- •Вопросы и ответы
- •1. Характеристика бактериоскопического метода исследования.
- •2. Световые микроскопы. Принципы устройства простого, фазовоконтрастного, темнопольного, люминесцентного микроскопов и их применение в микробиологии. Техника иммерсионной микроскопии.
- •3. Типы микроскопических препаратов. Этапы приготовления фиксированного мазка. Простые методы окраски.
- •4. Дифференциально-диагностические методы окраски микробов. Окраска по Граму, механизм и техника окраски.
- •5. Морфология бактерий. Отличия прокариотов от эукариотов. Основные формы бактерий.
- •6. Структура и функции поверхностных образований бактериальной клетки. Капсула. Методы выявления.
- •7. Структура и функции клеточной стенки грамположительных и грамотрицательных бактерий. Формы бактерий с дефектами клеточной стенки.
- •8. Цитоппазматические структуры бактерий, функции, методы выявления. Кислотоустойчивые микробы. Метод окраски.
- •9. Покоящиеся формы микробов. Спорообразование у бактерий, стадии, методы выявления спор.
- •10. Подвижность бактерий, методы выявления подвижности.
- •11. Принципы систематики микробов. Систематическое положение микробов. Таксономические категории. Понятие и критерии вида.
- •12-16. Систематическое положение и морфология спирохет, актиномицетов, микоплазм, риккетсий, хламидий. Методы изучения.
- •17. Питание микробов. Источники углерода, азота, ростовых факторов и зольных элементов. Способы питания. Способы проникновения питательных веществ в клетку через мембрану.
- •18. Дыхательный аппарат бактерий. Пути биологического окисления. Классификация микробов по этому признаку
- •19 Способы размножения микробов. Механизм и фазы клеточного деления.
- •20. Характеристика бактериологического метода исследования
- •21. Питательные среды для аэробов и анаэробов. Требования, предъявляемые к питательным средам, классификация.
- •22. Методы выделения чистых культур аэробов.
- •23. Методы выделения чистых культур анаэробов.
- •24. Идентификация микроорганизмов морфологическая, культуральная серологическая, биологическая, генетическая.
- •26. Генетический аппарат бактерий (хромосомы, плазмиды) характеристика бактериальных транспозонов. Биологическая роль плазмид.
- •27. Виды изменчивости бактерий. Фенотипическая и генотипическая изменчивость. Понятие о популяционной изменчивости.
- •28. Мутационная изменчивость. Генетические рекомбинации. Практическое значение изменчивости микроорганизмов. Понятие о генной инженерии и биотехнилогии.
- •29. Молекулярная диагностика. Цель. Задачи. Методы.
- •30. Молекулярная гибридизация. Полимеразная цепная реакция.
- •31. Учение об инфекции. Условия возникновения инфекционного процесса. Отличительные признаки инфекционных заболеваний. Типы инфекций.
- •32. Роль микроорганизма в инфекционном процессе. Патогенность и вирулентность Факторы патогенности.
- •33. Роль макроорганизма, физической и социальной среды в инфекционном процессе.
- •34. Биологический метод исследования задачи, оценка этапы.
- •35. Химиотерапия и химиопрофилактика. Антибиотики определение классификация.
- •36. Механизм действия антибиотиков.
- •37. Побочное действие антибиотиков.
- •38. Устойчивость микроорганизмов к антибиотикам.
- •39 Методы изучения чувствительности микробов к антибиотикам.
- •40. Экология микроорганизмов. Типы экологических связей.
- •41. Характеристика нормальной микрофлоры человека и ей биологическая роль. Методы изучения. Гнотобиология. Дисбактериоз. Причины развития, принципы коррекции.
- •42 Стерилизация, дезинфекция. Определение понятий, методы проведения.
- •43. Асептика, антисептика. Определение понятий. Способы проведения.
7. Структура и функции клеточной стенки грамположительных и грамотрицательных бактерий. Формы бактерий с дефектами клеточной стенки.
Клеточная стенка (КС)- биогетерополимер сложною химического состава, покрывающий всю поверхность прокариотической клетки.
