- •З біологічної хімії
- •Рецензент проф. В.Д. Бовт
- •Питання до іспиту……………………………………………………………… 79
- •Тематичне розподілення навчального матеріалу а. Тематичне розподілення лекційного матеріалу
- •В. Тематичний план лабораторних і семінарських занять
- •Техніка безпеки при роботі у біохімічній лабораторії
- •Забороняється з метою уникнення травм, опіків, нещасних випадків:
- •Перша домедична допомога
- •Вимоги до оформлення лабораторного журналу і робочого місця
- •Теоретична частина:
- •Практична частина:
- •Теоретична частина:
- •Практична частина:
- •Контрольні питання
- •Теоретична частина:
- •Практична частина:
- •Питання до семінарського заняття:
- •Теоретична частина:
- •Практична частина:
- •Контрольні питання
- •Теоретична частина:
- •Практична частина:
- •Контрольні питання
- •Теоретична частина:
- •Цитозін
- •Практична частина:
- •Контрольні питання
- •Теоретична частина:
- •Властивості ферментів:
- •Реакція
- •Практична частина:
- •Теоретична частина:
- •Практична частина:
- •Контрольні питання
- •Питання до семінарського заняття:
- •Теоретична частина:
- •Тканьовий подих
- •Практична частина:
- •Контрольні питання
- •Питання до семінарського заняття:
- •Теоретична частина:
- •Катаболізм амінокислот:
- •Біосинтез сечовини (орнітиновий цикл)
- •Практична частина:
- •Теоретична частина:
- •Практична частина:
- •Питання до семінарського заняття:
- •Теоретична частина:
- •Взаємний зв'язок різних форм обміну речовин в організмі
- •Практична частина
- •Контрольні питання
- •Питання до семінарського заняття:
- •Питання до іспиту
- •Список рекомендованої літератури
- •Практикум з біологічної хімії до лабораторних і семінарських занять для студентів біологічного факультету денної та заочної форм навчання
Практична частина:
Мета роботи: Навчитися визначати концентрацію глюкози в сироватці крові за допомогою ортотолуїдинового реактиву. Для виконання роботи необхідно вивчити такі питання теорії:
Контрольні питання
-
Методи визначення концентрації глюкози.
-
Постійність концентрації глюкози і механізми, що забезпечують цю постійність.
-
Практичне використання визначення концентрації глюкози.
-
Перетравлення вуглеводів у шлунково-кишковому тракті.
-
Нервова й ендокринна регуляція вуглеводного обміну.
-
Синтез глікогену. Розщеплення глікогену.
-
Гліколіз. Реакції субстратного фосфорилювання.
-
Цикл трикарбонових кислот (цикл Кребса).
-
Дихальний ланцюг. Характеристика і структура переносників дихального ланцюга.
-
Гліконеогенез
-
Пентозофосфатний шлях розпаду вуглеводів і його біологічна роль.
-
Енергетичні ефекти окиснення глюкози.
Практичне значення роботи: Найчастіше зумовленим показником вуглеводного обміну з діагностичними цілями є вміст глюкози в крові і сечі. Підвищення рівня глюкози (гіперглікемія) є досить частим симптомом при різноманітних захворюваннях, насамперед пов'язаних із ураженням ендокринної системи (цукровий діабет, пухлини кори наднирників, гіперфункції щитовидної залози, захворювання печінки, органічні ураження ЦНС).
Принцип методу: глюкоза при нагріванні з ортотолуїдином у розчині трихлороцтової кислоти (ТХУ) дає синьо-зелене забарвлення, інтенсивність якого прямо пропорційна концентрації глюкози в крові.
Матеріали і реактиви: ортотолуїдиновий реактив, 3 %-ний розчин трихлороцтової кислоти, основний стандартний розчин глюкози - 27,80 ммоль/л, центрифуга, центрифужні пробірки, штатив із пробірками, водяна лазня, фотоелектроколориметр, кювети із шириною прошарку 10 мм.
Хід роботи: У дві центрифужні пробірки наливають по 0,9 мл розчину трихлороцтової кислоти, потім в одну з них вносять 0,1 мл сироватки крові, а в другу - 0,1 мл стандартного розчину глюкози, розведеного перед вжитком у 5 разів із концентрацією 5,55 ммоль/л. Вміст пробірок збовтують і центрифугують при 3000 об/хв 10 хвилин. У 2 пробірки відбирають по 0,5 мл надосадочної рідини і додають по 4,5 мл ортотолуїдинового реактиву. Пробірки поміщають у киплячу водяну лазню на 5 хвилин, охолоджують їх під струменем холодної води і вимірюють на ФЕК оптичну щільність проб у кюветах проти контрольної проби з червоним світлофільтром (λ = 600 - 650 нм).
При проведенні контрольної проби до 4,5 мл ортотолуїдинового реактиву доливають 0,5 мл трихлороцтової кислоти. Далі пробу обробляють так само, як і дослідну.
Розраховують глюкозу за формулою:
де Соп - конц. глюкози в дослідній пробі (ммоль/л);
Сст - конц. глюкози в стандартній пробі, близька до фізіологічної (5,55 ммоль/л);
Еоп - оптична щільність дослідної проби;
Ест - оптична щільність розчину стандарту.
Нормальний вміст глюкози в сироватці крові коливається 3,33 - 4,99 ммоль/л.
Результат і висновок.
Заняття № 12.
Тема: ОБМІН ВУГЛЕВОДІВ (СЕМІНАР)
Питання до семінарського заняття:
Скласти схему метаболізму вуглеводів на окремому аркуші.
-
Загальна характеристика вуглеводів. Значення для живих організмів.
-
Класифікація вуглеводів.
-
Характеристика моносахаридів. Представники та їх будова. Оксикарбонільні і циклічні форми. Явище таутомерії і мутаротації. Хімічні властивості.
-
Характеристика дисахаридів. Представники та їх будова. Фізичні й хімічні властивості.
-
Характеристика полісахаридів (крохмаль, целюлоза, гепарин).
-
Методи визначення концентрації глюкози.
-
Постійність концентрацій глюкози і механізми, що забезпечують цю постійність.
-
Практичне використання методу визначення концентрації глюкози.
-
Перетравлення вуглеводів у шлунково-кишковому тракті.
-
Усмоктування моносахаридів.
-
Нервова й ендокринна регуляція вуглеводного обміну.
-
Синтез глікогену. Розщеплення глікогену (глікогеноліз).
-
Анаеробна фаза окислювання вуглеводів. Гліколіз. Реакція субстратного фосфорилювання. Глікозил-трансферазні реакції.
-
Аеробне окиснення вуглеводів.
-
Дихальний ланцюг. Характеристика і структура переносників дихального ланцюга.
-
Гліконеогенез.
-
Пентозофосфатний цикл.
-
Енергетичні ефекти окиснення глюкози.
Заняття № 13.
Тема: ПЕРЕТРАВЛЕННЯ БІЛКІВ У ШЛУНКОВО-КИШКОВОМУ ТРАКТІ