- •3513 Практикум з мікробіології, вірусології та імунології
- •Частина 1 Загальна бактеріологія та імунологія
- •Передмова
- •Cписок скорочень
- •Правила роботи у бактеріологічній лабораторії. Морфологія бактерій. Світлова мікроскопія з використанням імерсійного об’єктива. Прості методи фарбування препаратів
- •Дeмонстрація
- •1. Бактеріологічний посуд: бактеріологічна петля (рис. 1д), чашка Петрі (рис. 1а), пробірки, градуйовані піпетки, колби
- •2. Предметні та покривні скельця (рис. 1б, в). Скельця з лунками. Спиртівка. Пісочний годинник, олівець “для скла”
- •3. Мікроскоп. Імерсійне масло
- •Правила роботи з імерсійною системою
- •Можливі помилки під час роботи з мікроскопом
- •Догляд за мікроскопом
- •Пояснення до самостійної роботи з теми:
- •Загальна будова навчального світлового мікроскопа
- •2. Будова бактеріальної клітини. Складні методи фарбування. Фарбування за методом Грама. Мікроскопічний метод діагностики збудників інфекційних захворювань
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «будова бактеріальної клітини. Складні методи фарбування. Фарбування за методом Грама. Мікроскопічний метод діагностики інфекційних захворювань»
- •Спори та методи їх виявлення
- •Капсула
- •Класифікація бактерій за кількістю і розташуванням джгутиків
- •Методи виявлення джгутиків у бактерій
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •Пояснення до самостійної роботи з теми
- •«Особливості ультраструктури спірохет,
- •Рикетсій, хламідій, мікоплазм.
- •Сучасні методи мікроскопічного дослідження»
- •Звивисті форми бактерій
- •Загальна схема будови Treponema pallidum
- •4. Основи асептики та антисептики. Дезінфекція. Стерилізація
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •3. Автоклав
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «основи асептики та антисептики. Дезінфекція. Стерилізація»
- •Види та завдання дезінфекції
- •Практична робота студентів
- •Пояснення до самостійної роботи з теми
- •«Фізіологія бактерій.
- •Перший етап бактеріологіного методу діагностики.
- •Біологічний метод діагностики»
- •Метаболізм
- •Конструктивний (анаболізм) Енергетичний (катаболізм)
- •6. Ріст та розмноження мікроорганізмів.
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «ріст та розмноження мікроорганізмів.
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «ііі – IV етап виділення чистої культури аеробних бактерій. Ферменти бактерій. Антибіотики»
- •8. Облігатні Анаероби. Виділення чистої культури
- •3. Метод Фортнера
- •4. Ріст Cl. Perfingens на середовищі Вільсон-Блера
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «облігатні Анаероби. Виділення чистої культури облігатних анаеробних бактерій»
- •V етап Врахування та аналіз результатів дослідження. Відповідь
- •9. Бактеріофаги. Генетика бактерій
- •Теоретичні питання
- •Практична робота студентів
- •Демонстрація
- •5 . Дослід із виявлення множинної стійкості мікроорганізмів до антибіотиків
- •2 Мл культури реципієнта (f-)
- •1 Мл бульйонної культури реципієнта
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «бактеріофаги та їх практичне використання. Генетика бактерій»
- •Бактеріофаги та їх практичне використання. Генетика бактерій
- •Перевага методу плр – полімеразної ланцюгової реакції для діагностики інфекційних захворювань
- •10. Нормальна мікрофлора тіла людини. Дисбактеріоз
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •3.1. Замалюйте мікроскопічні препарати.
- •3.2. Бакпечатка для вивчення мікрофлори тіла людини
- •3.3. Біологічні препарати (еубіотики): колібактерин, лактобактерин, біфідумбактерин, біфікол.
