М26-Инфекция._Патогенность_и_вирулентность_бактерий
.pdfГБОУ ВПО «Уральский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии
Методические указания №26 к практическим занятиям для студентов
ООП специальности 060101.65 Лечебное дело Дисциплина С2.Б.10 Микробиология, вирусология
1.Тема: Инфекция. Роль микроорганизма в инфекционном процессе.
Патогенность и вирулентность. Экспериментальный (биологический) метод исследования. Бактериоскопическое и бактериологическое исследование трупного материала.
2.Цели занятия: Изучить со студентами роль микроорганизмов в инфекционном процессе, понятия патогенности и вирулентности, сущность биологического метода исследования, основы бактериоскопического и бактериологического исследования трупного материала.
3.Задачи занятия:
3.1.Изучить роль микроорганизмов в инфекционном процессе.
3.2.Изучить факторы, определяющих патогенность микроорганизмов.
3.3.Изучить основы биологического метода исследований.
3.4.Выполнить самостоятельную работу.
Шифр |
Содержание |
знать |
уметь |
владеть |
|
компетенции |
|
|
|
ОК-1 |
Способность и |
Роль бактерий в |
Различать |
Микробиологическим |
|
готовность |
инфекционном |
инфекционные и |
понятийным |
|
анализировать |
процессе |
неинфекционные |
аппаратам |
|
социально-значимые |
|
заболевания |
|
|
проблемы и процессы, |
|
|
|
|
использовать на |
|
|
|
|
практике методы |
|
|
|
|
гуманитарных, |
|
|
|
|
естественнонаучных, |
|
|
|
|
медико-биологических |
|
|
|
|
и клинических наук в |
|
|
|
|
различных видах |
|
|
|
|
профессиональной и |
|
|
|
|
социальной |
|
|
|
|
деятельности |
|
|
|
ПК-7 |
Способность и |
Факторы |
Характеризовать |
Техникой посева |
|
готовность к |
патогенности |
факторы |
бактериальных |
|
использованию |
микроорганизмов |
патогенности |
культур на |
|
современных методов |
|
бактерий |
питательные среды |
|
оценки и коррекции |
|
|
|
|
естественных |
|
|
|
|
природных, |
|
|
|
|
социальных и других |
|
|
|
2
|
условий жизни, к |
|
|
|
|
осуществлению |
|
|
|
|
санитарно- |
|
|
|
|
противоэпидемических |
|
|
|
|
(профилактических) |
|
|
|
|
мероприятий по |
|
|
|
|
предупреждению |
|
|
|
|
инфекционных и |
|
|
|
|
массовых |
|
|
|
|
неинфекционных |
|
|
|
|
заболеваний, а также к |
|
|
|
|
осуществлению |
|
|
|
|
противоэпидемической |
|
|
|
|
защиты населения |
|
|
|
ПК-14 |
Способность и |
Тропизм |
Использовать |
Методикой |
|
готовность проводить |
возбудителей |
лабораторную |
бактериоскопического |
|
противоэпидемические |
инфекционных |
посуду для отбора |
и |
|
мероприятия, защиту |
заболеваний в |
проб и |
бактериологического |
|
населения в очагах |
организме хозяина |
проведения |
исследования |
|
особо опасных |
|
исследований |
трупного материала |
|
инфекций, при |
|
|
|
|
ухудшении |
|
|
|
|
радиационной |
|
|
|
|
обстановки и |
|
|
|
|
стихийных бедствиях |
|
|
|
ПК-20 |
Способность и |
Основные |
Объяснять |
Микробиологическим |
|
готовность назначать |
принципы отбора |
механизмы и пути |
понятийным |
|
больным адекватное |
проб от больного |
передачи |
аппаратом |
|
(терапевтическое и |
|
возбудителей |
|
|
хирургическое) |
|
инфекционных |
|
|
лечение в |
|
заболеваний |
|
|
соответствии с |
|
|
|
|
выставленным |
|
|
|
|
диагнозом, |
|
|
|
|
осуществлять |
|
|
|
|
алгоритм выбора |
|
|
|
|
медикаментозной и |
|
|
|
|
немедикаментозной |
|
|
|
|
терапии больным с |
|
|
|
|
инфекционными и |
|
|
|
|
неинфекционными |
|
|
|
|
заболеваниями, к |
|
|
|
|
ведению |
|
|
|
|
физиологической |
|
|
|
|
беременности, приему |
|
|
|
|
родов |
|
|
|
4.Продолжительность занятия в академических часах: 3 часа.
5.Контрольные вопросы по теме:
1.Понятие об инфекции, инфекционном процессе, инфекционной болезни.
2.Условия возникновения инфекционной болезни, ее особенности.
3
3.Роль микроорганизма в инфекционном процессе. Патогенность и вирулентность. Единицы измерения вирулентности.
4.Свойства микроорганизма, характеризующие его вирулентность.
5.Генетика патогенности бактерий.
6.Токсины бактерий. Свойства экзо- и эндотоксинов.
7.Понятие об инфицирующей и летальной дозе.
8.Входные ворота инфекции.
