Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
ПИДМ3-4.doc
Скачиваний:
18
Добавлен:
15.11.2019
Размер:
2.95 Mб
Скачать

шкафов имеется также отверстие для вентиляции, которое при стерилизации закрывают. Стерилизаторы и шкафы с электрическим обогревом снабжены тер­морегулятором, обеспечивающим автоматическое поддержание необходимой тем­пературы.

Подготовка посуды к стерилизации. Посуда перед стерилизацией должна быть тщательно вымыта и завернута в бумагу для сохранения стерильности после прогревания. Посуду развертывают непосредственно перед употреблением. В верх­ние концы пипеток вставляют ватные тампоны. Торчащие из пипеток волокна ваты сжигают в пламени горелки. Пипетки заворачивают в длинные полоски бумаги шириной 4 — 5 см. Обмотку начинают с оттянутого конца и постепен­ным движением бумаги по спирали заканчивают у конца с ватным тампоном. Завернутые пипетки для предохранения бумаги от загрязнения и разрывов перед стерилизацией упаковывают по несколько штук вместе или помещают в спе­циальные металлические или картонные пеналы. Чашки Петри обычно завора­чивают в пакеты по 2 —4 штуки, шпатели — по отдельности, но затем, как и пипетки, их объединяют в общий сверток. Колбы, пробирки и трубки Бурри закрывают ватными пробками. На пробки можно надеть бумажные колпачки, предохраняющие горлышко от пыли.

Стерилизация. Посуду, подготовленную для стерилизации, загружают в сте­рилизатор (или сушильный шкаф) не слишком плотно, чтобы обеспечить циркуляцию воздуха и равномерный надежный прогрев стерилизуемого ма­териала. Стерилизатор (сушильный шкаф) во время работы должен быть плотно закрыт. При отсутствии терморегулятора необходимо строго следить за темпера­турой, так как при ее понижении не осуществится стерилизация, а при нагреве выше 180 °С бумага и пробки начинают обугливаться. По окончании стерилиза­ции шкаф не открывают до тех пор, пока температура в нем не упадет до 80 °С, поскольку при резком охлаждении иногда нарушается стерильность материа­ла, а сильно нагретое стекло может растрескаться. Лучше всего выгружать по­суду, когда температура в стерилизаторе сравняется с комнатной.

Посуду можно стерилизовать и в автоклаве. Режим стерилизации в этом случае существенно зависит от объема сосудов и толщины стекла (см. табл. 4.2). Для автоклавирования посуду готовят, как и для сухожаровой стерилизации. Следует иметь в виду, что в автоклаве посуда увлажняется.

4.3. Стерилизация инструментов и приборов

Мелкие металлические инструменты: петли, иглы, пинцеты, ножницы, шпатели — стерилизуют прокаливанием в пламени (т.е. нагреванием докрас­на) непосредственно перед использованием. На пламени кратковременно об­жигают предметные и покровные стекла, стеклянные шпатели и палочки, фарфоровые ступки и пестики, горлышки колб, пробирок, бутылок, а также ватные пробки при пересевах культур и разливах сред. В пламени погибают и вегетативные клетки, и споры микроорганизмов.

Таблица 4.4

Способы стерилизации питательных сред, посуды и других лабораторных материалов

Стерилизуемый материал

Метод стерилизации

Режим стерилизации

Примечание

Питательные среды с почвен­ной вытяжкой; картофельные и некоторые другие натураль­ные среды

Автоклавирование

1,5—2,0 ати; 30 мин

В колбах, пробир­ках, бутылях и т.д., закрытых ватными пробками

Жидкие и агаризованные сре­ды, не содержащие Сахаров и других веществ, разлагающих­ся при 120 °С

То же

1,0 ати; 20 мин

То же

Жидкие и агаризованные сре­ды с сахарами и другими сое­динениями, не выдержи­вающими нагревания при 120 °С

»

0,5 ати; 15 — 30 мин

»

Среды или компоненты сред, не выдерживающие нагре­вания выше 100 °С

Дробная стерилизация

Текучий пар; Зраза по 30 — 40 мин через сутки

»

Среды или компоненты сред, не выдерживающие нагрева­ния (белки, некоторые вита­мины и аминокислоты)

Фильтрование через бакте­риальные филь­тры

Вазелиновое масло, глицерин, тальк

Горячий воздух

160 °С; 2ч или 170°С; 1 ч

Слой вещества в сосуде не должен превышать 1,5 см

Чашки Петри, пипетки, шпатели

То же

160-170 °С; 2ч

Завернуты в бумагу (отверстия пипеток закрыты ватными тампонами)

Колбы, пробирки, химиче­ские стаканы, флаконы, стеклянные центрифужные пробирки, трубки Бурри

»

160-170 °С; 2ч

Закрыты ватными пробками

Шприцы

Горячий воздух

160 °С; 1 ч

Разобраны и завер­нуты в бумагу или ткань

Автоклавирование

1 ати; 15 — 20 мин

Разобраны и завер­нуты

Мембранные фильтры

Автоклавирование

1 ати; 15 — 20 мин

В сосуде с дистиллированной водой

Кипячение

30 мин

То же

Стерилизуемый материал

Метод стерилизации

Режим стерилизации

Примечание

фильтры Зейтца

Автоклавирование

1 — 1,5 ати; 20 — 30 мин

Цилиндр держателя закрыт ватной проб­кой, в отводной трубке ватный там­пон

Горячий воздух

160 °С; 1 ч

Верхняя часть завер­нута в бумагу

Свечи Шамберлана и Беркефельда

Автоклавирование

0,5—1 ати; 20—30 мин

Можно вместе с дер­жателем

Горячий воздух

160-170 °С; 2ч

Закрыты ватными пробками, завернуты в бумагу

Стеклянные фильтры с держателем или отдельно

Автоклавирование

1 ати; 30 мин

Закрыты ватными пробками, завернуты в пергамент и алю­миниевую фольгу

Стеклянные фильтры без резиновых пробок

Горячий воздух

1 ати; 30 мин

Завернуты в бумагу

Центрифужные пробирки, изготовленные из термо­лабильных пластмасс

Газовая стерилизация

Зависит от применяемого биоцида

Ультрафиолетовые лучи

Время экспо­зиции устанав­ливают экспе­риментально

Пробирки после облучения хранят в стерильной посуде