2.1. Взятие крови

Кровь для посева следует брать, соблюдая правила асептики, чтобы избежать попадания микроорганизмов из внешней среды.

Посев необходимо проводить во время подъема температуры, в начале появления лихорадки.

Кровь для посева рекомендуется брать до начала специфического антибактериального химиотерапевтического лечения или, по крайней мере, через 12-24 часа после последнего введения препарата больному (в зависимости от скорости выведения применяемого препарата из организма). Следует учитывать также стадию заболевания с тем, чтобы взять кровь для посева в то время, когда предполагается бактериемия (например, при брюшном тифе в первые 10-15 дней от начала заболевания).

Для результативного бактериологического исследования необходимо сеять достаточные количества крови (не менее 10мл у взрослых и 5мл у детей) в соответствующее количество жидкой питательной среды (100 или 50 мл). Это делается для того, чтобы путем разведения крови (1:10) преодолеть естественные бактерицидные свойства крови.

Для взятия крови необходимо пользоваться стерильным шприцем. Системы для одноразового пользования или шприцы, простерилизованные в централизованной стерилизационной, освобождаются от упаковки только непосредственно перед употреблением, При отсутствии централизованной стерилизационной надо прокипятить 20-граммовый (для детей 10-граммовый) шприц и соответствующие иглы с мандренами для венопункции в течение 30-45 минут в отдельном стерилизаторе. По окончании стерилизации слить воду и остудить шприц, не открывая стерилизатора. Собрать шприц с помощью стерильного пинцета, насадить иглу и извлечь мандрен. Нельзя пользоваться шприцем со стерильного стола в перевязочной, т.к. на нем могут оказаться бактерии из воздуха. По той же причине нельзя проверять проходимость простерилизованного шприца и иглы воздухом.

Кровь на посев берут у постели больного или в перевязочной стерильным шприцем или системой для взятия крови одноразового пользования с соблюдением всех правил асептики и засевают тут же у пастели больного. Взятие крови и ее посев осуществляют, как правило, два человека. Пока один человек обрабатывает кожу больного над пунктируемой веной, пунктирует вену и берет кровь, другой над пламенем спиртовки открывает пробку флакона, подставляет флакон со средой под струю крови из шприца или системы, обжигает горлышко и пробку флакона и закрывает его.

Кожу над пунктируемой веной обрабатывают 70% спиртом, затем 5% настойкой йода, затем снова спиртом. При наличии у больного постоянного подключенного катетера или капельницы в вене можно пользоваться ими для получения крови. Некоторому количеству крови дают свободно стечь в пробирку (эту кровь можно использовать для биохимических анализов), затем набирают кровь в шприц для посева. Врач – бактериолог должен следить за соблюдением правил асептики на всех этапах взятия и посева крови. Если возникает подозрение, что в какой-то момент в посев крови могли попасть микроорганизмы из внешней среды (с кожи больного, с рук персонала, из воздуха и т.п.) и нет возможности повторить посев, следует сделать специальную пометку на соответствующем флаконе, чтобы соответственно оценить результаты посева.

Для получения «толстой капли» одну каплю из шприца или системы помещают на предметное стекло и подсушивают ее на воздухе, фиксируют метиловым спиртом или смесью Никифорова (спирт с эфиром поровну) и затем окрашивают спиртово-водным раствором метиленового синего (96% этилового спирта – 10мл, метиленового синего – 1г, дистиллированной воды - 100мл).