9.Пути распространения микробов по организму. Типы генерализованных инфекционных процессов.
10.Динамика инфекционного процесса.
11.Формы проявления инфекции.
12. Экспериментальный (биологический) метод исследования. Вскрытие трупов зараженных животных. Бактериоскопическое и бактериологическое исследование трупного материала.
6. Задания и методические указания к их выполнению.
На занятии студенту необходимо выполнить:
6.1.Ответить на вопросы преподавателя.
6.2.Принять участие в обсуждении изучаемых вопросов.
6.3.Выполнить самостоятельную работу.
Теоретическая справка Инфекцией (или инфекционным процессом) называется процесс
взаимодействия восприимчивого макроорганизма и микроорганизма в определенных условиях окружающей среды, крайним проявление которого является инфекционная болезнь.
Под инфекционной болезнью понимают заболевание, возникшее в результате воздействия патогенного микроорганизма на макроорганизм.
Основными отличиями инфекционных заболеваний от других патологических состояний являются:
1.Наличие строго определенного инфекционного агента (возбудителя заболевания).
2.Заразительность, то есть способность к распространению среди восприимчивых особей.
3.Цикличность течения (наличие периодов заболевания).
4.Формирование механизмов иммунного ответа и последующей невосприимчивости.
Таким образом, для возникновения инфекционного процесса необходимы следующие условия:
1.Наличие возбудителя.
2.Наличие восприимчивого макроорганизма.
3.Определенные условия внешней среды, обеспечивающие проникновение возбудителя в восприимчивый макроорганизм.
4.Входные ворота инфекции.
5.Инфицирующая доза.
4
Отличительным признаком микроорганизмов – возбудителей различных инфекций является патогенность. Патогенность – это закрепленная генетически способность микроорганизма вызывать развитие инфекционного процесса. В зависимости от выраженности этого свойства различают:
-патогенные микроорганизмы – возбудители инфекционных болезней человека, животных и растений;
-условно-патогенные микроорганизмы – микроорганизмы, вызывающие инфекционный процесс при определенных условиях: когда они попадают во внутреннюю среду организма в больших количествах; когда они попадают в организм со сниженной резистентностью; когда они попадают в нетипичные места локализации в организме;
-сапрофиты – это непатогенные микроорганизмы, питающиеся мертвыми тканями растений и животных.
Внутри вида отдельные штаммы микроорганизмов могут сильно отличаться по степени патогенности. Степень патогенности (или мера патогенности) называется вирулентностью. Вирулентность может быть выражена как в большей, так и в меньшей степени. Вирулентность какого-либо штамма патогенного микроорганизма определяется несколькими факторами:
-адгезивностью;
-инвазивностью;
-токсигенностью.
Адгезивность – это способностью бактерий прикрепляться к поверхности субстрата – клеткам организма. Адгезивную функцию выполняют пили и белки клеточной стенки бактерий. Способствовать адгезии может и полисахаридная капсула бактерий.
Инвазивность – способность к преодолению барьеров и проникновению в клетки и ткани макроорганизма. Инвазивность обусловлена наличием ферментов агрессии (коагулазы, фибринолизина, коллагеназы, нейраминидазы, гиалуронидазы, протеазы и т. д.).
Токсигенность – это способность продуцировать, накапливать и выделять различные токсины. Микробные токсины делят на 2 типа:
-экзотоксины секретируются бактериями в окружающую среду в процессе жизнедеятельности бактерий;
-эндотоксины являются структурными элементами клеточной стенки грамотрицательных бактерий (липополисахарид – ЛПС) и выделяются только при ее разрушении.
Основные свойства экзотоксинов:
1. Экзотоксины выделяются живыми клетками как грамотрицательных, так и грамположительных бактерий.
2. По химической природе экзотоксины – полипептиды.
3. Экзотоксины термолабильны. Быстро разрушаются при температуре 60°С. 4. Экзотоксины высокотоксичны – вызывают гибель лабораторных животных
при введении нескольких микрограммов.
5. Экзотоксины не вызывают лихорадку в организме хозяина.
6. Действие экзотоксинов высокоспецифично, то есть для каждого токсина характерно поражение определенных структур (мишеней) и картина болезни связана
5
с их поражением. Примеры: экзотоксины ответственны за развитие симптомов дифтерии (возбудитель Corynebacterium diphtheriae), столбняка (Clostridium tetani), ботулизма (Clostridium botulinum).
7.Экзотоксины высокоиммуногенны, то есть являются сильными антигенами
истимулируют образование антител к токсину (антитоксина), которые нейтрализуют токсин.
8.Экзотоксины переходят в анатоксины при обработке слабым (0,3-0,4%) раствором формалина при температуре 37-40°С в течение 3-4 недель.
Основные характеристики эндотоксинов:
1.Эндотоксины являются компонентами клеточной стенки грамотрицательных бактерий и высвобождаются при их разрушении.
2.По химической природе эндотоксины – это липополисахаридные комплексы (ЛПС).
3.Эндотоксины термостабильны. Выдерживают кипячение.
