВ-2) в виде поражения локальных популяций, отдельных пометов и т.п. Вирус энтерита собак первой группы вообще не вызывает на иммунонекомпроментированных животных вспышек болезни, а протекает в виде отдельных легких случаев с благоприятным исходом. СААВ, как отмечалось, не имеет сопоставленной ему патологии. Алеутская болезнь норок имеет совершенно особенную эпизоотологическую характеристику, не схожую с прочими парвовирусными болезнями плотоядных, характерную, как уже отмечалось, для медленной инфекции.

Клиническая картина болезни для вирусов ПЛК и СПВ-2 в значительной степени обусловлена структурой и молекулярной биологией возбудителей. Вирусы ПЛК, энтерита норок, СПВ-1 и СПВ-2, подобно всем остальным парвовирусам, репродуцируются только в активно делящихся клетках. Это обусловлено тем, что их геном не несет информации о собственной ДНК-зависимой ДНК-полимеразе. ДНК синтезируется только на протяжении S-фазы клеточного цикла.

В то же самое время высокой избирательности в плане эндоцитоза у вирусов этой группы не зарегистрировано. Именно этим и обусловлен клеточный "тропизм" вируса. Термин тропизм взят в кавычки, потому, что в истинном значении слова тропность вируса – его сродство обусловлено как раз характером взаимодействия вирус-клетка на стадии эндоцитоза, а для обозначения возможности или невозможности продуктивного цикла репродукции после проникновения используются термины пермиссивные и непермиссивные клетки. В данном случае, как раз скорее под термином "тропизм" имеется в виду именно это – последнее.

Таким образом, парвовирусы плотоядных проникают практически во все клетки организма, а репродуцируются только в наиболее митотически активных тканях. У взрослых животных это органы кроветворения, ростки иммунокомпетентных клеток и постоянно регенерирующие клетки слизистого эпителия. В организме животных на позднем пренатальном и раннем неонатальном периоде быстрорастущими являются самые различные ткани, и зависит это от периода, когда происходит инфицирование. Отсюда весьма разнообразный спектр патологий. До девяти суток после рождения у плотоядных животных быстрорастущими являются почти все органы центральной нервной системы - головной мозг, мозжечок, оптический нерв, сетчатка глаз и т.д.

В раннем пренатальном периоде, все без исключения ткани организма, являются быстрорастущими. Инфицирование вирусом ПЛК кошачьих эмбрионов в этот период может иметь следствием целый ряд внутриутробных патологий, включающий уродства, ранние аборты, отмирание плодов, их мумификацию.

В зависимости от возраста животного нарушаются функции самых разных органов и тканей: ростков кроветворных клеток развивающейся сетчатой оболочки. В ходе взросления организма происходит смена органа – мишени на протяжении единого патологического процесса, что очень убедительно показано в работе Margolis, Kilham & Johnson.

Наиболее часто, особенно у взрослых животных различных видов, встречается поражение парвовирусами плотоядных одной из наиболее митотически активных тканей – постоянно репродуцирующегося эпителия кишечника.

В связи с этим большая часть парвовирусов плотоядных считается (и являются) этиологическими агентами энтеритов. Вместе с тем, в неблагополучных стадах наблюдаются, кроме энтеритов, нарушения внутриутробного развития плодов, нарушения в развитии новорожденных животных, формирование многочисленных врожденных аномалий.

При заражении кошек вирусом ПЛК, собак СПВ-1 и СПВ-2, вирус первоначально реплицируется в лимфоидной ткани глотки, это является первой стадией инфекционного процесса.

При ПЛК виремия начинается к исходу первых суток и продолжается до седьмого дня, при этом заражению подвергаются практически все органы и ткани. Наиболее заметные повреждения вирус вызывает в тканях с наиболее высоким митотическим потенциалом.

Лимфоидная ткань подвергается некрозу, тимус атрофируется и инволюционирует, если животные заражаются до девятинедельного возраста, клетки слизистого эпителия кишечника поражаются вирусом внутри крипт у основания кишечных ворсинок. У СПФ котят по сравнению с котятами - гнотобиотами поражение кишечного эпителия гораздо более выражено, что объясняется действием секундарной микрофлоры, усугубляющей повреждения кишечника первоначально индуцированные вирусом.

При заражении собак СПВ-1 и СПВ-2 виремия наступает несколько позднее - на 2-3 сутки после внедрения вируса в лимфоидную ткань глотки и продолжается в течение 2-5 дней. Важным моментом в развитии патологического процесса является уровень его накопления в первичном очаге.

Чем выше уровень накопления, тем интенсивнее виремия и тем значительнее ущерб, причиняемый организму вирусной репродукцией. К 7 суткам после заражения в крови появляются вируснейтрализующие антитела, что приводит к ограничению распространения вируса и его элиминации из организма. До наступления этого момента поражаются в организме все активные митотически ткани, после его наступления - только митотически активные ткани забарьерных органов, в первую очередь - клетки слизистого эпителия кишечника. У новорожденных поражается лимфопоэтическая и нервная ткани, ткани миокарда, клетки кишечного эпителия. У более взрослых щенков - практически только клетки кишечного эпителия.

