Лекция_3_ГИ_М_2014
.pdf
Генетическая инженерия
Методы генетической модификации растений
Перенос с помощью A. tumefaciens
Биобаллистика
Генная
пушка
Микрочастицы Образец золота ткани
ядерная трансформация
Методы генетической модификации растений:
Трансформация через протопласты растений
Сравнение разных систем трансформации растений
Система |
Преимущества |
Недостатки |
трансформации |
|
|
|
|
|
Агробактериал |
Простой метод |
Однодольные растения |
ьная |
|
практически не |
|
трансформируются |
|
|
|
|
Биобалистика |
Трансформация |
Встраивание |
|
однодольных |
дополнительных |
|
растений |
последовательностей |
|
|
вектора |
|
|
Интеграция |
|
|
многочисленных копий |
|
|
Т-ДНК |
|
|
|
Протопласты |
Нет |
Низкая эффективность |
агробактериально |
Разработана не для всех |
|
|
й контаминации |
видов растений |
|
|
Трудоемкий метод |
|
|
|
Первоначальный отбор на селективной среде
Основной механизм действия селективных генов
Селективный агент
Нетрансформированное растение (нет гена, который кодирует белок,
способный разрушить селективный агент)
Селективный агент
Трансформированное растение
Первоначальный отбор на селективной среде
Это может быть и не трансгенным растением!!!
При первичном отборе на селективной среде
Отбираются ложные трансформанты (escape) за счет:
Сомаклональной изменчивости растений Контаминации агробактериями
Сорт растений |
Юбилей |
Десница |
|
Жукова |
|
|
|
|
Кол-во полученных регенерантов, шт. |
150 |
23 |
|
|
|
Канамицин-устойчивых регенерантов, % |
19% |
29% |
|
|
|
Доля первичных трансформантов, отобранных по результатам |
6% |
10% |
молекулярно-генетического анализа (Саузерн, Вестерн), % |
|
|
|
|
|