4.Эндотоксины является слабыми антигенами и не стимулируют образование антитоксина.
5.Эндотоксины обладают пирогенностью, то есть способны вызывать в организме хозяина лихорадку и стимулировать процессы воспаления.
6.Эндотоксины обладают низкой специфичностью.
7.Эндотоксины менее токсичны в сравнении с экзотоксинами. Однако большие количества эндотоксина могут стать причиной необратимого шока, наблюдаемого при бактериемии, вызванной грамотрицательными микроорганизмами.
8.Эндотоксины не переходит в анатоксин.
Единицы измерения вирулентности.
Вирулентность измеряется в летальных дозах, экспериментально рассчитанных на лабораторных животных:
-DCL (dosis certae letalis) – абсолютно летальная доза – минимальное количество возбудителя, вызывающее гибель 100% взятых в опыт лабораторных животных;
-DLm (Dosis letalis minima) – минимальная летальная доза – минимальное количество возбудителя, вызывающее гибель 95% взятых в опыт лабораторных животных;
-LD50 – минимальное количество возбудителя, вызывающее гибель 50% взятых в опыт лабораторных животных.
Экспериментальный (биологический) метод исследования.
Инфекционный процесс может быть искусственно воспроизведен путем заражения лабораторных животных: кроликов, морских свинок, белых крыс, мышей
идр.
Цели экспериментального заражения животных:
-изучение патогенности и вирулентности микроорганизмов;
-выделение чистой культуры возбудителя из различных материалов;
-воспроизведение экспериментальной инфекции;
-испытание лечебного действия терапевтических препаратов и т. д.
6
Перед началом опыта животных отбирают, взвешивают и маркируют. Заражают животных накожно, внутрикожно, подкожно, внутримышечно, внутривенно, перорально, интраназально, интрацеребрально и внутрибрюшинно.
Бактериологическое исследование трупов животных.
Для обнаружения микроорганизма, вызвавшего гибель животного, определения его локализации в организме и выделения чистой культуры возбудителя производят вскрытие зараженного животного сразу после гибели, соблюдая правила асептики. Данные вскрытия трупа протоколируют. Для приготовления мазков-отпечатков вырезают из печени, селезенки, почек или других органов небольшие кусочки ткани, берут их пинцетом и прикасаются срезом к поверхности предметного стекла. Мазки-отпечатки фиксируют и окрашивают по Граму. При микроскопии отмечают присутствие микроорганизмов в различных органах и тканях. При необходимости делают посевы из этих органов на питательные среды.
После обсуждения теоретических вопросов преподаватель объясняет порядок проведения самостоятельной работы.
Самостоятельная работа:
1.Приготовление мазка-отпечатка из органа павшего зараженного животного. Для приготовления мазка свежим срезом органа павшего животного делают отпечаток на предметном стекле. Срез производят с соблюдением правил асептики. Приготовленный мазок-отпечаток фиксируют в пламени спиртовки, окрашивают по Граму, микроскопируют. Препарат зарисовывают в рабочей тетради.
2.Посев на чашку с МПА культуры из органа павшего животного. Срезом исследуемого органа производят отпечаток на МПА в чашке Петри, после чего нанесенный материал распределяют по поверхности среды с помощью шпателя или бактериологической петли.
7.Оценивание знаний, умений, навыков по теме занятия:
Ответы на вопросы и активность на занятии оцениваются по 5-балльной системе.
8. Литература для подготовки:
8.1.Основная:
1.Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: учебник для студентов медицинских вузов. Под ред. А.А. Воробьева. Учебники и учеб. пособия для высшей школы. Издательство: Медицинское информационное агентство, 2012. – 702 с.
2.Медицинская микробиология, вирусология и иммунология. В 2-х т. Том 1 : учеб. по дисциплине «Микробиология, вирусология и иммунология» для студентов учреждений высш. проф. образования, обучающихся по специальностям 060101.65 «Лечеб. дело», 060103.65 «Педиатрия», 060104.65 «Медико-профилакт. дело» / под ред. В.В. Зверева, М.Н. Бойченко. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2011. – 448 с.: ил.
3.Медицинская микробиология, вирусология и иммунология. В 2-х т. Том 2 : учеб. по дисциплине «Микробиология, вирусология и иммунология» для студентов учреждений высш. проф. образования, обучающихся по специальностям 060101.65
7
«Лечеб. дело», 060103.65 «Педиатрия», 060104.65 «Медико-профилакт. дело» / под ред. В.В. Зверева, М.Н. Бойченко. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2011. – 480 с.: ил.
8.2.Дополнительная:
1.Коротяев А.И. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология: Учебник для студентов мед. вузов / А.И. Коротяев, С.А. Бабичев. - 5-е изд., испр. и
доп. – СПб.: СпецЛит, 2012. – 759 с.: ил.
2.Медицинская микробиология: учебник. 4-е изд. Поздеев О.К. / Под ред. В.И. Покровского. – 2010. – 768 с.
Методические указания переработаны и дополнены профессором Литусовым Н.В., аспирантом кафедры Зорниковым Д.Л.
Обсуждены на заседании кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии.