- •Учебно-методическое пособие для выполнения лабораторно-практических работ по дисциплине: «Ветеринарная вирусология».
- •Раздел I. Общая вирусология
- •Ведение
- •Раздел I. Общая вирусология
- •Тема 1. Правила работы с вируссодержащими материалами. Устройство вирусологической лаборатории
- •Методика проведения занятия и методические указания по теме
- •1.1 Техника безопасности и правила работы с вируссодержащим материалом
- •1.2 Требования к рабочим помещениям и обеспечение условий работы
- •1.3 Хранение вирусов и других материалов, учет и этикетировка их в лаборатории.
- •1.4 Основные методы консервации вирусов
- •Тема 2. Получение, транспортировка и подготовка патологического материала для вирусологических исследований.
- •Методика проведения занятия и методические указания по теме
- •2.1 Получение и обработка патологического материала
- •2.2 Получение патологоанатомического материала
- •2.3 Получение проб для гистологического исследования.
- •2.4 Транспортировка и хранение проб.
- •Тема 3. Индикация вирусов в патологическом материале по обнаружению вирионов и вирусных телец-включений
- •Методика проведения занятия и методические указания по теме
- •Тема 4. Использование лабораторных животных в диагностических исследованиях. Цели использования лабораторных животных в вирусологии
- •Методика проведения занятия и методические указания по теме
- •Тема 5. Использование лабораторных животных в диагностических исследованиях. Биопроба
- •Методика проведения занятия и методические указания по теме
- •Тема 6. Использование лабораторных животных в диагностических исследованиях. Вскрытие лабораторных животных
- •Методика проведения занятия и методические указания по теме
- •Тема 7. Использование в вирусологии куриных эмбрионов. Культивирование вирусов на куриных эмбрионах
- •Тема 8. Использование в вирусологии куриных эмбрионов. Заражение куриных эмбрионов
- •8.1 Методы экспериментального заражения куриных эмбрионов.
- •Тема 9. Использование в вирусологии куриных эмбрионов. Вскрытие куриного эмбриона и получение вируссодержащего материала. Индикация вирусов
- •9.2 Определение гемагглютинирующих свойств вирусов.
- •Тема 10. Использование в вирусологии культур клеток. Типы культур клеток
- •Тема 11. Использование в вирусологии культур клеток. Культивирование вирусов в культуре клеток
- •Тема 12. Использование в вирусологии культур клеток. Заражение культур клеток. Индикация вируса
- •Методика проведения занятия и методические указания по теме.
- •Тема 13. Титрование антител к вирусам в реакции торможения (задержки) гемагглютинации (ртга, рзга)
- •Методика проведения занятия и методические указания по теме.
- •Тема 14. Использование в вирусологии реакции непрямой гемагглютинации
- •Методика проведения занятия и методические указания по теме.
- •Тема 15. Использование в вирусологии реакции диффузной преципитации в агаровом геле
- •Методика проведения занятия и методические указания по теме.
- •15.2 Основные задачи рдп:
- •Тема 16. Титрование вирусов
- •Методика проведения занятия и методические указания по теме.
- •Библиографический список
- •Оглавление:
- •Раздел I. Общая вирусология
1.3 Хранение вирусов и других материалов, учет и этикетировка их в лаборатории.
В настоящее время чрезвычайно актуален вопрос биологической безопасности работы диагностической лаборатории, который в соответствии с Федеральным законом «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения», санитарно-эпидемиологическими правилами «Безопасность работы с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности)» СП 1.3.1285-03 и «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности и гельминтами» СП 1.2.731-99, Международным ветеринарным кодексом (2002г.), Ветеринарным законодательством РФ (М.,2000г.) с учётом требований санитарно-эпидемиологических правил СП 1.2.1318-03 «Порядок выдачи санитарно-эпидемиологического заключения о возможности проведения работ с возбудителями инфекционных заболеваний человека I-IV групп патогенности (опасности), генно-инженерно-модифицированными микроорганизмами, ядами биологического происхождения и гельминтами», СП 1.2.036-95 «Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности» регламентируется специальной инструкцией, введенной в действие в 2004 г.
Для всех вирусологических лабораторий установлен единый порядок обращения с вирусами, предусматривающий правила их хранения, регистрации, передачи внутри лаборатории и за ее пределы. Работники лаборатории должны руководствоваться действующей инструкцией о порядке хранения, обращения, отпуска, а также вывоза и ввоза в Российскую Федерацию из зарубежных стран культур микроорганизмов, токсинов и ядов животного и растительного происхождения.
В каждой лаборатории приказом директора определяют лицо, ответственное за учет культур, выделяемых в лаборатории или поступающих извне (для производственных целей), а также за соблюдение порядка их хранения и уничтожения. Штаммы вирусов регистрируют в специальном журнале, где отмечают их расходование, автоклавирование и пр. Отдельные вируссодержащие материалы в пробирках, флаконах и других сосудах непременно снабжают этикетками с указанием наименования вируса, штамма, даты получения, номера пассажа, объема и других сведений. Данные этикеток должны полностью соответствовать записям в журналах штаммов лаборатории. Этикетки должны быть из плотной пергаментной бумаги, которая прикрепляется эластичной тонкой резинкой или с помощью хорошего клея. Удобными являются этикетки из лейкопластыря с основой из материала. Может быть использована также прозрачная клейкая лента, с помощью которой прикрепляют этикетки к стеклу (этикетки в этом случае оформляют на небольшом кусочке бумаги). Заполняют их не расплывающейся в воде и других растворителях пастой. В большинстве случаев целесообразно дублировать надписи на этикетках графитным стержнем – практически неудаляемая надпись, кроме случаев механического стирания ее.
Штаммы вирусов хранят в холодильнике под замком с пломбой или печатью. Выделенные изоляты, как и штаммы стандартных вирусов, необходимые для сравнения и серологических исследований, следует хранить в условиях, обеспечивающих им максимально длительную жизнеспособность. При рН среды 7,0 – 7,4 и внесении в нее определенных добавок вирус можно хранить при 4°С в течение нескольких недель, а некоторые виды – в течение года без потери инфекционных свойств.