Микробиологическая диагностика заболеваний, вызываемых протеями
Возбудители__________________________________________________________________________________
Исследуемый материал: ________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________
Питательные среды для культивирования протея:___________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________
Характер роста ________________________________________________________________________________
Биохимические свойства: _______________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________
ДЕМОНСТРАЦИИ
Препараты, применяемые для диагностики, профилактики и лечения: агглютинирующие ОВ-коли и дизентерийные сыворотки, поливалентный дизентерийный бактериофаг, коли-протейный фаг, бифидумбактерин, колибактерин, лактобактерин, бификол, антибиотики, химиотерапевтические препараты.
УСЛОВНО-ПАТОГЕННЫЕ ЭНТЕРОБАКТЕРИИ
Классификация ( виды) |
Морфологические, культуральные и антигенные свойства |
Роль в патологии человека |
Особенности лабораторной диагностики |
Род Morganella вид M.morganii |
Прямые палочки (0,6-0,7 х 1,0-1,7 мкм), Гр-, перитрихи. |
Выделяются из крови, мочевыводящих путей, ран. Вызывают хронические и рецидивирующие урогенитальные инфекции. |
Бактериологический метод с обязательной антибиотикограммой. |
Род Citrobacter виды: C. freundii, C. amalonaticus, C. diversus, C. intermedius (всего более 10 видов) |
Прямые палочки (1,0х2,0-6,0 мкм), Гр-,перитрихи, расположение одиночное или парами, аспорогенны, капсул не образуют. По антигенной структуре близки к сальмонеллам (О-Аг, H-Аг,Vi-Аг). |
Основные факторы вирулентности: пили, поверхностные белки - адгезины, эндотоксин. Вызывают поражение желче- и мочевыводящих путей, отиты, остеомиелиты. Наблюдают бактериемии, эндокардиты, поражение дыхательных путей. C. diversus- один из возбудителей менингита и абсцессов ЦНС. Устойчивы ко многим антибиотикам. |
Бактериологический. |
Род Edwardsiella виды: E. hoshinae, E. ictaluri, E. tarda- типовой вид. |
Прямые палочки (1х2-3 мкм), Гр-,перитрихи. Идентифицировано 18 сероваров. |
Выделяют от больных с диареей. |
Бактериологический. |
Род Enterobacter виды: E.cloaceae E.sakazakii E.agglomerans E.gergoviae E.aerogenes |
Прямые Гр- палочки (0,5-1,0х1,0-3,0 мкм), располагаются одиночно, парами, короткими цепочками, перитрихи. |
Вызывают кишечные, респираторные, урогенитальные, гнойно-воспалительные заболевания, иногда септицемию и менингит. Отличаются множественной устойчивостью к антибиотикам. |
Бактериологический. |
Род Hafnia вид H.alvei-типовой и единственный вид. |
Прямые Гр- палочки (1,0х2,0-5,0 мкм). Перитрихи. Капсул не образуют. По О-Аг выделяют 29 серогрупп, по Н-Аг – 49 сероваров. Растут на простых ПС при t=220-370С. На средах Эндо, Левина дают бесцветные колонии (напоминают колонии шигелл). |
Выделяют при кишечных инфекциях, уроинфекциях, пневмонии, сепсисе. |
Бактериологический. Следует дифференцировать от шигелл и сальмонелл. |
Род Providencia виды P.alcallifaciens- типовой вид, P. heimbachae, P. rettgeri, P. rustigianii, P. stuartii. |
Прямые палочки (0,6-0,8 х 1,5-2,5 мкм), Гр-. Перитрихи. Спор не образуют. Растут на среде с цианистым калием. По структуре О- и Н-Аг выделяют 150 сероваров. |
Вызывают урогенитальные инфекции, диареи, гнойные инфекции ран, бактериемии. Высокоустойчивы к антибиотикам. |
Бактериологический. Дифференцируют главным образом от представителей родов Proteus и Morganellа. |
Род Serratia виды: S.entomophila, S. ficaria, S. fonticola, S. grimesii, S. marcescens- типовой вид, и др. (всего 11 видов). |
Прямые палочки (0,5-0,8 х 0,9 -2,0 мкм), Гр-. Перитрихи. Спор не образуют. Некоторые штаммы образуют капсулу. На ПС образуют розово-красный пигмент продигиозин. Культура издает ароматный запах, напоминающий запах карамели. По О- Аг выделяют более 15с\в, по Н-Аг- около 20 с\в. |
Факторы патогенности - фимбрии (подобные у клебсиелл и протеев), гемолизины, сидерофоры, протеазы, термолобильный шигоподобный цитотоксин. Вызывают бактериемию у стационарных пациентов и наркоманов. S. marcescens вызывает до 10% госпитальных бактериемий и пневмоний, 5% инфекций мочевыводящих путей, хирургических ран и гнойничковых поражений кожи. Способны к горизонтальной передаче (через руки медперсонала). Наиболее часто серрации проникают в организм через постоянные катетеры, инкубационные устройства, препараты для внутривенных инфузий. |
Бактериологический |
ЗАНЯТИЕ № 19
ТЕМА: САЛЬМОНЕЛЛЫ. ИЕРСИНИИ. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА БРЮШНОГО ТИФА, САЛЬМОНЕЛЛЕЗА, КИШЕЧНОГО ИЕРСИНИОЗА.
