2 курс / Микробиология 1 кафедра / Доп. материалы / Частная бактериология
.pdf111
вырабатывается стойкий гуморальный иммунитет, повторные случаи заболевания почти не наблюдаются.
Для лабораторной диагностики менингококковой инфекции в зависимости от формы заболевания отбирают носоглоточную слизь (от больных и носителей), ликвор, кровь, соскоб из элементов геморрагической сыпи на коже и др.
Носоглоточную слизь берут специальным изогнутым тампоном с задней стенки глотки (рисунок 2.21).
Рисунок 2.21 - Отбор носоглоточной слизи. Заимствовано из Интернет-ресурсов.
После отбора слизь засевают на сывороточный агар непосредственно у постели больного или тампон помещают в транспортную среду для доставки в лабораторию.
При гнойном менингите основным исследуемым материалом является ликвор, который берут в день госпитализации больного в количестве 2-5 мл (рисунок 2.22).
Рисунок 2.22 - Отбор спинномозговой жидкости. Заимствовано из Интернетресурсов.
Спинномозговую жидкость (СМЖ), кровь собирают в стерильные пробирки и сразу же высевают на питательные среды или же немедленно направляют в лабораторию, соблюдая температурный режим доставки материала (в термоконтейнере при температуре 37ОС). При гнойном менингите ликвор мутный
(рисунок 2.23).
112
Рисунок 2.23 - Внешний вид ликвора при гнойном менингите. Заимствовано из Интернет-ресурсов.
При лабораторной диагностике менингококковой инфекции применяют бактериоскопический, бактериологический (культуральный) и серологический методы.
Бактериоскопический метод. Носоглоточная слизь микроскопически не исследуется, так как в ней присутствуют условно-патогенные нейссерии, морфологически сходные с менингококками.
Ликвор центрифугируют при 3500 об/мин в течение 5 минут, а затем из осадка готовят мазки, которые окрашивают по Граму в модификации Калины (использование спиртового раствора бриллиантовой зелени перед фиксированием препарата) или водно-спиртовым раствором метиленового синего. Микроскопируют с иммерсией под большим увеличением. Выявление в мазках грамотрицательных диплококков бобовидной формы, окруженных капсулой, позволяет предположить менингококковую природу заболевания. Менингококки располагаются свободно и в цитоплазме фагоцитов.
Для микроскопического исследования крови готовят препарат “толстой капли”, который высушивают и окрашивают водно-спиртовым раствором метиленового синего без предварительной фиксации. При микроскопии с иммерсией выявляются бактерии типичной морфологии, окруженные капсулой в виде бесцветного ореола.
Трупный материал исследуют только бактериоскопическим методом из-за низкой жизнеспособности менингококка.
Бактериологическое (культуральное) исследование проводят с целью выделения и идентификации чистой культуры менингококка. По-возможности посев материала производят у постели больного. Бактериологическому исследованию подвергают носоглоточную слизь, кровь и ликвор. Посев материала для получения чистой культуры производят на плотные или полужидкие питательные среды, содержащие сыворотку крови, кровь или асцитическую жидкость. Посевы инкубируют в течение 18-24 часов при 37°С в атмосфере углекислого газа (8-10%). Идентификацию выделенной культуры проводят на основании следующих свойств:
-продукция оксидазы;
-ферментация глюкозы и мальтозы до кислоты;
-принадлежность к серогруппам в реакции агглютинации.
113
Серологические методы используют для обнаружения бактериальных антигенов в исследуемых материалах или антител в сыворотке крови. Для обнаружения антигенов применяют реакцию латекс-агглютинации, встречный иммуноэлектрофорез (ВИЭФ), реакцию непрямой гемагглютинации (РНГА) и другие методы.
Наиболее простым является метод латекс-агглютинации, позволяющий в течение 15 минут установить наличие или отсутствие специфических антигенов. Для латекс-агглютинации используют коммерческие наборы (рисунок 2.24).
Рисунок 2.24 – Набор для латекс-агглютинации менингококков. Заимствовано из Интернет-ресурсов.
ВИЭФ является экспресс-методом, так как позволяет с помощью специфических антисывороток выявлять полисахаридный антиген возбудителя в СМЖ и в сыворотке крови больного.
РНГА является дополнительным методом лабораторного подтверждения генерализованной менингококковой инфекции и позволяет выявлять специфические антитела. Для получения достоверного результата исследуют парные сыворотки крови, полученные в динамике (в первые сутки заболевания и на 10-12 день).
У больных менингококковой инфекцией антитела обнаруживаются с конца первой недели болезни, достигая максимума на 2-3 неделе, а затем их титр снижается. В разгар менингококковой инфекции повышается уровень IgМ, особенно при генерализованных формах; в период реконвалесценции выявляются IgG.
Лечение. Для лечения менингококковой инфекции используют антибиотики. Наиболее эффективными являются бензилпенициллин, полусинтетические пенициллины (ампициллин, оксациллин), левомицетин, рифампицин. Антимикробную терапию сочетают с симптоматическими средствами. Для предотвращения отека головного мозга назначают диуретики.
Неспецифическая профилактика менингококковой инфекции заключается
ввыполнении следующих мероприятий:
-изолирование и лечение больного;
-выявление и санирование бактерионосителей;
-разобщение детских коллективов;
-проведение текущей дезинфекции в очаге заболевания.
114
Выявление носителей в окружении больного проводится бактериологическим исследованием носоглоточной слизи. Выявленных носителей санируют антибиотиками.
