3.2 Влияние регуляторов роста на органогенез фиалки и цимбидиума в культуре in vitro
Немаловажный фактор, влияющий на успех клонального микро-размножения растений, это гормональный состав питательной среды. Нам предстояло изучить влияние различных концентраций ряда регуляторов роста на органогенез цимбидиума и фиалки in vitro 6-БАП (0,1-4,0 мг/л), Рибав-Экстра (10-2 -10-7 %) и Эпин-Экстра (10-2 -10-7 %).
При изучении влияния регуляторов роста на длину побегов цимбидиума, было установлено, что наиболее оптимальной была среда с добавлением 10-4% и 10-5 % Эпин-Экстра и 10-4 % Рибав-Экстра. Причем на среде с добавлением Эпин-Экстра, помимо роста побегов, происходило большое образование псевдобульб. При этом самое большое количество псевдопульб образовывалось на концентрации 10-6 и 10-7 %, а самая большая длина побега наблюдалась на концентрации 10-4 и 10-5 %, именно при этой концентрации наблюдался активный рост цимбидиума (рисунок 3.5).
10-2
10-3
10-4
10-5
10-6
10-7
Рисунок 3.5 – Влияние различной концентрации Эпин-Экстра на длину побегов у цимбидиума
10-2
10-3
10-4
10-5
10-6
10-7
Рисунок 3.6 – Влияние различной концентрации Эпин-Экстра на образование псевдобульб у цимбидиума
а)
б)
Рисунок 3.7 – Образование псевдобульб у цимбидиума с добавлением Эпин-Экстра: а) концентрация 10-6 %; б) концентрация 10-7 %
Активный рост побегов происходил и на среде с добавлением Рибав-Экстра, но здесь не происходило столь обильного образования пульб, а на концентрациях 10-3 – 10-4 % их вообще не образовывалось. Максимальная длина побегов наблюдалось на концентрации 10-4 % и она составила в среднем 20 мм (рисунок 3.8).
10-2
10-3
10-4
10-5
10-6
10-7
Рисунок 3.8 – Влияние различной концентрации Рибав-Экстра на длину побегов цимбидиума
Также применение Рибав-Экстра способствовало образованию корней у цимбидиума, но корнеобразование происходило не на всех концентрациях, а только на концентрации 10-2 и 10-4 %, где происходил активный рост побегов.
а)
б)
Рисунок 3.9 – Побегообразование и корнеобразование на среде с добавлением Рибав-Экстра: а) концентрация 10-2 %; б) концентрация 10-4 %
а)
б)
Рисунок 3.10 – Процесс роста корней и побегов у цимбидиума с добавлением 10-4 % Рибав-Экстра: а) 3 недели; б) 6 недель
Использование 6-БАП в качестве регулятора роста тоже дало не плохие результаты, максимальная длина побега для цимбидиума составила в среднем 14,5 мм на концентрации 1,0 мг/л и 3,0 мг/л. Образование псевдобульб происходила не на всех концентрациях и в малых количествах 4-5 шт. на эксплант.
Рисунок 3.11 – Влияние различной концентрации 6-БАП на длину побегов у цимбидиума
Рисунок 3.12 – Образование псевдопульб у цимбидиума с добавлением
6-БАП (2,0 мг/л)
а)
б)
Рисунок 3.13 – Рост побегов у цимбидиума с добавлением 6-БАП:
а) концентрация 1,0 мг/л; б) концентрация 3,0 мг/л
Также было установлено, что применение 6-БАП способстововало образованию каллуса у цибидиума и только в единичном случае на концентрации 3,0 мг/л.
Рисунок 3.14 – Образование каллуса у цимбидиума при добавлении
6-БАП (3,0 мг/л)
Что касается фиалок, то для них самая оптимальная среда была сдобавлением Эпин-Экстра. Данные показали, что именно Эпин-Экстра стимулировал образование большого количества розеток у фиалки, что даже затрудняло их подсчет. Самое большое количество розеток образовывалось на концентрации 10-2 % и 10-4 % и составила в среднем 16 шт./эксплант.
10-2
10-3
10-4
10-5
10-6
10-7
Рисунок 3.15 – Влияние различных концентраций Эпин-Экстра и Рибав-Экстра на образование розеток у фиалок
а)
б)
Рисунок 3.16 – Образование розеток у фиалки на среде с добавление Эпин-Экстра: а) концетрация 10-2 %; б) концентрация 10-4 %
Применение Рибав-Экстра в меньшей степени стимулировало образование розеток, но зато в большей степени оказывало влияние на размер листьев.
Рисунок 3.17 – Фиалка на среде с добавлением 10-5 % Рибав-Экстра
Применение 6-БАП также активизировало ростовые процессы и образование новых розеток, но в меньшей степени.
Рисунок 3.18 – Влияние различной концентрации 6-БАП на образование розеток у фиалки
а)
б)
Рисунок 3.19 – Образование розеток у фиалки с добавлением 6-БАП:
а) концентрация 0,5 мг/л; б) концентрация 2,5 мг/л
Итак было доказано, что применение регуляторов роста оказывает существенное влияние на органогенез данных растений.