- •Cодержание
- •1. Введение
- •2. Характеристика готового продукта
- •3.2 Биогенез молекулы леворина
- •3. Характеристика продуцента
- •4. Выбор и обоснование метода производства
- •5. Выбор и технико-экономическое обоснование места строительства производства
- •6. Характеристика сырья и материалов
- •7.Изображение и описание технологической схемы производства
3.2 Биогенез молекулы леворина
Леворин - ароматический полиеновый макролидный антибиотик, гептаен. Структурно гептаены представляют собой макролактон, к которому гликозидно присоединены аминосахара (микозамин) и ароматические кетоны (пара-аминоацетофенон).
Механизм биосинтеза полиеновых антибиотиков изучен недостаточно. Однако получены доказательства того, что полиеновые антибиотики и жирные кислоты имеют общих предшественников, а их углеводородная цепь синтезируется, подобно жирным кислотам, путем последовательной конденсации производных коэнзима А.
Существует так называемая ацетатная теория, согласно которой полиены синтезируются путем конденсации ацетатных и пропионатных единиц по принципу «голова-хвост». При этом происходит образование связи между углеродным атомом карбоксильной группы ацетата и метильной группы пропионата. Но для вступления в реакцию как уксусная, так и пропионовая кислота сначала должны активироваться. Активация происходит за счет образования тиоэфирной связи с коферментом А с образованием ацетил- и пропионил- КоА. И Только затем эти структурные единицы карбоксилируются с обрахованием малонил-КоА из ацетил-КоА и метилмалонил-КоА из пропионил-КоА.
НООС – СН2 – С = О НООС - СН – С = О
SКоА СН3 SКоА
малонил – КоА метилмалонил – КоА
Для осуществления этих реакций у продуцентов полиеновых антибиотиков имеются два фермента, которые различаются донорами карбоксильных групп и субстратной специфической.
Первый фермент – ацетил – Ко – карбоксилаза.
В этом случае субстратом служит ацетил – КоА, а донором карбоксильной группы является двуокись углерода (СО2).
Ацетил
- КоА карбоксилаза
СН3 – С = О + СО2 НООС – СН2 – С = О
SКоА SКоА
ацетил - КоА малонил – КоА
Второй фермент – 2 – карбоксилтрансфераза. Здесь субстратом выступает пропионил- КоА, а донором карбоксильной группы является оксалоацетат.
2
- карбоксилтрансфераза
СН3 – СН2 – С = О + НООС - СН – С = О
SКоА СООН
пропионил - КоА оксалоацетат
НООС - СН – С = О + СН3 – С = О
СН3 SКоА СООН
метилмалонил – КоА пируват
Далее происходит последовательная конденсация малонил – и метилмалонил – КоА с образованием лактонного кольца полиенов и затем его замыкание при участии восстановленной формы НАДФ (НАДФ ∙ Н) и при участии фермента поликетидсинтетазы.
Установлено, что этот энзимный комплекс представляет собой матрицу, на которой происходит реакция циклизация – фермент отделяется.
Во вторую фазу ферментации, когда начинается активный синтез антибиотика, в курльтуральной жидкости наблюдается повышенная активность ферментов пентозофосфатного пути.
Синтез начинается с образования ароматического фрагмента (пара – аминоацетофенон), к которому гликозидно присоединяется поликетидная цепь. Когда цепь достигает необходимой длины, она замыкается в кольцо и на заключительном этапе происходит присоединение аминосахара (микозамин).
Синтез пара-аминоацетофенона идет по пути синтеза ароматических аминокислот (шикиматный путь) через шикимовую кислоту.
При синтезе гептаенов активными являются оба пути утилизации глюкозы, и гликолитической, и пентозофосфатный. Исходной реакцией, которая лежит в основе синтеза ароматического кетона, является взаимодействие между фосфоенолпируватом
(гликолитической) и эритрозо – 4 – фосфатом (пентозофосфатный) с образованием 3 – дезокси – Д – арабинозо – гептулозо – 7 – фосфата (ДАГФ). Через ряд последовательных реакций из него образуется Д-шикимовая кислота и далее хоризмовая кислота, которая является исходным продуктом для синтеза ароматических аминокислот и п-аминобензойной кислоты, которая является предшественником в синтезе п-аминоацетофенона.
Детальный синтез аминосахаров не установлен. Но исходным соединением является глюкоза. Присоединение аминосахара осуществляется через нуклеозидно – дифосфатные производные. [11]