ПЕРЕЧЕНЬ КОНТРОЛЬНЫХ ВОПРОСОВ
1. Сальмонеллы. Таксономия. Биологические особенности сальмонелл. Антигенная структура и принципы серологической классификации сальмонелл по Кауффману-Уайту.
2. Брюшной тиф и паратифы: источник и механизм передачи инфекции, общая характеристика болезней. Взаимодействие возбудителей брюшного тифа и паратифов с организмом человека.
3. Методы лабораторной диагностики брюшного тифа и паратифов на различных стадиях заболевания. Бактериологическая диагностика брюшного тифа. Лабораторная диагностика бактерионосительства. Серологическая диагностика брюшного тифа и паратифов. РА, РНГА в серодиагностике сальмонеллезных инфекций и бактерионосительства, их постановка, учет, оценка результатов. Специфическая профилактика и терапия брюшного тифа и паратифов.
4. Возбудители сальмонеллезов. Внутрибольничный антропонозный сальмонеллез. Факторы патогенности и множественная устойчивость к антибиотикам и антисептикам возбудителей. Методы лабораторной диагностики сальмонеллезных инфекций. Патогенез, иммунитет, диагностика, профилактика.
5. Иерсинии: классификация рода и роль в патологии человека.
6. Yersinia enterocolitica: биохимические свойства, серологические свойства, факторы вирулентности. Кишечный иерсиниоз: источники и пути передачи инфекции, общая характеристика болезни, взаимодействие Yersinia enterocolitica с организмом человека, микробиологическая диагностика. Понятие о псевдотуберкулезном иерсиниозе человека.
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА
Таксономия рода Salmonella
Род Salmonella включает два вида: 1) S. enterica, в пределах которого выделяют шесть подвидов: S. enterica подвид enterica; S. enterica подвид salamae; S. enterica подвид arizonae; S. enterica подвид diarizonae; S. enterica подвид houtenae и S. enterica подвид indica; 2) S. bongori.
В медицинской микробиологии используется классификация сальмонелл по антигенной структуре (схема Кауффмана - Уайта).
Сокращенная схема Кауффмана – Уайта
Серогруппа |
Серотип |
О-антиген |
Н-антиген |
|
1-я фаза |
2-я фаза |
|||
А |
S.Paratyphi A |
1,2,12 |
a |
[1,5] |
B |
S.Paratyphi B |
1,4,[5],12 |
b |
1,2 |
S.Typhimurium |
1,4,[5],12 |
i |
1,2 |
|
S.Stanley |
1,4,[5],12,27 |
d |
1,2 |
|
S.Heidelberg |
1,4,[5],12 |
r |
1,2 |
|
S.Derby |
1,4,[5],12 |
f,g |
[1,2] |
|
S.Abortusequi |
4,12 |
- |
e,n,x |
|
S.Abortusovis |
4,12 |
c |
1,6 |
|
S.Brandenburg |
4,[5],12 |
l,v |
e,n,z15 |
|
S.Stanleyville |
1,4,[5],12,27 |
z4, z23 |
[1,2] |
|
C |
S.Paratyphi C |
6,7,[Vi] |
c |
1,5 |
S.Choleraesuis |
6,7 |
c |
1,5 |
|
S.Thompson |
6,7,14 |
k |
1,5 |
|
S.Virchow |
6,7,14 |
r |
1,2 |
|
S.Oranienburg |
6,7,14 |
m, t |
[ z57 ] |
|
S.Potsdam |
6,7,14 |
l,v |
e,n,z15 |
|
S.Tennessee |
6,7,14 |
z29 |
[1,2,7] |
|
S.Isangi |
6,7,14 |
d |
1,5 |
|
S.Infantis |
6,7,14 |
r |
1,5 |
|
S.Newport |
6,8,20 |
e,h |
z,2:[z67] |
|
S.Bovismorbificans |
6,8,20 |
r,[i] |
1,5 |
|
D
|
S.Typhi |
9,12[Vi] |
d |
- |
S.Enteritidis |
1,9,12 |
g,m |
- |
|
S.Dublin |
1,9,12[Vi] |
g,p |
- |
|
S.Rostock |
1,9,12 |
g,p,u |
- |
|
S.Moscow |
9,12 |
g,q |
- |
|
S.Sendai |
1,9,12 |
a |
1,5 |
|
S.II |
1,9,12 |
l,w |
e,n,x |
|
S.Eastbourne |
1,9,12 |
e,h |
1,5 |
|
S.Panama |
1,9,12 |
l,v |
1,5 |
|
S.Gallinarum |
1,9,12 |
- |
- |
|
E |
S.London |
3,10[15] |
l,v |
1,6 |
S.Anatum |
3,10[ 15 ] [ 15,34 ] |
e,h |
1,6 |
|
S.Lexington |
3,10[ 15 ] [ 15,34 ] |
z10 |
1,5 |
|
S.Weltevreden |
3,10[ 15 ] |
r |
z6 |
|
S.Meleagridis |
3,10[ 15 ] [ 15,34 ] |
e,h |
l,w |
|
S.Give |
3,10[ 15 ] [ 15,34 ] |
[d],l,v |
1,7 |
|
S.Amager |
3,10[ 15 ] |
y |
1,2 |
|
S.Muenster |
3,10[ 15 ] [ 15,34 |
e,h |
1,5 |
|
S .Nyborg |
3,10[ 15 ] |
e, h |
1,7 |
|
S.Senftenberg |
1,3,19 |
g,[ s ],t |
- |
|
Выпишите групповые антигены для сальмонелл первых 5 серогрупп:
А _________, В ____________, С ____________, D ___________, Е ___________ .
ТИФО-ПАРАТИФОЗНЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ
Возбудители:
брюшного тифа ____________________ паратифа А __________________ паратифа В __________________
ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА БРЮШНОГО ТИФА И ПАРАТИФОВ
Выбор исследуемого материала в зависимости от этапа заболевания
Срок от начала заболевания |
Стадия патогенеза |
Исследуемый материал |
Методы диагностики |
1. |
|
|
|
2. |
|
|
|
3. |
|
|
|
4. |
|
|
|
Бактериологический метод
Учет характера роста на среде Рапопорт
S.Typhi |
S.Paratyphi A |
S.Paratyphi B |
Если на среде Рапопорт выросла чистая культура, учитывают биохимические свойства на среде Клиглера. Если культура смешаная, проводят откол лактозонегативных колоний со среды Эндо на агар Клиглера с учетом биохимических свойств микробов |
|
|
|
Серотипирование выделенной культуры
Название реакции ______________________________ Исследуемый материал __________________________
Диагностический препарат ______________________________________________________________________
Сыворотка |
ABCDE |
Редк.групп |
0-2 |
0-4 |
0-9 |
0-3 |
Н-d |
H-g |
Результат РА (+/-) |
|
|
|
|
|
|
|
|
Вывод: _______________________________________________________________________________________
Определение спектра антибиотикорезистентности
Серодиагностика тифо-паратифозных заболеваний
Название реакции _____________________________ Исследуемый материал ___________________________
Диагностический препарат ______________________________________________________________________
Диагностикумы |
Разведения сыворотки больного |
|||||||
1/50 |
1/100 |
1/200 |
1/400 |
1/800 |
1/1600 |
КД |
КС |
|
АВСDЕ |
|
|
|
|
|
|
|
|
0-2 |
|
|
|
|
|
|
|
|
0-9 |
|
|
|
|
|
|
|
|
Н-a |
|
|
|
|
|
|
|
|
Н-d |
|
|
|
|
|
|
|
|
Диагностический титр равен 1/200
Вывод: ______________________________________________________________________________________