Основа клеточной стенки- пептидогликан, обеспечивающий ригидность и эластичность КС. Структура пептидогликана паралелльные полисахаридные(гликановые ) цепи состоящие из чередующихся звеньев [\'-ацетил1 лнжозамина и N-ацетилмурамовой к-ты С каждым остатком N-ацетидмурамовой к-ты ковалентно связан трипептид
Различии между Грам+ и Грам- бактериями.
Группа |
1'рамм -*-_^____________________ |
Грамм - |
Окраска по Граму |
фиолетовые |
розовые |
Толщина КС |
20-60 нм |
10-20 нм |
% содержание липидов
|
1,6% |
22,6% |
Структура пептидогликана |
Пептиды пептидогликанов связаны через пептидильный мостик из 5 , остатков глицина |
Ацетилмурамовые к-ты каждой гликановой цепи связаны через два однотипных тетрапептида |
% содержание пептидогликана |
40-90% Многослойный |
5-10% Однослойный |
Наличие тейхоевых кислот |
Имеются |
Отсутствуют |
Особеность выделения ферментов |
Ферменты выделяются непоследственно в окружающую среду |
Ферменты выделяются в периплазматическое пространство, находящееся между КС и ЦМ |
Представители |
Все болезнетворные кокки, кроме гонокка и менингококка, бациллы, иклострпдии |
Энтеробактерии, вибрионы, трепонемы |
Функции КС:
1. Придает клетке определенную форму.
2. Защищает её от воздействия окружающей среды
3. Несет на поверхности разнообразные рецепторы, к которым прикрепляются некоторые фаги, колишиныи химические соединения.
4. Через КС в клетку поступают питательные вещества и выделяются продукты обмена
5. Сдерживает высокое внутриклеточное осмотическое давление.
КС грам- бакт. представлена трехслойной внешней мембраной (пептидогликан + липополисахарид+ липопротеиды). Некоторые белки (норины), пронизывая внешнююмембрану,образуют поры, черезкоторую проходят гидрофильные в-ва с низкой молекулярной массой.
Пептидогликан- мишень действия некоторых антибиотиков (пенициллина) и ферментов (лизоцима). Пенициллин нарушает образование тетрапепдидных связей, лизоцим разрушает гликозидные связи между мурамовой к-той и ацетилглюкозамином.
При действии пенициллина на на растущую бак. культуру образуются безоболочечные формы бактерий:
1 Пртопласты- полностью лишены КС.
2.Сферопласты- частично лишены КС
И протопласты, и сферопласты подвергаются плазмолизу в изотонической среде, н в пшерюнической среде проявляютслабую метаболическую активность, ! утрачивают способность к размножению.
3.L- формы- полностью или частично лишены КС, сохраняют способность к размножению.
а) стабильные- способны к реверсии в исходный вид.
б) нестабильный-не способны к реверсии
8. Цитоппазматические структуры бактерий, функции, методы выявления. Кислотоустойчивые микробы. Метод окраски.
Жгутики. На поверхности ряда бактериальных клеток располагаются жгутики (рис. 3.5). В их состав входит белок флагелин, который по своей структуре относится к сократимым белкам типа Миозина. Жгутики прикрепляются к базальному телу, состоящему из системы нескольких дисков, вмонтированных в цитоплазматическую мембрану и КС. Количество и расположение жгутиков у разных бактерий неодинаково.
Монотрихи имеют на одном из полюсов клетки только один жгутик,
лофотрихи — пучок жгутиков,
амфитрихи - жгутики расположены на обоих полюсах клетки,
перитрихов — По всей ее поверхности.
Жгутики обладают антигенными свойствами.
Пили — тонкие полые нити белковой природы длиной 0,3-10 мкм, толщиной 10 нм, покрываю щие поверхность бактериальных клеток. В отличие от жгутиков не выполняют локомоторную функцию. По своему функциональному назначению подразделяются на несколько типов.
Пили 1 общего типаобусловливают прикрепление или адгезию бактерий к определенным клеткам организма хозяина. Их количество велико — от нескольких сотен до нескольких тысяч на одну бактериальную клетку. Адгезия является первоначальной стадией любого инфекционного процесса.
Пили 2 типа (синоним: конъюгативные, или половые, пили — sex pili) участвуют в конъюгации бактерий обеспечивающей перенос части генетического материала от донорной клетки к реци-пиентной. Они имеются только у бактерий-доноров в ограниченном количестве (1-4 на клетку).
