Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Эталон ответа к билету манипуляции.doc
Скачиваний:
7
Добавлен:
19.09.2019
Размер:
608.26 Кб
Скачать

Эталон ответа к билету № 2 «Микробиология с основами эпидемиологии и методами микробиологических исследований»

  1. Подберите компоненты для окраски по Циль-Нильсену.

  2. Сделайте микробиологический препарат из мокроты до этапа окрашивания.

  3. Объясните принцип данного метода окраски и микроскопирования.

«Приготовление препаратов из мокроты»

  1. Материальное оснащение:

  1. - флакон с биоматериалом (мокрота)

  2. - стерильные чашки Петри

  3. - металлическая игла или пинцет

  4. - предметные стекла

  5. - лоток

  6. - стерильный физ.раствор

  7. - бикс с песком и спиртом

  8. - компоненты:

  9. карболовый фуксин Циля

  10. 5 % серная кислота (H2SO4)

  11. метиленовый синий

  1. Алгоритм действия:

  1. - мокроту вылить в стерильную чашку Петри

  2. - металлической иглой или пинцетом выбрать два-три гнойных комочка мокроты

  3. - трехкратно отмыть в стерильном физ.растворе

  4. - один из комочков нанести на предметное стекло, сделать мазок размером 0,2 на 0,2 см

  5. в диаметре

  6. - металлическую иглу или пинцет погрузить в дез.раствор

  7. - мазок высушить на воздухе, затем зафиксировать

  8. -покрыть фильтровальной бумагой, налить фуксин Циля

  9. -мазок подогреть в пламени горелки до трехкратного появления пара (если краска

  10. высохнет после охлаждения, добавить новую порцию)

  11. -снять бумажку, после охлаждения промыть препарат водой

  12. - погрузить препарат два – три раза в 5% раствор серной кислоты

  13. - промыть водой

  14. - покрасить водно - спиртовым раствором метиленовой синей (3-5 мин)

  15. - тщательно промыть водой, высушить, микроскопировать с иммерсионной системой:

  16. кислотоустойчивые бактерии окрашиваются в красный цвет, остальные компоненты

  17. мокроты – синие

  18. Если при изготовлении препарата из мокроты пользуются бактериальной петлей, то ее

  19. погружают несколько раз в бюкс с песком и спиртом, а затем прожигают в пламени

  20. спиртовки

  1. Этот метод для окраски кислотоустойчивых бактерий туберкулеза. Явление

  1. кислотоустойчивости объясняется наличием в оболочке микробных клеток липидов,

  2. воска и оксикислот. Для увеличения степени проницаемости бактериальной стенки

  3. препарат окрашивают карболовым фуксином Циля, и прогревают. Окрашенные палочки

  4. обесцвечиваются в 5% серной кислоте.

«Основы биохимии и методы клинико-биохимических исследований»

  1. Определите экстинкцию опытной и стандартной проб глюкозы на STAT FAX (в режиме абсорбции).

  2. Рассчитайте концентрацию глюкозы в опытной пробе (концентрация глюкозы в стандартной пробе = 10 ммоль/л).

  3. Оцените результаты исследования, применяя терминологию.

Измерение на STAT FAX в режиме абсорбции (экстинкции)

  1. Включить прибор в сеть, нажать на тумблер, дать прогреться в течение 10 минут

  2. Нажать клавишу «абс» = «1»

  3. После появления надписи «выбрать фильтр» нажать одну из клавиш (от1 до 6), обозначающую нужный фильтр и нажать клавишу «ввод»

    № фильтра

    Длина волны, в нм.

    1

    340

    2

    405

    3

    450

    4

    505

    5

    545

    6

    600

  4. После появления надписи «выбр. диф. фильтр» нажать клавишу «нет» = 0

  5. После появления надписи «дифф. режим выкл.» нажать клавишу «ввод»

  6. После появления надписи «измерен. бланка» вставить в измерительную камеру пробирку-кювету «холостая проба» = «бланк». На дисплее появится результат абсорбции (экстинкции), достать пробирку–кювету «бланк» из измерительной камеры и поставить её в штатив или в термостат прибора

  7. После появления на дисплее надписи «измерение пробы» вставить в измерительную камеру пробирку-кювету «стандартная проба», на дисплее появляется результат абсорбции (экстинкции) стандартной пробы, записать результат в тетрадь, достать пробирку –кювету с «стандартная проба» из измерительной камеры, поставить её в штатив или в термостат прибора

  8. После повторного появления на дисплее надписи «измерение пробы» вставить в измерительную камеру пробирку-кювету «опытная проба», на дисплее появляется результат абсорбции (экстинкции) опытной пробы, записать результат в тетрадь, достать пробирку –кювету «опытная проба» из измерительной камеры, поставить её в штатив или в термостат прибора

  9. Нажать на клавишу «сброс» дважды, что означает выход из режима.

  10. Нажать на тумблер, выключить прибор, вынуть вилку из розетки.

  11. Рассчитать концентрацию определяемого аналита по формуле:

Сопыта = Еопытастандарта х Сстандарта