- •Тема 1. Введение. Предмет и задачи микробиологии. Классификация микроорганизмов
- •Основы бактериологии
- •Тема 2. Основы морфологии бактерий.
- •Размер бактерий
- •Основы бактериологии
- •Тема 3. Физиология и биохимия бактерий. Строение и классификация грибов.
- •Тема 4. Знакомство с микробиологической лабораторией. Микроскопические методы исследования морфологии бактерий и грибов.
- •Ема 5. Бактериологические методы исследования.
- •Тема 9. Паразитологические методы исследования. Лабораторная диагностика инвазий.
- •Тема 10
- •Тема 11. Вирусологические методы исследования.
- •Тема 12. Генетика микроорганизмов и генная инженерия в медицинской микробиологии
- •Влияние факторов окружающей среды на микроорганизмы
- •Тема 13. Основы экологической микробиологии. Микрофлора тела здорового человека.
- •Значение микрофлоры тела для человека
- •Влияние факторов окружающей среды на микроорганизмы
- •Тема 14. Действие физических, химических и биологических факторов внешней среды на микроорганизмы.
- •Влияние факторов окружающей среды на микроорганизмы
- •Тема 15. Микробиологические основы химиотерапии и химиопрофилактики инфекционных болезней.
- •Асептика
- •Тема 16. Методы стерилизации и дезинфекции. Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам.
- •Методы стерилизации и дезинфекции в микробиологической лаборатории.
- •Лабораторная диагностика дисбактериоза
- •Тема 17. Учение об инфекции. Патогенность микроорганизмов.
- •Факторы вирулентности вирусов
- •Тема 17. Учение об инфекции. Патогенность микроорганизмов.
- •Основы эпидемиологии
- •Тема 18. Основы эпидемиологии. Основы клинической микробиологии.
- •Тема 19. Микробиологические основы борьбы с внутрибольничными инфекциями.
- •Основы иммунологии
- •Тема 20. Понятие об иммунологии. Неспецифические факторы защиты организма человека.
- •Структура иммунной системы
- •Тема 20. Понятие об иммунологии. Неспецифические факторы защиты организма человека.
- •Структура иммунной системы
- •Тема 21. Антигены.
- •Тема 22. Иммунная система организма человека. Антитела.
- •Тема 23. Формы иммунитета. Виды иммунитета.
- •Регуляция иммунного ответа
- •Основы клинической иммунологии
- •Тема 24. Клиническая иммунология: аллергия, иммунодефицитные состояния.
- •Реакции гиперчувствительности (аллергические)
- •Аутоиммунная патология
- •Иммунодефицитные состояния
- •Оценка иммунного статуса человека
- •Основы иммунодиагностики
- •Тема 25. Применение реакции антиген-антитело в медицинской практике (иммунодиагностика).
- •Иммуномикробиологические исследования
- •Тема 26. Иммуномикробиологические исследования. Реакции агглютинации и преципитации.
- •Иммуномикробиологические исследования Серологические реакции в микробиологических и иммунологических лабораториях используют в двух целях:
- •Иммунологические реакции выявления специфических антигенов
- •Условные обозначения: - торможение гемагглютинации (пуговка) ; - гемагглютинация (зонтик).
- •Определение групп крови аво
- •9. Реакция гемагглютинации (рга)
- •Тема 27. Реакции связывания комплемента. Риф и ифа.
- •Реакция связывания комплемента
- •Метод флюоресцирующих антител (мфа) или реакции иммунофлюоресценции (риф)
- •Иммуноферментный анализ (ифа)
- •Основы иммунопрофилактики
- •Тема 28. Основы иммунотерапии и иммунопрофилактики.
- •Иммунотропные лекарственные средства
- •Специфическая иммунопрофилактика и иммунотерапия вакцины
- •Иммунные сыворотки и иммуноглобулины
- •Основы иммунопрофилактики
- •Тема 29. Изучение препаратов, применяемых для иммунопрофилактики и иммунотерапии.
- •Вакцинопрофилактика
- •Серопрофилактика и серотерапия
- •Определение пригодности иммунобиологических препаратов
- •Тема 30. Основы иммунологии.
