4 курс / Общая токсикология (доп.) / Судебно_медицинская_экспертиза_отравлений_антихолинэстеразными_веществами

Обнаружена высокая активность холинэстеразы в чувствительных и моторных нервных волокнах, а также в тельцах Мейснера и колбах Краузе. Много холинэсте­ разы было найдено в клетках каротидного клубка арте- рио-венозных анастомозов, в симпатическом ганглии и в ядрах глии коры больших полушарий головного моз­ га. Кроме того, истинная холинэстераза была выявлена в моторных бляшках скелетной мускулатуры и в клетках гладких мышц стенки желудочно-кишечного тракта, мо­ чевого пузыря и бронхов (В. В. Португалов и В. А. Яков­ лев, 1953; Coers, 1954).

В миокарде (Gerebtzoff, 1953; Gotte, 1955; Е. И. Ильи- на-Какуева, 1958) истинная холинэстераза локализуется в нервных тканях вблизи ганглиозных клеток, внутри постганглионарных волокон и в проводящей системе; в обычных мышечных волокнах истинная холинэстераза не обнаружена. Ложная холинэстераза в нервной ткани миокарда не найдена; в проводящей системе ее мало.

В тканях стенок артерий (в том числе в стенках аор­ ты) больше всего содержится ложной холинэстеразы. В ткани надпочечников истинная холинэстераза сосредото­ чена в нервных волокнах коркового слоя; мозговое ве­ щество содержит фермент в виде зернистой сетки. Ак­ тивность холинэстеразы вилочковой железы низка, а с возрастом еще более снижается. Холинэстераза в мы­ шечных волокнах щитовидной железы обнаруживается главным образом в местах контакта волокон с желези­ стой тканью. Слюнные железы также содержат специ­ фическую холинэстеразу, которая распределяется в нерв­ ных стволах, в ядрах и цитоплазме, внутри междолевых протоков.

В цитоплазме мегакариоцитов костного мозга и селе­ зенки крысы, мыши и кошки найдено значительное, но варьирующее содержание холинэстеразы. Обнаружен фермент в ростковых центрах фолликулов и эндотелии капилляров. И. С. Гавриленко (1959) установила, что наи­ большая активность истинной холинэстеразы в лимфаденоидной ткани определяется в мало-и недифференци­ рованных клеточных элементах: лимфобластах, больших и средних лимфоцитах, ретикулярных и адвентициальных клетках, в эндотелии капилляров и сосудов. Значитель­ ное количество фермента имеется в шванновской оболоч­ ке нервных стволов.

70

Распределение холинэстеразы в поджелудочной желе­ зе разных животных неодинаково. У собак и морских свинок фермент локализуется в дольках и в просвете ка­ нальцев; в стенках канальцев и в клетках Лангерганса холинэстераза не обнаружена. У кроликов, крыс и овец фермент найден в периваскулярных элементах: он изо­ лирован или сгруппирован в небольшие пучки вокруг маленьких артерий и артериол, соответственно их холинергической иннервации.

Исследования активности холинэстеразы головного мозга проводились преимущественно на кошках и кры­ сах (G. Koelle, I950, 1953, 1963). Наибольшее количество холинэстеразы было обнаружено в моторных нейронах моторных ядер головного мозга, в преганглионарных во­ локнах автономной системы (включая латеральные спинальные рога и ядра Эдингера — Вестфаля), в нейронах ретикулярной формации; в некоторых четвертичных аф­ ферентных волокнах латеральных таламических ядер). В гипоталамической области истинная холинэстераза оп­ ределяется в некоторых клетках супраоптикальной обла­ сти, в ядрах паравентрикулярной области и над пере­ крестом зрительных путей.

Внебольшом количестве и непостоянно истинная хо­ линэстераза выявляется в нейронах некоторых корреля­ тивных центров, а также в нейронах, соединяющих мо­ торную кору с большими клетками красного ядра.