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «нормальна мікрофлора тіла людини. Дисбактеріоз. Вчення про інфекцію»
- •Дисбактеріоз
- •11. Вчення про інфекцію
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •1. Виявлення гемолітичної властивості бактерій
- •2. Виявлення плазмокоагулазної активності бактерій
- •4. Виявлення лецитовітелазної активності
- •Демонстрація
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «нормальна мікрофлора тіла людини. Дисбактеріоз. Вчення про інфекцію»
- •12. Імунітет. Фактори і механізми вродженого захисту організму
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •2. Фагоцитоз у новонародженої і дорослої людини
- •3. Визначення бактерицидної активності сироватки крові
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «імунітет. Фактори і механізми вродженого захисту організму»
- •Особливості імунної системи
- •13. Антигени
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація Діагностичні препарати: Діагностикуми і антигени
- •Алергени для шкірноалергічних проб
- •Лікувально-профілактичні препарати
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «антигени»
- •Класифікація антигенів
- •Антигени – сторонні макромолекули
- •Інфекційні
- •14. Адаптивна гуморальна імунна відповідь. Імуноглобуліни (антитіла). Серологічні реакції флокуляції, нейтралізації
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •1. Імунні сироватки (антитоксичні) та імуноглобуліни
- •2. Титрування антитоксичної сироватки методом флокуляції
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «гуморальна імунна відповідь. Імуноглобуліни (антитіла). Серологічні реакції флокуляції, нейтралізації»
- •Набутий (адаптивний) імунітет
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •1. Реакція непрямої гемаглютинації (рнга)
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «серологічні реакції: реакція зв’язування комплементу (рзк), реакції з використанням мічених антитіл та антигенів – іфа, ріф, ріа»
- •16. Адаптивна клітинна імунна відповідь. Імунологічна толерантність. Регуляція імунної відповіді
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «адаптивна клітинна імунна відповідь. Імунологічна толерантність. Регуляція імунної відповіді»
- •Механізм цитотоксичної дії т-кілера на клітину-мішень
- •17. Оцінка імунного статусу людини. Принципи функціонування імунної системи
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «оцінка імунного статусу людини. Принципи функціонування імунної системи»
- •18. Протиінфекційний імунітет
- •Теоретичне питання
- •Практична робота
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «протиінфекційний імунітет»
- •Антигенспецифічна імунна відповідь
- •Зв’зок типу імунної відповіді з локалізацією інфекційних агентів
- •19. Патологія імунної системи
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «патологія імунної системи»
- •Типи алергічних реакцій
- •20. Специфічна профілактика та терапія інфекційних захворювань. Лікувальні, профілактичні та діагностичні імунологічні препарати
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Діагностичні препарати
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «специфічна профілактика і терапія інфекційних захворювань. Лікувальні, профілактичні та діагностичні імунологічні препарати»
- •Список рекомендованої літератури
- •Практикум з мікробіології, вірусології та імунології
- •Частина 1 Загальна бактеріологія та імунологія
Пояснення до самостійної роботи з теми «антигени»
Антигени |
Сторонні макромолекули, які при введенні в організм зумовлюють формування імунної відповіді, за умови їх розпізнавання специфічними рецепторами лімфоцитів |
Структура молекули антигену |
Молекула антигену складається із епітопів, які знаходяться на поверхні молекули і зумовлюють її специфічність, та носія, який часто представлений молекулою білка. Епітопи часто представлені різними хімічними групами: NH2, COOH, NH-OOH і інші |
Умови антигенності |
Чужорідність, макромолекулярність (молекулярна маса не менше 20-30 КД), колоїдний стан, здатність до катаболічного процесингу макрофагами й іншими клітинами |
Класифікація антигенів |
Екзогенні, ендогенні, білкові, полісахаридні, глікопротеїнові, нуклеопротеїнові, вірусні, антигени клітин макроорганізму, повноцінні, неповноцінні (гаптени), аутоантигени, алергени |
Повноцінні антигени |
Складаються з двох частин: носія та детермінантної групи (епітопів). Дані антигени можуть стимулювати утворення специфічних антитіл або клітин ефеторів та взаємодіяти з ними |
