Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

ЛАБОРАТОРНЫЙ ПРАКТИКУМ ПО МИКРОБИОЛОГИИ

.pdf
Скачиваний:
2728
Добавлен:
18.03.2015
Размер:
5.09 Mб
Скачать

А

Б

В

Рисунок 10 - Micrococcus luteus: А - схема расположения клеток в пространстве, Б – фотография полученная методом СЭМ, В - методом ФКМ

диплококки (лат. diploos - двойной) – бактерии, соединенные по две клетки;

A

Б

В

Рисунок 11 - Neisseria meningitidis: А - схема расположения клеток в пространстве, Б – фотография полученная методом СЭМ, В - окраска по Граму

тетракокки (лат. tetra — четыре) – группируются по четыре клетки;

Рисунок 12 – Тетракокки

21

стрептококки (лат. streptos - цепь) – бактерии, образующие в результате деления клеток в одной плоскости разнообразной длины цепочки.

Рисунок 13 -Streptococcus mutans: А – схема расположения клеток в пространстве, Б – фотография полученная методом СЭМ, В – окрашенный препарат

сарцины (лат. sarceo - соединяю) – шаровидные бактерии, группирующиеся по 8 клеток. Располагаются они в виде куба, с каждой стороны которого по 4 клетки. Такая форма возникает в результате деления клетки в трех взаимно перпендикулярных плоскостях.

Рисунок 14 – Sarcina lutea: А – схема расположения клеток в пространстве, Б – фотография полученная методом СЭМ, В – окраска по Граму

стафилококки (лат. staphylo - гроздь) – клетки вследствие беспорядочного деления образуют скопления, напоминающие по внешнему виду гроздья винограда.

22

А

Б

В

Рисунок 15 – Staphylococcus aureus (золотистый стафиллококк): А – схема расположения клеток в пространстве, Б – фотография полученная методом СЭМ, В – окраска по Граму

2. палочковидные, которые различаются по форме:

правильная (энтеробактерии (представители семейства

Enterobacteriaceae), псевдомонады (род Pseudomonas));

E.coli

Salmonella typhimurium Pseudomonas aeruginosa

Рисунок 16 – различные палочковидные бактерии, имеющие правильную форму

неправильная (коринебактерии (Corynebacterium)).

Рисунок 17 - Corynebacterium diphtheria: А – внешний вид клеток,

Б – фотография полученная методом ТЭМ, В – окраска по Граму

23

по размеру:

мелкие (бруцеллы (Brucella), бордетеллы (Bordetella)); средние (бактероиды (Bacteroides), кишечная палочка (E.coli); крупные (бациллы (Bacillus), клостридии (Clostridium));

по форме концов

обрубленные (бациллы); закругленные (сальмонеллы, псевдомонады); заостренные (фузобактерии); утолщенные (коринебактерии);

по характеру взаиморасположения все палочки делятся на:

расположенные одиночно; диплобактерии и диплобациллы (сцепленные попарно);

стрептобактерии и стрептобациллы (сцепленные в цепочку);

3. извитые формы - по характеру и количеству завитков они

делятся на:

вибрионы (слегка изогнутые палочки или неполные завитки);

Рисунок 18 – Вибрионы: Vibrio cholerae (А – ТЭМ, Б – окрашенный препарат, В – Vibrio fischeri (флуоресцентная микроскопия)

спириллы (один или несколько завитков); спирохеты, которые в свою очередь, делятся на:

лептоспиры (завитки с загнутыми крючкообразными концами - S-образная форма);

боррелии (4 -12 неправильных завитков);

24

трепонемы (14 -17 равномерных мелких завитков).

Leptospira interrogans

Borrelia burgdorferi

Treponema pallidum

Рисунок 19 – Извитые формы бактерий

4.нитчатые формы, к которым относят актиномицеты

(Actinomycetales). Клетки актиномицетов обычно имеют вид длинных и ветвящихся нитей, напоминающих в ряде случаев мицелий одноклеточных грибов (т.н. «тонкий мицелий»). Нити мицелия имеют длину 100–600 мкм и толщину 0,2–1,2 мкм.

