3. Характеристика продуцента

Леворин продуцируется микроорганизмом Streptomyces levoris штамм 78.

Типичные для штамма 78 колонии в рассеве популяции составляют 98-99%, морфологически измененные мутанты 1-2%.

Типичные колонии крупные 9-12 мм в диаметре, плоские с радиальными складками, центр приподнят, край неровный. Воздушный мицелий хорошо развит, мучнистый белый (Д-3); субстратный- буланый (К-1). Среда не окрашена.

Косяки выращивают в течение 12 суток, а потом проводят наиболее активного варианта. Для этого проверяют антибиотическую активность 100 вариантов. Отбирают 5-7 наиболее активных вариантов.

После вторичной проверки этих вариантов, из них выбирают 1-2 наиболее активных, которые используются для приготовления посевной партии.

4. Выбор и обоснование метода производства

Для производства леворина используют метод периодической ферментации.

Периодическая ферментация – это периодический процесс, происходящий при единовременной загрузке всех компонентов питательной среды и посевного материала в ферментатор. Затем проводят процесс глубинного культивирования, по окончании которого происходит единовременная выгрузка содержимого.

Выращивание посевного материала происходит в два этапа:

1. Выращивание посевного материала в инокуляторах: инокуляторы засевают мицелием из колб или суспензией споровой культуры продуцента Str. Levoris штамм 78, процесс длится 50 ч при температуре 28 ^оС при постоянном перемешивании и аэрации.

2. Выращивание посевного материала в посевных аппаратах: из инокуляторов инокулюм передают в посевные аппараты вследствии разницы давлений. Цель этого этапа состоит в следующем:

• нарастить биомассу посевного материала;

• получить посевной материал высокого качества, чтобы обеспечить максимальный синтез целевого продукта.

Процесс длится 48 ч, при температуре 28 ^оС при постоянном перемешивании и аэрации.

Биосинтез целевого продукта в ферментаторе происходит при определенных значениях температуры, рН, аэрации, перемешивании. Процесс осуществляется путем глубинного культивирования продуцента на питательной среде. Для поддержания постоянства концентраций осуществляется дозация источника углеводов в виде стерильного раствора зеленой патоки. Она подаются с определенной скоростью и периодичностью.

В случае пенообразования подается стерильный пеногаситель - адеканоль.

Процесс длится 115 ч, при температуре 28 ^оС, постоянном перемешивании и аэрации.

Выгрузка всего объема культуральной жидкости происходит одновременно.

Для первичной обработки культуральной жидкости выбран метод химической коагуляции. Термическую коагуляцию применять нельзя вследствие нестабильности целевого продукта при нагревании.

Фильтрация культуральной жидкости осуществляется на вакуум-барабанном фильтре с намывным слоем, т.к. другие способы фильтрации малоэффективны из-за плохой фильтруемости культуральной жидкости.