Неповноцінні антигени (гаптени) |
Можуть лише взаємодіяти із специфічними до них антитілами або клітинами рецепторами; містять лише епітопи |
Аутоантигени |
Антигени власного організму, до яких імунна система має толерантність. Змінені під впливом різноманітних факторів (внутрішньоклітинних організмів, вірусів, температури та інші) клітини і тканини організму та клітини забар’єрних органів (щитовидна залоза, клітини мозку, статевих залоз та інші) |
Алергени |
Різновиди антигенів, які зумовлюють алергічну реакцію |
Антигени бактерій |
Н (джгутикові), О (соматичні), К (капсулярні) антигени |
До антигенів належать |
Різні структури бактерій, вірусів, найпростіших, токсинів, донорська кров, препарати із сироватки крові, антигени груп крові, органи і тканини, які трансплантуються в організм реципієнта |
Основні властивості антигенів
|
Імуногенність – здатність індукувати імунну відповідь. Імуногенність залежить від молекулярної ваги та структури молекули антигену, а також від генотипу реагуючого організму. Антигенність – здатність реагувати (з'єднуватися) зі специфічними антитілами та імунокомпетентиними лімфоцитами. Специфічність – особливості антигенів, які дозволяють імунній системі відрізняти один антиген від іншого |
Видо- та типоспецифічні антигени |
Антигени, які належать тільки до одного виду чи типу мікроорганізмів та тканин |
Гаптени |
Неповноцінні антигени, які не мають імуногенності, але мають специфічність і можуть реагувати з відповідними антитілами і клітинами. Гаптенами є барвники, хіміопрепарати, антибіотики та інші |
CD-антигени |
Мембранні антигени, маркери клітин кістково-мозкового походження. Існує понад 100 різних CD-антигенів. Дані антигени дозволяють відрізнити один вид клітин від інших |
Головний комплекс гістосумісності (ГКГС) |
Генетична ділянка в шостій хромосомі людини, яка займає 2 сантиморгана. Містить три групи генів І, II і III класів. Похідними цих генів є система НLА (від англ. Нumаn Leucocyte antigene). Гени І і II класів характеризуються надзвичайно високою поліморфністю (мають до декількох десятків алельних форм). Це зумовлює їх функцію у тканинній несумісності. Антигени головного комплексу гістосумісності (МНС — Major histocompatibility complex) у людини називаються HLA (англ. Human leukocyte antigens). Антигени МНС I класу знаходяться на всіх ядровмісних клітинах, а МНС II класу — тільки на антигенпрезентуючих клітинах. Антигени МНС I та II класів беруть участь в презентації клітинам антигенного пептиду Т-лімфоцитам, відповідно ІІ - СД4, І - СД8. Частина генів II класу детермінує рівень імунної відповіді |
Презентація антигену |
Це демонстрація антигену Т-лімфоцитам, яка здійснюється в результаті таких процесів: поглинання антигену антигенпрезентуючою клітиною (АПК); розчеплення його всередині клітини ферментами; зв’язування утворених антигених пептидів із молекулами МНС («завантаження» антигенних пептидів у жолобки власних молекул МНС I, ІІ класів); виходу їх на поверхню клітини для контакту з Т-лімфоцитами. Антиген розпізнається рецепторами В- та Т-лімфоцитів |
Практичне використання антигенів мікроорганізмів |
Базується на їх специфічності. Для серологічної діагностики інфекційних захворювань, при яких за допомогою антигенів або діагностикумів виявляють специфічні антитіла в сироватці крові хворих. Деякі антигени (алергени) використовують для діагностики захворювань (туберкульоз, бруцельоз, сибірка та інші). Алергени вводяться внутрішньошкірно. З антигенів бактерій та екзотоксинів готують вакцини, які використовують з профілактичною метою |
Схема отримання анатоксину та його використання |
Анатоксин одержують шляхом знешкодження екзотоксину розчином формаліну (в суміші 0,4%) та дії температури 40 °С впродовж 4-х тижнів. Анатоксини використовують як вакцини для специфічної профілактики вищезазначених захворювань |
Суперантигени |
Антигени мікробів, які взаємодіють із МНС II класу антигенпрезентуючих клітин (АПК) та Т-клітинним рецептором (TcR) Т-лімфоцитів, поза антигензв’язувальною щілиною, тобто не в активних центрах. Суперантигени приєднуються немов збоку від молекул МНС II та TcR. Вони блокують можливу специфічну імунну відповідь та викликає поліклональну активацію лімфоцитів, викид цитокінів та загибель Т-лімфоцитів із розвитком імунодефіциту. Суперантигенами є ентеротоксини стафілококів; токсин синдрому токсичного шоку; суперантигени стрептококів, вірусу Епстайна–Барр та інші |
Рисунок 70 – Взаємодія антигену з антигенпрезентуючою клітиною