3 курс / Фармакология / Диссертация_Яичков_И_И_Разработка_методик_количественного_определения

111

Таблица 4.2

Фармакокинетические параметры микофеноловой кислоты в плазме крови добровольцев после однократного приёма препарата «Майфортик»

112

Фармакокинетические кривые МФК (рис. 4.1) имеют мультипиковый характер,

который, как было отмечено выше, связан с энтерогепатической рециркуляцией её ос-

новного метаболита - ФГМФК. Фармакокинетический профиль тестируемого препарата характеризуется более высоким уровнем максимальной концентрации МФК и более ранним временем её наступления, тогда как профиль референтного препарата демон-

стрирует более плавное постепенное нарастание концентрации с достижением меньших уровней Cmax. В связи тем, что у большинства добровольцев конечный моноэкспонен-

циальный участок фармакокинетической кривой содержал менее трёх точек со значени-

ями концентрации равными или превышающими НПКО (Прил. 4, табл. 1, 2), осуществ-

ление процедуры нелинейного регрессионного анализа для вычисления константы эли-

минации и связанных с ней параметров AUC0-∞, Т½, MRT было невозможно.

Средние значения площади под фармакокинетической кривой «концентрация-

время» для тестируемого препарата составили 22,79±8,80 мкг*ч/мл, и референтного препарата - 22,91±11,11 мкг*ч/мл, соответственно (табл. 4.1, 4.2). Максимальная кон-

центрация в плазме, а также средняя скорость всасывания МФК из ЖКТ после приёма данных ЛП существенно различались. Так, среднее значение Cmax для тестируемого пре-

парата составило 16,66±6,86 мкг/мл, для референтного препарата - 12,29±5,53 мкг/мл,

114

Таблица 4.3 Cравнение времени наступления максимальной концентрации микофеноловой кислоты в плазме крови добровольцев после однократного приёма тестируемого и референтного

препаратов (Т-критерий Уилкоксона)

Таблица 4.4 Индивидуальные отношения параметров, характеризующих биодоступность микофеноловой кислоты при приёме тестируемого препарата в сравнении с приёмом референтно-

го препарата «Майфортик» («Новартис», Швейцария)

Среднее значение относительной биодоступности (f’) микофеноловой кислоты при приеме тестируемого препарата по отношению к препарату «Майфортик» составляет 104,66±37,87%. Соотношения Cmax изучаемых ЛП (f”) варьируют в широком диапазоне - от 35,05 до 1873,91%. Соотношения средней скорости всасывания также характеризуются высокой вариабельностью: минимальное значение составило 66,88% максимальное значение – 712,10% (табл. 4.4).

Результаты добровольца №1 по параметру Cmax и добровольцев № 24 и 43 по параметру AUC0-t можно отнести к резко выделяющимся, т.к. значения логарифмически преобразованных отношений указанных выше параметров превосходят три стандартных отклонения (рис. 4.2, 4.3). Исходя из требований Методических указаний по проведению исследований БЭ [23] данных добровольцев можно было исключить из дальнейших расчётов. Однако, согласно новым требованиям ЕАЭС по проведению исследований БЭ [24] исключение субъектов по статистическим причинам не допускается.

115

-2

-3

-4

-5

Добровольцы, №№

Рисунок 4.2. График стандартизованных различий для логарифмически преобразован-

ных отношений значений Cmax микофеноловой кислоты (центрированных на среднее значение и нормированных на стандартное отклонение)

4

3

2

1

0

-1

-2

-3

-4

Добровольцы, №№

Рисунок 4.3. График стандартизованных различий для логарифмически преобразован-

ных отношений значений AUC0-t микофеноловой кислоты (центрированных на среднее значение и нормированных на стандартное отклонение)

116

Таблица 4.5

Результаты дисперсионного анализа значений фармакокинетических параметров мико-

феноловой кислоты после логарифмического преобразования данных

Результаты дисперсионного анализа (табл. 4.5) свидетельствуют о том, что основ-

ным фактором, вносящим вклад в вариабельность показателя AUC0-t являются испытуе-

мые, в вариабельность показателя Cmax – изучаемые препараты и, Cmax/AUC0-t - изучае-

мые препараты. Полученные значения остаточной вариации, использовались для расчё-

та 90%-доверительных интервалов для отношения значений оцениваемых параметров.