Возникновение лейкопении характерно как для кошек - гнотобиотов, так и для кошек СПФ, что объясняется прямым действием вируса на быстро делящиеся лимфоидные клетки. В это же время наблюдается и лимфопения, что объясняется уже не прямым действием вируса на соответствующие бластные клетки, а ускоренным расселением лимфоцитов в поврежденные периферические органы, тем, что. Несмотря на это угнетения гуморального иммунного ответа обычно не наблюдается.

В организме котят, содержащихся в стандартных условиях, т.е. в присутствии условно-патогенной микрофлоры, картина поражений несколько иная. Поражения лимфоидных тканей и нервной системы на раннем неонатальном периоде аналогичны описанным, но поражение кишечного эпителия гораздо более выражено, поскольку кроме секундарной микрофлоры болезнь осложняется и патогенными энтеробактериями. Кроме того, часто наблюдается эндотоксемия и синдром диссеминированного внутрисосудистого свертывания. У котят, содержащихся во всех указанных выше условиях, которые оставались в живых к седьмым суткам после инфицирования, отмечали быстрое нарастание уровня вируснейтрализующих антител, что ведет к прекращению виремии и, затем, клиренсу внутренних органов.

Аналогичные изменениям при ПЛК, патологические процессы развиваются и при инфицировании собак парвовирусами СПВ-1, СПВ-2. Наиболее важное отличие состоит в том, что ПЛК при своем развитии в большей степени является системной инфекцией и основной мишенью патологического действия являются внутренние органы, а не эпителий кишечника, тогда как собачьи парвовирусы основной мишенью имеют на щенках позднего постнатального периода клетки кишечного эпителия.

Парвовирусы, как и все мелкие безоболочечные вирусы, высокочувствительны к непосредственному действию противовирионных эффекторов иммунитета и сравнительно менее чувствительны к противоклеточным эффекторам иммунитета. Причина этому следующая: при репродукции парвивирусов не происходит существенной модификации клеточной мембраны вирусными антигенами. В связи с этим для парвовирусов плотоядных весьма характерным является очень быстрое формирование иммунологического ответа, весьма эффективная пассивная (трасплацентарная, колостральная и терапевтическая) иммунизация.

Быстрое и эффективное формирование гуморального иммунного ответа приводит к появлению антител против антигенов, экспрессированных на поверхности вирионов. Эти антитела опосредуют реакцию нейтрализации вируса in vivo, что способствует быстрому связыванию вируса в иммунных комплексах и выведению основной его части через выделительную систему.

Вместе с тем, как и все безоболочечные вирусы, парвовирусы в составе иммунных комплексов остается инфекционными. Если посредством какого – либо механизма будет обеспечено его проникновение в чувствительные клетки, а зараженные клетки могут длительно персистировать в организме и разрушаются эффекторами иммунитета недостаточно эффективно для обеспечения клиренса организма. Еще более осложняется дело в тех случаях, когда чувствительными к репродукции вируса являются клетки "забарьерных" (по отношению к системному иммунитету) органов (кишечник при энтеритах, мозг, глаза) и клетки с Fc-рецепторами (ростки и субпопуляции иммунокомпетентных клеток, клетки костного мозга). Особенно четко это выражено при Алеутской болезни норок, когда сформировавшиеся иммунологические антительные механизмы имеют не защитный, а патологический потенциал.

Типичное течение процесса, вызванного парвовирусом можно охарактеризовать как быстрое наступление патологических изменений, что обусловлено высоким темпом репродукции вируса. Затем происходит быстрое формирование иммунных реакций, поскольку вирусу присущи высокая иммуногенность и высокая чувствительность к нейтрализации. Действием этих иммунологических механизмов обеспечивается клиренс сыворотки крови, выведение основной части вируса из организма. Однако для полного очищения организма необходимо уничтожение зараженных клеток, которое происходит очень медленно. В результате острая фаза болезни заканчивается, как правило, формированием вирусоносительства на более или менее продолжительный срок.

При вакцинации дело осложняется теми же чертами биологии возбудителей. Наличие даже незначительного количества материнских антител делает практически неэффективной иммунизацию живыми вакцинами. Парентеральное введение инактивированных вакцин не позволяет адекватно стимулировать иммунологические механизмы кишечного и респираторного трактов, центральной нервной системы. В том случае, если мишенями для вирусной репродукции являются клетки с Fc – рецепторами (вирус Алеутской болезни) иммунологические механизмы стимулируются, нормальным образом отвечают на стимул, но защитным потенциалом не обладают.

Наличие антигенных перекрестов между различными парвовирусами плотоядных еще более осложняет показанную выше картину перекрестным заражением с формированием иммунитета слабой напряженности.