Actinomyces israeli

Streptomyces sp.

Рисунок 20 - Представители актиномицетов

Размеры бактерий в среднем составляют 0,5—5 мкм. Escherichia coli, например, имеет размеры 0,3—1 на 1—6 мкм, Staphylococcus aureus — диаметр 0,5—1 мкм, Bacillus subtilis — 0,75 на 2—3 мкм.

Крупнейшей из известных бактерий является Thiomargarita namibiensis, достигающая размера в 750 мкм (0,75 мм). Спирохеты могут вырастать в длину до 250 мкм при толщине 0,7 мкм. В то же время к бактериям относятся самые мелкие из имеющих клеточное

25

строение организмов. Mycoplasma mycoides имеет размеры 0,1—0,25 мкм.

Задание 4. Ознакомиться с микрофлорой полости рта.

Вся нормальная микрофлора человека подразделяется на резидентную (постоянную – автохтонную (облигатную), составляющую до 90% присутствующих в организме микробоорганизмов, факультативную (аллохтонную) — менее 9,5%) и транзиторную (случайную) — до 0,5 %. Около 20 % микроорганизмов от общего числа обитает в полости рта (более 200 видов), 18-20% приходится на кожные покровы, 15-16% — на глотку, а больше всего микроорганизмов (до 40%) — в желудочно-кишечном тракте.

Нормальная микрофлора организма начинает формироваться при рождении ребенка. В полости рта новорожденного она представлена лактобациллами, негемолитическими стрептококками и непатогенными стафилококками. Главными обитателями полости рта у взрослого человека являются бактерии преимущественно анаэробного типа дыхания (3/4 всех микробных видов), остальные виды представлены факультативными анаэробами. В ротовой полости самую большую группу бактерий составляют кокки.

Род Staphylococcus. Стафилококки в полости рта здорового человека встречаются в среднем в 30% случаев. В зубном налете и на деснах здоровых людей присутствуют в основном Staphylococcus epidermidis. У некоторых людей в полости рта могут обнаруживаться и Staphylococcus aureus. Обладая значительной ферментативной активностью, стафилококки принимают участие в расщеплении остатков пищи в полости рта.

Патогенные стафилококки, встречающиеся на слизистой носоглотки и в полости рта, являются частой причиной эндогенных инфекций, вызывая различные гнойно-воспалительные процессы полости рта.

26

Таблица 1 - Микробная флора полости рта в норме

 

Микроорганизмы

 

 

 

В слюне

 

Частота

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

обнаружения в

 

 

 

 

Частота

 

Количество в 1

 

 

 

 

 

 

 

зубодесневых

 

 

 

 

обнару-

 

мл

 

 

 

 

 

 

 

карманах, %

 

 

 

 

жения, %

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Резидентная флора

 

 

1. Аэробы и факультативные анаэробы:

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

1.

S. mutans

 

100

 

1,5x105

 

100

2.

S. salivarius

 

100

 

107

 

 

 

100

3.

S. mitis

 

100

 

106 -108

 

 

 

100

4.

Сапрофитные

 

100

 

105 -107

 

 

 

+ +

нейссерии

 

 

 

 

 

 

 

 

 

5.

Лактобактерии

 

90

 

103-104

 

 

 

+

6.

Стафилококки

 

80

 

103-104

 

 

 

+ +

7.

Дифтероиды

 

80

 

Не определено

 

 

+

8.

Гемофилы

 

60

 

Не определено

 

 

0

9.

Пневмококки

 

60

 

Не определено

 

 

Не определено

10. Другие кокки

 

30

 

102 -104

 

 

 

+ +

11. Сапрофитные

 

+ +

 

Не определено

 

 

+ +

микобактерии

 

 

 

 

 

 

 

 

 

12. Тетракокки

 

+ +

 

Не определено

 

 

+ +

13. Дрожжеподобные

 

50

 

102- 103

 

 

 

+

грибы

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

2. Облигатные анаэробы:

 

1.

Вейллонеллы

 

100

 

106 - 108

 

 

 

100

2.