Серодиагностика брюшно-тифозного микробоносительства
Название реакции ___________________________ Исследуемый материал _____________________________
Диагностический препарат ______________________________________________________________________
Разведения |
1/10 |
1/20 |
1/40 |
1/80 |
1/160 |
КД |
КС |
Результат |
|
|
|
|
|
|
|
Диагностический титр равен 1/80
Вывод: ______________________________________________________________________________________
ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА КИШЕЧНОГО ИЕРСИНИОЗА
Возбудитель__________________________________________________________________________________
Исследуемый материал: ________________________________________________________________________
Бактериологический метод
Питательные среды и условия культивирования:____________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________
Идентификация иерсиний по биохимическим свойствам:
Вид |
Субстрат |
|||
Рамноза |
Сахароза |
Сорбит |
Мочевина |
|
Y.enterocolitica |
|
|
|
|
Y.pseudotuberculosis |
|
|
|
|
Серотипирование (диагностический препарат, реакции):____________________________________________
_____________________________________________________________________________________________
Серодиагностика иерсиниоза:
Исследуемый материал ________________________________________________________________________
Диагностический препарат ______________________________________________________________________
Разведения сыворотки |
1/50 |
1/100 |
1/200 |
1/400 |
1/800 |
1/1600 |
1/3200 |
КД |
КС |
Y.enterocolitica О3 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Y.enterocolitica О9 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Y.pseudotuberculosis |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Диагностический титр 1/200
Вывод: ______________________________________________________________________________________
ДЕМОНСТРАЦИИ
Сальмонеллезные групповые адсорбированные поливалентные и монорецепторные О- и Н-агглютинирующие сыворотки, сальмонеллезные О- и Н- монодиагностикумы, поливалентный брюшнотифозный бактериофаг, спиртовая брюшнотифозная вакцина с Vi-антигеном, антибиотики.
ЗАНЯТИЕ № 20
ТЕМА: ВОЗБУДИТЕЛИ ОСОБО-ОПАСНЫХ ИНФЕКЦИЙ
ПЕРЕЧЕНЬ КОНТРОЛЬНЫХ ВОПРОСОВ
1. Особо опасные инфекции. Таксономия и биологические свойства возбудителей. Особенности микробиологической диагностики. Противоэпидемический режим в лабораториях.
2. Патогенные вибрионы. Таксономия. Антигенная структура. Принципы серологической классификации. Биовары. Ферментовары. Факторы патогенности. Токсины холерного вибриона, свойства. Эпидемиология, патогенез и клинические проявления холеры.
3. Методы лабораторной диагностики холеры: бактериологическая диагностика (классическое исследование); экспресс-диагностика больных и контактировавших; методы массового обследования на носительство и обнаружение холерного вибриона во внешней среде. Серологические методы диагностики холеры. Иммунитет. Общая и специфическая профилактика и лечение холеры.
4. Парагемолитический вибрион. Роль нехолерных вибрионов в этиологии пищевых токсикоинфекций.
5. Бруцеллы. Таксономия. Виды бруцелл и признаки их дифференциации. Патогенность бруцелл для человека и животных. Факторы патогенности. Локализация возбудителя в организме. Методы лабораторной диагностики: а)бактериологический; б)биологический; в)серологический; г)аллергодиагностика. Особенности иммунитета при бруцеллезе. Специфическая профилактика и терапия. Антибиотикотерапия.
6. Франциселлы. Классификация, свойства, роль в патологии человека. Возбудитель туляремии. Биологические особенности. Географические варианты. Эпидемиология, клиника и методы лабораторной диагностики туляремии. Иммунитет, специфическая профилактика и терапия заболевания.