Вбольшинстве клеток фермент располагается в кле­ точных мембранах и продолжается в дендритах и аксо­ нах. В центральной нервной системе, кроме истинной холинэстеразы, содержится большое количество ложной холинэстеразы. Псевдохолинэстераза присутствует глав­ ным образом в проводящих путях белого вещества (Ord

иThompson, 1952) и локализуется в глиальных клетках. Кроме того, ложный фермент обнаруживается вокруг супраоптического ядра IV желудочка в районе паравентрикулярного ядра. Капилляры и другие кровеносные

сосуды головного и спинного мозга, как и большинст­ во сосудов других органов, также содержат холинэстеразу.

Гистохимические исследования спинного мозга (Giacobini, Holmstedt, 1958; W. Koelle и G. Koelle, 1959) по­ казывают, что только передние и латеральные рога дают положительную реакцию на истинную холинэстеразу.

7)

Большие моторные нейроны сильно окрашиваются. Спинной мозг содержит также и ложную холинэстеразу.

Установлено, что в коре головного мозга межклеточ­ ное вещество глии содержит большое количество холин­ эстеразы, в мозжечке — в клетках-зернах, вокруг клеток Пуркинье, в двигательных нейронах и нервных волокнах серого вещества.

Распределение холинэстеразы в ганглиях оценивает­ ся различно. В первоначальных исследованиях на кошках высокая концентрация истинной холинэстеразы была найдена в холинергических нейронах, в то время как в адренергических и сенсорных волокнах фермент не обнаружен. Впоследствии оказалось, что все нервы верх­ него шейного симпатического ганглия кроликов содержат различное количество истинной холинэстеразы (W. Koel­ le и G. Koelle, 1959). Дальнейшие исследование Koelle (1959, 1963) на кошках, кроликах и обезьянах показали присутствие истинной холинэстеразы в большинстве ти­ пов периферических нейронов. В холинергических нейро­ нах концентрация энзима постоянно высока; в адренер­ гических и сенсорных типах нейронов холинэстеразы мало. Нейроны ауэрбаховского сплетения и скопления интерстициальных клеток содержат высокую концентрацию ложной холинэстеразы (W. Koelle и G. Koelle, 1959).

В полосатом теле содержится до 95% истинной холин­ эстеразы и 5% ложного фермента.

Giacobini (1959) нашел, что активность холинэстера­ зы широко варьирует не только среди клеток различных типов, но и в отдельных клетках одного типа. Активность истинной холинэстеразы в клетках передних рогов в 3—20 раз выше, чем в клетках парасимпатического ганг­ лия, в 10—20 раз выше, чем в клетках симпатического ганглия, и в 30—70 раз выше, чем в клетках спинального ганглия. Активность фермента варьирует как в теле клет­ ки, так и в аксонах. Ложная холинэстераза найдена в не­ большом количестве в некоторых клетках спинального и симпатического ганглиев. Активность дендритов не­ сколько ниже, а активность ядер в 10—100 раз ниже дру­ гих частей клеток: в ядрышках энзим совсем не опреде­ ляется. По данным автора, в клетках глии содержится только ложная холинэстераза.

Использование специфических субстратов и ингиби­ торов показывает, что истинная холинэстераза присутст-

72

вует в некоторых из клеток симпатических, парасимпати­ ческих и спинальных ганглиев и во всех клетках перед­ них рогов.

Из фармакологических исследований вытекает, что

В литературе имеются отрывочные сведения о состоя­ нии холинэстеразы органов и тканей человека. Наиболее полные данные, характеризующие уровень холинэстеразной активности головного мозга человека, имеются в сводке Ord и Thompson (1952) (табл. 10).

A. JX Мельникова (1965, 1967), используя гистохими­ ческий метод, нашла, что в сердце человека наибольшей холинэстеразной активностью обладают интрамуральные нервные ганглии, располагающиеся в области передней и задней стенок правого предсердия, а также нервные про­ водники. Обнаружена богатая сеть холинергических воло­ кон в субэндокардиалыюм слое и в самом эндокарде. При инфаркте миокарда в начальном периоде его разви-

73

тия изменения активности холинэстеразы касаются преж­ де всего нервных ганглиев: резкое снижение активности холинэстеразы в одних узлах на фоне почти нормальной активности фермента в других узлах. По мере развития морфологической картины инфаркта активность холин­ эстеразы восстанавливается, свидетельствуя о возмож­ ной стадии компенсации. При рубцевании инфаркта холинэстеразная активность нервных ганглиев полностью возвращается к норме. В случае гипертрофии миокарда в субэндокардиальном слое определяется слой мышеч­ ных волокон, обладающих повышенной холинэстеразной активностью.

