- •Министерство сельского хозяйства россиЙской федерации
- •Москва 2015
- •1. Тема дипломной работы «Оценка качества раствора кератина, полученного из различного кератинсодержащего сырья»
- •5. Перечень материала, прилагаемого к дипломной работе: цифровой и графический материал по экспериментальной части работы. Таблицы - ; графики - ; и т.П.
- •Реферат дипломной работы студентки 4 курса очного отделения факультета тэс Светличной в.Н. На тему: «Оценка качества раствора кератина, полученного из различного кератинсодержащего сырья»
- •Содержание
- •1 Обзор литературы
- •1.1 Кератинсодержащие отходы и их краткая характеристика
- •1.3 Характеристика способов получения кератина
- •2. Экспериментальная часть
- •2.1. Объекты исследования
- •2.2 Методы исследования
- •2.2.1 Определение содержания влаги
- •2.2.2. Определение содержания жировых веществ растворов кератина
- •2.2.3 Определение содержания минеральных веществ (золы)
- •2.2.4. Определение рН потенциометрическим методом
- •2.2.5 Количественный учёт микроорганизмов микробиологическим методом
- •2.5 Результаты собственных исследований и их обсуждение
- •2.4 Экономическая эффективность переработки …………
- •Список используемой литературы:
2.2.4. Определение рН потенциометрическим методом
При потенциометрическом определении рН измеряли электродвижущую силу, возникающую на элетородах при погружении их в исследуемый раствор и зависящую от концентарции в нем ионов водорода.
В работе использовали рН-метр фирмы “Piccolo” со стеклянным электродом. Он обеспечивает быстрое измерение с точность, соответствующей 0,01-0,03 единицы рН. Область оптимального использования рН-метра-в пределах рН от 1 до 9; при рН от 9 до 11 получается приближенные результаты, при рН выше 11- ошибочные, что зависит от концентрации ионов натрия. В растворах 50-70%-ного спирта в интервале рН 4-8 точность измерений такая же, как и в водных растворах, но других значениях рН и более высоких концентрациях спирта стеклянный электрод не применяют [9].
Анализ проводили в трех параллельных пробах.
Перед началом работы на рН-метре проводили корректировку показаний прибора по буферным растворам с известной величиной рН. Буферные растворы готовили из специальных стандарт-титров, для получения которых используют реактивы, имеющие квалификацию “для рН-метрии”. Температура анилизируемого раствора устанавливали с помощью автомотического термокомпенсатора. Промытый дистиллированной водой электрод сушили фильтровальной бумагой, а затем помещали в сосуд с испытуемым раствором и измеряли его рН. По окончанию работы электроды, тщательно промыли и оставили до последующего использования в дистиллированной воде.
2.2.5 Количественный учёт микроорганизмов микробиологическим методом
Для количественного определения микроорганизмов использовали чашечный метод. Образцы растворов кератина . Из усредненной пробы на технических весах взвешивали 1 мл,. материала, который вносили в стерильную пробирку и заливали 9 мл. стерильного физиологического раствора, тщательно взбалтывали и термостатировали 2 ч. при температуре 37° С. Таким образом получали первое разведение 1:10. Далее стерильными пипетками готовили серийные разведения: из 1-ой пробирки брали 1 мл. экстрагированного раствора и вносили во 2-ю пробирку с 9 мл. физ. раствора (1:100), из 2-ой - 1мл. в 3-ю (1:1000) и.д. до разведения со степенью предполагаемого обсеменения микробами.
Для определения общего количества бактерий использовали среду МПА. 1 мл. необходимого разведения вносили в пустую стерильную чашку Петри и заливали (10-15 мл.) стерильным расплавленным и охлаждённым до температуры 43-45° С агаром. Осторожно перемешивая чашки круговыми движениями, засеянный материал равномерно распределяли в среде. После застывания агара чашки дном вверх помещали в термостат при температуре 37 °С. После термостатирования в течение 24-72 ч. подсчитывали (пользуясь лупой) выросшие на чашке колонии. Для учёта обсеменения плесневыми грибами и дрожжевыми формами микроорганизмов использовали среду Сабуро. 1 мл. исследуемого экстракта или его разведения вносили в стерильную чашку Петри с уже астывшей средой. Тщательно распределяли засеянный материал по поверхности агара. Термостатировали дном вверх при температуре 26-28° С в течение 3-7 суток.
При наличии на чашке небольшого числа колоний (не более 100) их подсчитывали со стороны дна, отмечая учтённые колонии чернилами. При более высоком количестве колоний (200-300) для удобства подсчёта дно чашки делили восковым карандашом на секторы и подсчитывали число колоний в каждом секторе. Результаты, полученные при подсчёте колоний в отдельных секторах, суммировали, находили среднее арифметическое и, умножая полученное число на разведение, определяли количество микробов в 1 мл. или в 1 г. Для учёта обсеменения плесневыми грибами и дрожжевыми формами микроорганизмов использовали среду Сабуро. 1 мл. исследуемого экстракта или его разведения вносили в стерильную чашку Петри с уже остывшей средой. Тщательно распределяли засеянный материал по поверхности агара. Термостатировали дном вверх при температуре 26-28° С в течение 3-7 суток.
При наличии на чашке небольшого числа колоний (не более 100) их подсчитывали со стороны дна, отмечая учтённые колонии чернилами. При более высоком количестве колоний (200-300) для удобства подсчёта дно чашки делили восковым карандашом на секторы и подсчитывали число колоний в каждом секторе. Результаты, полученные при подсчёте колоний в отдельных секторах, суммировали, находили среднее арифметическое и, умножая полученное число на разведение, определяли количество микробов в 1 мл. или в 1 г.