Таблица 4.6

Результаты сравнения фармакокинетических параметров, характеризующих биодоступ-

ность микофеноловой кислоты

Как видно из данных, приведённых в табл. 4.6, отношение средних геометриче-

ских параметра AUC0-t составило 101,46%, их 90%-ный доверительный интервал -

117

92,63% – 111,14%, что укладывается в допустимый диапазон границ 80,00 – 125,00%. Отношения средних геометрических значений, а также границы ДИ отношений показателей Cmax и Cmax/AUC0-t выходят за установленные пределы, даже с учётом увеличения допустимого диапазона до 77,23 – 129,48% (предусмотрено протоколом исследования). Исключение данных добровольцев №1, 24 и 43 могло привести к незначительному сужению границ ДИ Cmax до 121,27-153,94%, границ ДИ Cmax/AUC0-t до 117,86 - 143,54%, что не повлияло бы на результаты исследования [34]. Однако, коэффициенты внутрисубъектной вариабельности при этом значительно ниже: для параметра Cmax - 34,62%, для параметра AUC0-t - 16,92%, для параметра Cmax/AUC0-t - 28,35% [34]. В данном случае только величина CV intra (Cmax) соответствует уровню высоковариабельного препарата, в то время как без исключения добровольцев №1, 24 и 43 из расчётов данному критерию отвечают Cmax и Cmax/AUC0-t. При этом значение CV intra (Cmax) достаточно высоко и составляет 47,70%.

Входе повторного анализа проанализированных ранее образцов (ISR-тест) было проанализировано 96 проб (6,25% от общего их числа). При этом наблюдалась воспроизводимость аналитического метода: результаты 87,5% анализов имели расхождение в пределах ±20% от первоначального значения, что удовлетворяет критерия приемлемости [22, 24, 87]. Следовательно, используемая аналитическая методика гарантирует правильность полученных данных.

Всвязи с этим препарат сравнения «Майфортик» в форме таблеток, покрытых кишечнорастворимой оболочкой, в дозировке 360 мг (Новартис Фарма Штейн АГ, Швейцария) и тестируемый препарат не могут быть признаны биоэквивалентными [34, 36, 106].

4.2.Результаты исследования биоэквивалентности метилдопы в форме таблеток с

применением ВЭЖХ-МС/МС

Отбор образцов крови производился в вакуумные пробирки, содержащие К3ЭДТА в качестве антикоагулянта. Затем данные пробирки плавно переворачивали 4-5 раз, во избежание образования сгустка и немедленно центрифугировали в течение 5 мин при скорости 2500 об/мин и температуре +4ºС. Время от момента забора крови до начала центрифугирования составляло не более 15 мин. Далее, к полученной плазме добавлялся водный раствор стабилизатора из расчёта 0,2 мл раствора стабилизатора, содержащего

118

смесь аскорбиновой кислоты, натрия сульфита и натрия гидрокарбоната, на 1 мл плазмы крови. После этого образцы замораживались до температуры не выше -20˚С. Количе-

ственное определение метилдопы проводилось с помощью ВЭЖХ-МС/МС-методики

(см. главу 3.2). Всего было проанализировано всего было проанализировано 864 образ-

ца.

Таблица 4.7 Фармакокинетические параметры метилдопы в плазме крови добровольцев после одно-

кратного приёма тестируемого препарата метилдопы

119

Таблица 4.8

Фармакокинетические параметры метилдопы в плазме крови добровольцев после одно-

кратного приёма референтного препарата «Допегит» (ОАО «ЭГИС», Венгрия)

Индивидуальные концентрации метилдопы в плазме крови добровольцев после приёма тестируемого и референтного препаратов метилдопы представлены в таблицах

1, 2 (Прил. 5), усреднённые фармакокинетические кривые - на рис. 4.4. Среднее значе-

ние соотношения параметров AUC0-t / AUC0-∞ для тестируемого препарата составило