Мы поставили пред собой задачу установить уровень активности холинэстеразы органов и тканей человека в норме и при некоторых встречающихся отравлениях (Я. С. Смусин, 1962—1965).

Если можно говорить об активности холинэстеразы крови человека в норме, т. е. у живых, практически здо­ ровых людей, то, естественно, весьма затруднительно или невозможно установить норму холинэстеразной активно­ сти органов и тканей трупов. Судить об уровне холинэсте­ разной активности органов и тканей трупов людей можно лишь путем сравнения активности при некоторых видах смерти. Трудно сказать, что следует принять за норму. По-видимому, наиболее целесообразно брать такие слу­ чаи смерти, в которых можно предполагать отсутствие снижения активности холинэстеразы. Вот почему мы бы­ ли вынуждены исследовать несколько видов насильствен­ ной и ненасильственной смерти и путем сравнения сде­ лать выводы о нормальных уровнях активности холин­ эстеразы органов и тканей человека.

Из насильственной смерти нами были взяты случаи смерти от механической асфиксии (преимущественно повышение), различных механических повреждений,элек­ тротравмы, ожогов тела и пр., а также случаи смер­ ти от отравлений (главным образом довольно часто встре­ чающиеся случаи смерти от острого отравления алкого­ лем). Из ненасильственной смерти мы изучали случаи скоропостижной смерти от заболеваний сердечно-сосу­ дистой системы (гипертоническая болезнь и атероскле­ роз) . Активность холинэстеразы органов и тканей иссле­ довали в день вскрытия трупов (как правило, в пределах 1—2 суток после смерти).

74

Мы исследовали активность холинэстеразы миокарда (основание стенки левого желудочка сердца), легких (краевые отделы), печени, поджелудочной железы, щито­ видной железы, мышечной ткани (грудная мышца), а также различных отделов центральной нервной системы: коры головного мозга (передняя центральная извилина больших полушарий), головки хвостатого ядра, гипота­ ламуса (сосковые тела и серый бугор), мозжечка (об­ ласть зубчатого ядра), продолговатого мозга и спинного мозга (шейный отдел). Активность холинэстеразы опре­ делялась биохимическим методом Хестрина. Кусочки ор­ ганов и тканей брали навесками от 100 до 1500 мг и под­ вергали тщательному растиранию. Затем растертую ткань разводили дистиллированной водой в 5, 10, 15 и 85 раз (в зависимости от уровня холинэстеразной активности органов или тканей). Дальнейшие исследования проводи­ лись так же, как описано выше.

Мы исследовали активность холинэстеразы органов и тканей от 66 трупов. Ниже приводятся результаты на­ ших исследований по изучению активности холинэстера­ зы органов и тканей трупов людей в зависимости от при­ чины смерти и наличия или отсутствия в организме алко­ голя (табл. 11) (об этом см. также у В. А. Наумова, 1968).

АКТИВНОСТЬ ХОЛИНЭСТЕРАЗЫ ГОЛОВНОГО МОЗГА, ОПРЕДЕЛЯЕМАЯ В «КУСОЧКЕ НЕРАЗВЕДЕННОЙ ТКАНИ»

В предыдущих разделах были изложены результаты опытов по определению уровня активности холинэстера­ зы крови, органов и тканей трупов людей, умерших на­ сильственной и ненасильственной смертью. При иссле­ довании крови методом Хестрина (с разведением крови) нам не удалось отметить зависимости уровня активности холинэстеразы от наличия или отсутствия алкоголя в ор­ ганизме. Нри определении активности холинэстеразы ор­ ганов и тканей тем же методом были получены резуль­ таты, свидетельствующие, что некоторое снижение актив­ ности холинэстеразы отмечается в случаях смерти от острого отравления алкоголем, а также в случаях смер­ ти при наличии алкогольной интоксикации. Однако по­ лученные результаты являются не вполне статистически

75