Условные обозначения: - торможение гемагглютинации (пуговка) ; - гемагглютинация (зонтик).
Выводы: Исследуемый материал содержит вирус гриппа тип А с антигеном H3N2
Определение титра антител крови больного по РТГА
Развернутая РТГА проводится в лунках пластмассовых пластин. В лунках готовят 2-х кратные разведения исследуемой сыворотки в объеме 0,25 мл, добавляют по 0,25 взвеси вируса в рабочем разведении и инкубируют 2 ч при температуре 37°С. Затем добавляют по 0,5 мл 1% взвеси куриных эритроцитов, инкубируют еще 2 ч и оценивают результат по феномену гемагглютинации. При положительной РТГА образуется плотный осадок эритроцитов на дне лунки в виде диска или кольца с ровными краями. Титр антител определяют по последней лунке с положительной РТГА.
Рис. 10. Определение титра антител по РТГА.
Выводы: титр антител равен 1:40.
8. Результаты реакции нейтрализации выделенных от больных вирусов с моновалентными иммунными сыворотками к вирусам полиомиелита I-III типов.
Выделение энтеровирусов из исследуемого материала осуществляют путем заражения клеточных культур. Индикацию вирусов проводят по цитопатогеному действию (ЦПД): на 2-3-й день инкубации при 35°С наблюдается полная или частичная дегенерация клеток. Основным методом идентификации выделенного вируса является серотипирование в реакции нейтрализации. С этой целью материал из чистой культуры выделенного вируса обрабатывают смесью диагностических моновалентных сывороток к различным серотипам энтеровирусов. При этом в начале определяют тип вируса, затем его принадлежность к определенному серотипу.
Рис. 11. Реакция нейтрализации вирусов в культуре клеток: А - цитопатогенный эффект (ЦПЭ) или цитопатогенное действие (ЦПД) в результате размножения вирусов; Б - ЦПЭ отсутствует в результате предварительной нейтрализации вирусов антителами.
Рис. 12. Постановка и учет реакции нейтрализации вирусов в культкре клеток. Условные обозначения: + - ЦПД; – - отсутствие ЦПД.
Выводы: В исследуемом материале определен вирус полиомиелита серотип I.
Определение групп крови аво
9. Реакция гемагглютинации (рга)
Аг (эритроциты крови) + АТ (стандартная сыворотка) + электролит = гемагглютинат
На плоскость (тарелку, планшет) наносят глазной пипеткой, индивидуальной для каждой ампулы, по 2 кап. (0,1 мл) стандартной сыворотки двух различных серий каждой группы слева направо: Оab(I), Аb(II), Вa(III). Итого 6 капель на расстоянии 3-4 см друг от друга. Рядом со стандартными сыворотками наносят по 1 кап. исследуемой крови величиной с булавочную головку - 0,01 мл 20% взвеси исследуемых эритроцитов. Встряхиванием перемешивают сыворотку с кровью, периодически покачивают и смотрят результат через 5 минут. В те капли, где наступила агглютинация, вносят по 1 кап. физиологического раствора.
Оценка результатов
Нет агглютинации во всех сыворотках - это Оab(I) группа крови
Агглютинация в сыворотках Оab(I) и Вa(III) - это Аb(II) группа крови
Агглютинация в сыворотках Оab(I) и Аb(II) - это Вa(III) группа крови
Агглютинация во всех сыворотках - это АВ0(IV) группа крови
Рис. 13. Результат РГА при определении группы крови АВО: а) - отрицательная РГА (нет гемагглютинации); б) - положительная РГА (гемагглютинация).
Если сыворотки всех трех групп дали положительную реакцию, то для исключения неспецифической агглютинации необходимо провести дополнительное контрольное исследование со стандартной сывороткой АВ0(IV) группы. Для этого на плоскость наносят большую (0,1 мл) каплю сыворотки АВ0(IV) и к ней добавляют маленькую (0,01 мл) каплю исследуемой крови и смотрят результат через 5 минут. Лишь отсутствие агглютинации в этой капле при наличии ее в каплях со стандартными сыворотками групп Оab(I), Аb(II) и Вa(III) позволяет считать реакцию специфической и отнести исследуемую кровь к группе АВ0(IV).