Реакция связывания комплемента, рск (Complement fixation test)

— серологическая реакция, пригодная для обнаружения антигенов и антител. В основе ее лежит способность комплемента, многофункционального белкового фактора сыворотки теплокровных животных, связываться комплексом антиген-антитело; несвязавшийся комплемент достаточно легко определяется по лизису бараньих эритроцитов, предварительно сенсибилизированных специфическими гемолизинами. При подборе соответствующих концентраций комплемента он будет выявляться только в том случае, когда взаимодействия антигена и антител в испытуемой (или опытной) системе не происходит. Реакция связывания комплемента проста по выполнению, но требует присутствия антигена в большой концентрации при относительно высокой химической чистоте антиген-содержащего раствора. По этой причине реакция связывания комплемента широкого применения в вирусологии не получила. На ранних этапах изучения гепатита В она использовалась как метод обнаружения поверхностного антигена вируса гепатита В и антител к нему. В реакции связывания комплемента удавалось титровать антитела к вирусу гепатита А , когда в качестве антигена бралась взвесь вирусных частиц, полученная в результате сложной многоступенчатой экстракции из печени зараженных обезьян. После появления твердофазных иммунологических тестов интерес к использованию реакции связывания комплемента был полностью утрачен.

Реакция связывания комплемента , рск, реакция Борде— Жангу

[по имени бактериологов Ж. Борде (J. Bordet) и О. Жангу (О. Gengou), 1901], высокоспецифичная и очень чувствительная серологич. реакция, основанная на свойстве комплекса антиген — антитело фиксировать свободный комплемент (алексин), применяемая при диагностике мн. бактериальных и вирусных и нек-рых протозойных и гельминтозных болезней, а также для изучения процессов, сопровождающихся изменением кол-ва антигена или антител.

РСК протекает в 2 фазы: 1) взаимодействие антител, антигена и комплемента, в результате к-рого свободный комплемент связывается образовавшимся комплексом антиген — антитело (специфич. фаза); 2) индикация реакции сенсибилизир. эритроцитами (неспецифич. фаза). В РСК используют 2 системы: специфич. бактериол., состоящую из антитела (испытуемой сыворотки), антигена и комплемента, а также неспецифич. “индикаторную”, содержащую гемолизин (гемолитич. сыворотка) и взвесь эритроцитов барана. Антиген соединяется с антителом только в присутствии комплемента. Если испытуемая сыворотка содержит антитела, гомологичные взятому антигену, то присутствующий в реагирующей смеси комплемент адсорбируется образующимся комплексом антиген — антитело и теряет способность лизировать сенсибилизированные эритроциты, т. е. без комплемента гемолизин (гемолитич. антитело) не разрушает эритроциты (реакция положительная). В тех случаях, когда между антигеном и антителами испытуемой сыворотки нет специфич. родства, комплекс не образуется и комплемент остаётся в свободном состоянии. При добавлении гемолитич. системы в этом случае несвязанный комплемент вызывает гемолиз сенсибилизированных эритроцитов (реакция отрицательная). Существуют различные варианты постановки РСК: классич. метод постановки в виде макро- и микровариантов, реакция длительного связывания комплемента (РДСК) на холоде, метод количеств. РСК по 50 %-ному гемолизу сенсибилизированных эритроцитов и др. В вет. диагност. практике чаще применяют диагностич. метод РСК в виде макроварианта, при к-ром берут каждого компонента по 0,5 или 0,25 мл в определённом рабочем титре. Комплемент титруют в бактериол. системе на сыворотках того же вида животных, кровь к-рых подлежит исследованию. Испытуемые сыворотки обычно исследуют в разведении 1:5 и 1:10 с антигеном и 1:5 без антигена (контроль). Время связывания комплемента в специфич. фазе 20 мин, время реакции гемолиза в неспецифич. фазе 20 мин при t 37—38 oС. Для диагностики ряда заболеваний применяют более чувствительный метод — РДСК. При этом первую фазу реакции проводят при t 4—6°C в течение 16—18 ч, что ведёт к усилению адсорбции комплемента малыми кол-вами антигена и антител. Затем добавляют гемолитич. систему и реакция протекает при t 37—38оC в течение 20 мин. Результаты РСК и РДСК учитывают по степени задержки гемолиза, к-рую обозначают крестами или минусом, соответствующими след. процентам гемолиза эритроцитов: + + + + от 0 до 10%; + + + от 10 до 40% ; + + от 40 до 70%; + от 70 до 90%; — от 90 до 100%. Вет. законодательством предусмотрены спец. наставления по постановке, учёту и оценке РСК и РДСК для каждой болезни отдельно.

Лит.: Лабораторные исследования в ветеринарии, М., 1971; Руководство по иммунологии, под ред. О. Е. Вязова и Ш. X. Ход-жаева, М., 1973.