Анаэробные

 

100

 

Не определено

 

 

100

стрептококки

 

 

 

 

 

 

 

 

 

3.

Бактероиды

 

100

 

Не определено

 

 

100

4.

Фузобактерии

 

75

 

102 -103

 

 

 

100

5.

Нитевидные бактерии

 

100

 

102 -104

 

 

 

100

6.

Актиномицеты

 

100

 

Не определено

 

 

+ +

7.

Спириллы и вибрионы

 

+ +

 

Не определено

 

 

+ +

8.

Спирохеты

 

+

 

Не определено

 

 

100

 

 

Непостоянная флора

 

 

1. Аэробы и факультативные анаэробы:

 

1. Klebsiella

 

15

 

10-102

 

 

 

0

2.

Escherichia

 

2

 

10-102

 

 

 

±

3.

Aerobacter

 

3

 

10-102

 

 

 

0

4.

Pseudomonas

 

±

 

Не определено

 

 

0

7.

Бациллы

 

+

 

Не определено

 

 

0

 

2. Облигатные анаэробы:

 

1.

Clostridium putridium

 

±

 

Не определено

 

 

0

 

 

27

 

 

 

 

 

 

Staphylococcus aureus

Staphylococcus epidermidis

Рисунок 21 – Представители рода Staphylococcus (окрашенные препараты)

Род Streptococcus. Стрептококки являются основными обитателями полости рта (в 1 мл слюны — до 108-1011 стрептококков). В окрашенных мазках стрептококки располагаются в виде цепочек, грамположительны. Большинство из них являются факультативными анаэробами или микроаэрофилами, но встречаются и строгие анаэробы (например, пептострептококки). Стрептококки сбраживают углеводы с образованием молочной кислоты, вызывая молочнокислое брожение. Кислоты, появляющиеся в результате брожения, подавляют рост ряда гнилостных микробов, встречающихся в полости рта. Колонизация оральными стрептококками различных участков ротовой полости имеет качественные и количественные вариации в зависимости от условий жизни. S.salivarius и S.mitis в 100% случаев присутствуют в полости рта. S.mutans и S.sanguis обнаруживаются в большом количестве на зубах, a S.salivarius — главным образом на поверхности языка.

28

Streptococcus mutans

Streptococcus salivarius

Рисунок 22 – Представители рода Streptococcus

Род Veillonella. Вейллонеллы — это мелкие грамотрицательные кокки, располагаются кучками, парами или короткими цепочками. Строгие анаэробы.

Рисунок 23 – Veillonella parvula (СЭМ и окрашенный по Граму препарат)

Род Neisseria. Нейссерии — грамотрицательные диплококки. Строгие аэробы. Нейссерии всегда в большом количестве встречаются в полости рта здоровых людей (до 1—3 млн. в 1 мл слюны).

В полости рта помимо кокков обитают разнообразные палочковидные формы бактерий. Род Fusobacterium включает более 10 видов, изолированных из ротовой полости человека и животных. Фузобактерии — грамотрицательные анаэробные палочки, в культуре

29

выглядят как прямые или искривленные палочки, короткие нити с заостренными концами, напоминающие веретено.

Лептотрихии (род Leptotrichia содержит один вид - Leptotrichia buccalis) имеют вид длинных нитей разной толщины с заостренными или вздутыми концами, дают густые сплетения, могут располагаться попарно в виде зернистых палочек. Лептотрихии присутствуют в полости рта постоянно (чаще у шейки зубов) в большом количестве (в 1 мл слюны 103104).

Рисунок 24 - Leptotrichia buccalis

Чтобы поселиться в полости рта, бактерии должны прикрепиться к зубам или к слизистой оболочке и за счет этого обеспечить себе устойчивость к току слюны. Адгезия опосредована адгезинами поверхности бактерий и рецепторами эпителиоцитов ротовой полости, структурами зубной эмали (рис. 25). Микробные адгезины состоят из полисахаридов, липотейхоевых кислот, а также могут быть представлены гликозилтрансферазами и белками, связанными с углеводами (лектины). Эти адгезины являются компонентами клеточной стенки или ассоциированы с такими структурами

30