Тема 2. Приготовление временных тотальных микропрепаратов и изучение биологических объектов под микроскопом и бинокуляром

Оборудование:

• микроскоп биологический рабочий, микроскоп биологический стереоскопический, предметные и покровные стекла, препаровальные иглы, пинцет, скальпель, фильтровальная бумага, пипетка, склянка с водой, 8% и более концентрированный растворы Na Cl, вазелиновое масло

• распечатки «Оптические приборы, используемые в морфолого-анатомических исследованиях», «Правила работы с микроскопом»

• свежие материалы: листья мниума, мякоть плода арбуза или помидора, споры плауна, плесневые грибы

• Справочник по ботанической микротехнике

Работа 1. Приготовление временного препарата мелких объектов.

Изучение морфологии спор плауна (Lycopodium sp.)

1. Привести микроскоп в рабочее положение. Настроить освещение.

2. На предметное стекло поодаль друг от друга нанести каплю воды и каплю вазелинового масла (просветляющая жидкость). Кончиком препаровальной иглы перенести в каждую каплю немного спор. Наложить на каждую каплю отдельное покровное стекло.

3. Рассмотреть споры в капле воды. Передвигая препарат, на слабом увеличении найти споры, плавающие в воде поодиночке. Сменить слабое увеличение на сильное и настроить четкость изображения.

4. Выяснить объемную форму спор, изменяя глубину резкости вращением микровинта в одну и другую сторону (но не более, чем вполоборота). Для улучшения четкости изображения попробовать изменять величину диафрагмы. Попытаться повернуть рассматриваемую спору, для чего не отрывая глаз от окуляра, очень осторожно прикоснуться кончиком препаровальной иглы к покровному стеклу. Рассмотреть объемную форму спор, когда они будут переворачиваться с боку на бок. Зарисовать характерную форму спор плауна - тетраэдр с округлым основанием.

5. Изучить характер поверхности споры, работая микровинтом и диафрагмой. Зарисовать образуемый выступами сетчатый рисунок основания тетраэдра. Найти и зарисовать трехлучевую щель в месте смыкания трех боковых граней споры.

6. Изучить содержимое споры в просветляющей жидкости. Зарисовать зернистую цитоплазму с запасными веществами.

Работа 2. Приготовление временного тотального препарата.

Изучение формы клеток листа мниума (Mnium sp.).

1. Нанести на предметное стекло каплю воды. Оторвать пинцетом лист мха от стебля, поместить его в воду. Накрыть объект покровным стеклом, опуская его сначала одним краем до соприкосновения с каплей воды.

2. Вращая макровинт и глядя сбоку, опустить объектив слабого увеличения (х8) почти до препарата. Потом, глядя в окуляр, поднять макровинтом объектив до появления резкого изображения. Рассмотреть препарат при слабом увеличении. Найти кайму листа и поставить ее в центр поля зрения.

3. Вращая револьвер, сменить объектив слабого увеличения на объектив сильного увеличения (х40). Добиться резкого изображения, пользуясь сначала макровинтом, а потом микровинтом. Рассмотреть клетки каймы при сильном увеличении. Сдвинуть препарат и рассмотреть другие клетки листа.

4. Зарисовать узкие прозенхимные клетки каймы и изодиаметрические паренхимные клетки средней части листа. Отметить их местоположение на схематическом рисунке листа мниума.

Работа 3. Изучение биологических объектов под микроскопом и бинокуляром

1. Рассмотреть мицелий и спорангиеносцы пласневого гриба под бинокуляром.

2. Приготовить тотальный микропрепарат плесневого гриба и рассмотреть его под микроскопом.

3. Рассмотреть под бинокуляром и под микроскопом мякоть помидора или арбуза.