Лабораторная работа №5 Диазореакция на гистидин и тирозин (Паули)

Цель работы:

Провести диазореакция на гистидин и тирозин (Паули)

Ход работы:

1. В 2 пробирки наливают по 3 капли1% раствора сульфаниловой кислоты в 2% соляной кислоте, по 3 капли 5% раствора азотистокислого натрия и перемешивают. К полученному раствору добавляют: в одну пробирку5 капель 1% раствора яичного белка, в другую – 5 капель пшеничного белка и в каждую – по 3-5 капель 10% раствора углекислого натрия. Жидкость в обоих пробирках окрашивается в красный цвет.

2. К небольшому количеству диазореактива добавляют 5 капель 10% раствора соды и осторожно по стенке пробирки наслаивают раствор белка. На границе двух жидкостей появляется красное кольцо.

Вывод:

В данной лабораторной работе мы провели диазореакцию на гистидин и тирозин (Паули). При добавлении диазореактива к щелочному раствору белка жикость приобретает ранжево-красное окрашивание.

Реакция обусловлена присутствием в белке аминокислот гистидина и тирозина, которые, реагируя с диазобензосульфокислотой, образуют азокраситель красного цвета.

Лабораторная работа №6 Реакция на триптофан Адамкевича и Шульца-Распайля

Цель работы:

Провести реакцию на триптофан Адамкевича и Шульца-Распайля

Ход работы:

1. Реакция Адамкевича. В 3 пробирки наливают: в первую – 5 капель 1% раствора яичного белка, во вторую – 5 капель 1% раствора пшеничного белка и в третью – 5 капель 1% раствора желатина. В каждую пробирку добавляют по 5 капель концентрированной уксусной кислоты, слегка нагревают и затем подслаивают равным объемом концентрированной серной кислоты. В первых 2 пробирках с растворами яичного и пшеничного белка на границе двух слоев жидкости появляется красно-фиолетовое кольцо. В пробирке с раствором желатина реакция получается отрицательной.

2. Реакция Шульца-Распайля. В 3 пробирки наливают: в первую – 5 капель 1% раствора яичного белка, во вторую – 5 капель 1% раствора пшеничного белка, в третью – 5 капель 1% раствора желатина. В каждую пробирку добавляют по 1 капле 10% раствора сахарозы, перемешивают и подслаивают равными объемами концентрированной серной кислоты. В пробах с растворами яичного и пшеничного белка на границе двух слоем жидкости образуется красно-фиолетовое кольцо. В пробирке с растворами желатины окрашивание не наблюдается.

Вывод:

В данной лабораторной работе мы провели реакцию на триптофан Адамкевича и Шульца-Распайля. Если к раствору белка добавить концентрированную уксусную кислоту или тростниковый сахар, а затем осторожно по стенке пробирки спускать из пипетки концентрированную серную кислоту, то на границе двух жидкостей образуется красно-фиолетовое кольцо.

Реакция обусловлена наличием в белке триптофана, который, реагируя с глиоксилевой кислотой, присутствующей в виде примеси в концентрированной уксусной кислоте, дает окрашенный продукты конденсации. Концентрированная серная кислота принимает участие в реакции в качестве водоотнимающего вещества. Содержание триптофана в яичном и соевом белке в 2 раза больше, чем в пшеничном, в желатине триптофана нет.