- •Національний медичний університет імені о.О.Богомольця
- •Конкретні цілі:
- •2. Базовий рівень підготовки.
- •3. Організація змісту навчального матеріалу.
- •3.1 Зміст теми:
- •Теоретичні питання до заняття:
- •Практичні роботи (завдання), які виконуються на занятті:
- •. Рекомендації для оформлення протоколу. Методи лабораторної діагностики хламідіозів.
- •Мікробіологічна діагностика мікоплазма- і уреаплазма-інфекцій.
- •Лабораторна діагностика рикетсіозів.
- •Відобразити (переписати в протокол) таблицю:
- •План і організаційна структура навчального заняття.
- •Методика організації навчального процесу на практичному занятті.
- •. Підготовчий етап.
- •Основний етап.
- •Заключний етап.
- •Додатки:
- •Тестові завдання з теми: “Рикетсії, хламідії, мікоплазми. Мікробіологічна діагностика рикетсіозів, мікоплазмозів, хламідіозів”.
- •Тестові завдання з теми: “Рикетсії, хламідії, мікоплазми. Мікробіологічна діагностика рикетсіозів, мікоплазмозів, хламідіозів”.
- •Правильні відповіді
- •7. Рекомендована література.
Лабораторна діагностика рикетсіозів.
Патологічний матеріал: кров (джерело збудників), при Ку-гарячці – харкотиння, сеча, спинно-мозкова рідина, молоко, м’ясо тварин.
Мікроскопічний метод. Виявлення рикетсій в досліджуваному матеріалі, в організмі заражених тварин, курячих ембріонах. В тілі вошей, бліх, кліщів. Препарати зафарбовуються за Здродовським, Романовського-Гімзи.
Виділення збудника.
Методи культивування. Рикетсії не розмножуються в безклітинних середовищах, вони є облігатними внутрішньоклітинними паразитами. Культивуються на курячих ембріонах, фібробластах курячих ембріонів, на деяких культурах клітин (McCoy).
Біологічна діагностика. Для діагностики епідемічного висипного тифу (виділення R.prowazekii) біопроба малоефективна. Зараження тварин має діагностичне значення при Ку-гарячці, ендемічному висипному тифі (кров’ю хворого інфікують гвінейських свинок), при гарячці цуцугімуші (інфікують білих мишей, рідше хом’яків, бавовняних щурів). Але всілякі маніпуляції з рикетсіями дуже небезпечні (становлять великий ризик), тому виділення збудника проводять лише при наукових дослідженнях в спеціальних режимних лабораторіях.
Серологічна діагностика – основа сучасної лабораторної діагностики. Застосовують реакцію Вейля-Фелікса, аглютинації з рикетсіями, РНГА, РЗК, непряму РІФ (дозволяє ідентифікувати IgM і IgG, що дає можливість ранньої діагностики і визначення стадії хвороби).
Надійні результати можливі лише в кінці першого тижня захворювання. Крім визначення діагностичних титрів, необхідно також орієнтуватись на наростання титрів антитіл, що має більше епідемічне значення.
Полімеразна ланцюгова реакція розроблена для діагностики активних форм ерліхіозів.
Відобразити (переписати в протокол) таблицю:
Класифікація хламідій
Порядок Chlamydiales
Р одина Chlamydiacea
Р ід Chlamydia
Chlamydia trachomatis Chlamydia psittaci Chlamydia pneumoniae
Таблиця 1. Збудники хламідіозів
Види |
Захворювання |
Серовари |
Chlamydia trachomatis |
Трахома і паратрахома |
A, B, Ba, C |
Урогенітальний хламідіоз і пневмонія новонароджених |
D, F, G, H, I, J, K |
|
Венерична гранульома |
L1, L2, L3 |
|
Chlamydia psittaci |
Орнітози (первинні патогени тварин) |
13 (?) |
Chlamydia pneumoniae |
Пневмонія, ГРЗ, атеросклероз, саркоідоз, бронхіальна астма |
TWAR, AR, KA, CWL |
Класифікація мікоплазм
Клас Mollicutes
(mollis-м’який, cutes-шкіра)
П орядок Mycoplasmatales
Родина Родина Родина
M ycoplasmataceae Acholeplasmataceae Spiroplasmataceae
Рід Mycoplasma рід Ureaplasma рід Acholeplasma рід Spiroplasma
Таблиця 2. Збудники основних мікоплазмозів у людини
Вид мікоплазм |
Захворювання |
M.pneumoniae (агент Ітона) |
Атипові пневмонії, фарингіти, ГРЗ |
M.hominis, Ureaplasma urealyticum |
Уретрити, цервіцити, простатити, вульвовагініти, пієлонефрити, патологія вагітності і плода, ін фертильність чоловіків. |
M.hominis, M.fermentans, M.arthritidis |
Артрити за типом ревматоїдного |
Таблиця 3. Основні біохімічні властивості мікоплазм, патогенних для людини
Вид |
Гідроліз аргініну |
Утворення кислоти при ферментації глюкози |
Утворення кислоти при ферментації манози |
Відновлення солей тетразолію (а.у.*/ан.у.*) |
M.pneumoniae |
- |
+ |
+ |
+/+ |
M.hominis |
+ |
- |
- |
-/- |
M.fermentans |
+ |
+ |
- |
-/+ |
M.genitalium |
- |
+ |
|
+/- |
* а.у. – аеробні умови; ан.у. – анаеробні умови.
Класифікація патогенних для людини ріккетсій
Порядок Rickettsiales
Р одина Rickettsiaceae
Триба Rickettsiaea
Р оди Rickettsia Orientia Erlichia Coxiella Bartonella
(Rochalimaea)
Група R.prowazekii O.tsutsugamushi E.sennetsu С.brunetti B.quintana
висипного R.Mooseri (Японія, лім- B.henselae
тифу фоїдна гіпер-
плазія)
Група R.rickettsii E.chaffensis
плямистої R.conorii (Північна Америка,
гарячки R.australis Європа, Азія;
Скелястих R.sibirica периваскуліти,
гір R.acari гранульоми)
Завдання 1. Визначити морфологічні властивості рикетсій і хламідій в демонстраційних препаратах.
Препарат рикетсій 2. Включення хламідій в клітинах
(за Здродовським) циліндричного епітелію уретри
хворого на хламідіоз
(заб. за Романовським-Гімзи)
Завдання 2. Здійснити облік реакції аглютинації рикетсій (РАР), поставленої з метою серодіагностики рикетсіозів.
Завдання 3. Здійснити облік реакції зв’язування комплементу (РЗК), поставленої з метою серодіагностики висипного тифу.
Завдання 4. Здійснити облік реакції непрямої гемаглютинації (РНГА), поставленої з метою серодіагностики висипного тифу.
Завдання 5. Вивчити зразки препаратів, які використовують для діагностики, специфічної профілактики і лікування рикетсіозів.