Цитоплазматическая мембрана (ЦМ)является жизненно необходимым структурным компонентом бактериальной клетки. Она ограничивает протопласт, располагаясь непосредственно под клеточной стенкой. ЦМ в химическом отношении представляет собой липопротеин, состоящий из 15-30% липидов и 50-70% протеинов. Кроме того, в ней содержится около 2-5% углеводов и незначительное количество РНК. В состав мембранных липидов входят главным образом нейтральные липиды и фосфолипиды. У некоторых бактерий встречаются гликолипиды, а у микоплазм — стеролы.
Липидный состав мембран непостоянен в качественном и количественном отношении. У одного и того же вида бактерий он изменяется в зависимости от условий ее культивирования на питательной среде и возраста культуры. Разные виды бактерий отличаются друг от друга по липидному составу своих мембран.
Мембранные белки разделяются на структурные и функциональные. К последним относятся ферменты, участвующие в биосинтезе разных компонентов КС, который происходит на поверхности ЦМ, а также окислительно-восстановительные ферменты, пермеазы и др.
ЦМ является сложно организованной структурой, состоящей из трех слоев, которые выявляются при электронно-микроскопическом исследовании. Двойной фосфолипидный слой пронизан глобулинами, которые обеспечивают транспорт веществ в бактериальную клетку.
ЦМ выполняют жизненно важные функции, нарушение которых приводит бактериальную клетку к гибели. К ним относится прежде всего регуляция поступления в клетку метаболитов и ионов, участие
в метаболизме, репликации ДНК, а у ряда бактерий в спорообразовании и т.д.
Мезосомыявляются производными ЦМ. Они имеют неодинаковое строение у разных бактерий, располагаясь в разных частях клетки либо в виде концентрических мембран, либо пузырьков, трубочек, либо в форме петли, характерной в основном для грамотрица-тельных бактерий. Мезосомы связаны с нуклеоидом. Они участвуют в делении клетки и спорообразовании.
Цитоплазма у прокариот, так же как и у эукариот, представляет собой сложную коллоидную систему, состоящую из воды (около 75%), минеральных соединений, белков, РНК и ДНК, которые входят в состав органелл нуклеоида, рибосом, мезосом, включений.
Нуклеоид является эквивалентом ядра эукариот, хотя отличается от него по своей структуре и химическому составу. Он лишен ядерной мембраны, не содержит хромосом, не делится митозом. В составе нуклеоида отсутствуют основные белки — гистоны. Исключение составляют только некоторые бактерии. В нем содержится двунитевая молекула ДНК, а также небольшое количество РНК и белков. Молекула ДНК с молекулярной массой (2-3) х 109 представляет собой замкнутую кольцевую структуру, в которой закодирована вся наследственная информация клетки, т.е. геном клетки. По аналогии с хромосомами эукариот бактериальная ДНК часто обозначается как хромосома. При этом следует помнить, что она представлена в клетке в единственном числе, поскольку бактерии являются гаплоидными. Однако перед делением клетки число нуклеоидов удваивается, а во время деления увеличивается до 4 и более.
Наряду с нуклеоидом в цитоплазме могут находиться автономные кольцевые молекулы двунитевой ДНК с меньшей молекулярной массой, которые получили название плазмид. В них также закодирована наследственная информация. Однако она не является жизненно необходимой для бактериальной клетки.
Рибосомы у бактерий представляют собой рибонуклеопротеиновые частицы размером 20 нм, состоящие из двух субъединиц 30S и 50S. Перед началом синтеза белка происходит объединение этих субъединиц в одну — 70S. В отличие от клеток эукариотов рибосомы бактерий не объединены в эндоплазматическую сеть. Бактериальные рибосомы, являющиеся белоксинтезирующими системами клеток, могут стать «мишенью» для действия многих антибиотиков.
Включенияявляются продуктами метаболизма про- и эука-РИотических микроорганизмов, которые располагаются в их цитоплазме и используются в качестве запасных питательных веществ. К ним относятся включения гликогена, крахмала, серы, полифосфата (волютина) и др. У некоторых бактерий, например дифтерийной палочки, включения волютина имеют дифференциально-диагностическое значение. Они обладают способностью к метахромазии (окрашиваются в иной цвет, чем цвет красителя).