7. Возбудитель чумы: классификация, морфологические свойства, культуральные свойства, биохимические свойства. Возбудитель чумы: серологические свойства, факторы патогенности, резистентность во внешней среде.
8. Чума: источник инфекции и механизм (пути) передачи, общая характеристика болезни, взаимодействие возбудителя с организмом человека. Микробиологическая диагностика чумы.
9. Возбудитель сибирской язвы. Таксономия. Биологические свойства. Отличие от антракоидов. Факторы патогенности. Сибирская язва у человека. Микробиологические методы диагностики. Реакция термопреципитации по Асколи. Иммунопрофилактика. Препараты для химиотерапии.
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА
ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ХОЛЕРЫ
Возбудитель__________________________________________________________________________________
Исследуемый материал: ________________________________________________________________________
Бактериоскопический метод
|
V.chоlerae Окраска по Граму Увеличение _____________
|
Бактериологический метод.
Питательные среды и характер роста: ___________________________________________
___________________________________________
___________________________________________
___________________________________________
Учет гликозидазной активности холерного и нехолерного вибрионов на средах Гисса (триада Хейберга)
Группа |
Ферментация |
||
Манноза |
Сахароза |
Арабиноза |
|
I (холерный вибрион) |
|
|
|
II (нехолерный вибрион) |
|
|
|
Отличие холерного вибриона от холероподобных вибрионов проводится по следующим свойствам:
1) ___________________________________________________________________________________________
2) ___________________________________________________________________________________________
3)____________________________________________________________________________________________
4)____________________________________________________________________________________________
Учет результата постановки нитрозоиндоловой пробы: ______________________________________________
_____________________________________________________________________________________________
Серовары возбудителя холеры:__________________________________________________________________
Ускоренная диагностика холеры по методу Ермольевой-Полева (заполнить таблицу):
1% пептонная вода |
1% пептонная вода + О1-сыворотка |
1% пептонная вода + крахмал + реактив Андреде |
|
|
|
Определение биовара холерного вибриона
Признак |
Биовар |
Серовар О139 |
||
Vibrio cholerae var. cholerae |
Vibrio cholerae var. eltor |
|||
Лизабельность фагами: |
холерный "С" |
+ |
- |
- |
"Эль-Тор 2" |
- |
+ |
- |
|
Агглютинация куриных эритроцитов |
- |
+ |
+/- |
|
Гемолиз бараньих эритроцитов |
- |
+ |
- |
|
Чувствительность к полимиксину |
+ |
- |
- |
|
Серологическая диагностика холеры
РА в серодиагностике холеры
Разведение сыворотки |
1/50 |
1/100 |
1/200 |
1/400 |
1/800 |
1/1600 |
1/3200 |
КД |
КС |
Результат |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Вывод: _______________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________
ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА БРУЦЕЛЛЕЗА
Возбудители__________________________________________________________________________________
Морфология___________________________________________________________________________________
Клинические формы____________________________________________________________________________
Исследуемый материал:________________________________________________________________________
|
Вакцинный штамм бруцелл Окраска по Граму Увеличение _____________
|
Бактериологический метод
Питательные среды для культивирования бруцелл:__________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________
Учет ферментативных свойств и других признаков дифференциации бруцелл на виды и биовары (заполнить таблицу):
Вид бруцелл |
Потребность в СО2 |
Рост в присутствии |
Образование Н2S |
Уреаза |
|
фуксина 1:25000 |
тионина 1:50000 |
||||
B.melitensis |
|
|
|
|
|
B.abortus |
|
|
|
|
|
B.suis |
|
|
|
|
|
Серологическая диагностика бруцеллеза (с 10-12 дня болезни).
1. Постановка пластинчатой реакции агглютинации Хаддлсона с концентрированным диагностикумом, окрашенным синькой:
Ингредиенты |
Квадраты |
|||
1-й |
2-й |
3-й |
4-й |
|
Сыворотка больного |
0,08 |
0,04 |
0,02 |
0,01 |
Диагностикум |
0,03 |
0,03 |
0,03 |
0,03 |
Результат_____________________________________________________________________________________