Для создания пассивного иммунитета детям дошкольного возраста вводят однократно иммуноглобулин в дозе 1,5-3,0 мл не позднее 7 дня после регистрации в коллективе первого случая заболевания. Профилактический эффект иммуноглобулина сохраняется в течение нескольких месяцев после введения.
Для активной специфической профилактики менингококковой инфекции используют три типа вакцин. Вначале были разработаны полисахаридные вакцины, которые бывают двухвалентными (группы А и С), трехвалентными (группы А, С и W) и четырехвалентными (группы А, С, Y и W135). В России для вакцинации групп риска используют менингококковую вакцины против бактерий серогрупп А и С (бивакцина) или группы А (рисунок 2.25).
Рисунок 2.25 - Менингококковые вакцины. Заимствовано из Интернет-ресурсов.
Примером четырехвалентной полисахаридной вакцины является Менцевакс ACWY, в состав которой входят очищенные полисахариды менингококков серогрупп A, C, W135 и Y.
Второй тип препаратов представляли вакцины, применяемые против бактерий группы В. Полисахаридные вакцины против менингококков группы В разработать невозможно из-за антигенной мимикрии (сходства) антигенов микробов с полисахаридами нервных тканей человека. Поэтому вакцины против бактерий группы В содержат наружный белок мембраны и предназначаются для профилактики заболеваний, вызванных конкретными штаммами. Такие вакцины использовались на Кубе, в Норвегии.
Однако полисахаридные менингококковые вакцины не обладают защитным эффектом у детей до 2 лет, а длительность вызываемого иммунитета у более старших лиц не превышает 3 лет.
Третий тип вакцин – это конъюгированные вакцины, в которых менингококковые капсульные полисахариды соединены с дифтерийным или столбнячным анатоксином. Конъюгированные вакцины вызывают Т-зависимый иммунный ответ с развитием иммунологической памяти. К числу конъюгированных менингококковых вакцин относятся вакцины Менактра и Менюгейт. Менактра – это четырехвалентная менингококковая вакцина, содержащая полисахариды серогрупп A, C, W135 и Y, индивидуально конъюгированные с очищенным дифтерийным анатоксином. Эта вакцина может использоваться с 9-месячного возраста. Менюгейт содержит олигосахарид менингококка серогруппы С, конъюгированный с белком CRM197 нетоксигенного модифицированного штамма дифтерийного микроба (рисунок 2.26).
115
Рисунок 2.26 – Конъюгированные менингококковые вакцины. Заимствовано из Интернет-ресурсов.
При возникновении хотя бы одного случая менингококковой инфекции в замкнутом коллективе возможно проведение экстренной профилактики с использованием антибиотиков (экстренная антибиотикопрофилактика).
Вопросы для контроля усвоения материала
1.Таксономическое положение, морфологические, тинкториальные, культуральные и биохимические свойства менингококков.
2.Факторы патогенности менингококков и патогенез менингококковой инфекции.
3.Эпидемиология и клиника менингококковой инфекции.
4.Принципы профилактики и лечения менингококковой инфекции.
Тренировочные тесты
1.Менингококки относятся к роду (один правильный ответ):
1.1 Clostridium
1.2 Klebsiella
1.3 Neisseria
1.4 Staphylococcus
1.5 Bacteroides
2.Для менингококков характерно (один правильный ответ): 2.1 грамположительная окраска 2.2 грамотрицательная окраска 2.3 спорообразование 2.4 подвижность 2.5 синтез экзотоксина
3.По морфологии менингококки являются (один правильный ответ): 3.1 грамнегативными палочками 3.2 грамнегативными кокками 3.3 грампозитивными кокками
3.4 грампозитивными спорообразующими палочками
3.5 грампозитивными неспорообразующими палочками
4.Характерные признаки менингококков (один правильный ответ):
116
4.1диплококки
4.2тетракокки
4.3подвижные
4.4положительная окраска по Граму
4.5расположение цепочкой
5.Питательные среды для культивирования менингококков (несколько правильных ответов):
5.1 агар Эндо
5.2 среда Плоскирева
5.3 кровяной агар
5.4 сывороточный агар
5.5 висмут-сульфитный агар
6.Для менингококков характерно (несколько правильных ответов):
6.1облигатные аэробы
6.2облигатные анаэробы
6.3факультативные анаэробы
6.4капнофилы
6.5микроаэрофилы
7.Факторы патогенности Neisseria meningitidis (несколько правильных ответов): 7.1 тейхоевые и липотейхоевые кислоты 7.2 экзотоксин 7.3 полисахаридная капсула 7.4 холероген 7.5 пили
8.Факторами патогенности менингококков являются (несколько правильных ответов):
8.1 жгутики
8.2 белки наружной мембраны
8.3 экзотоксин
8.4 протеаза
8.5 нейраминидаза
9.Источником менингококковой инфекции являются (несколько правильных ответов):
9.1 инфицированные продукты питания
9.2 предметы обихода
9.3 больные люди
9.4 бактерионосители
9.5 медицинский инструментарий
10.Заболевания, вызываемые Neisseria meningitidis (несколько правильных ответов): 10.1 назофарингит
117
10.2энтероколит
10.3бактериальный менингит
10.4гепатит
10.5скарлатина
11.Источник инфекции при менингите (несколько правильных ответов): 11.1 вода
11.2 здоровые бактерионосители
11.3 больные генерализованными формами
11.4 больные назофарингитом
11.5 почва
12.Механизм передачи менингококковой инфекции (один правильный ответ): 12.1 фекально-оральный 12.2 аэрогенный 12.3 вертикальный 12.4 контактный
12.5 артифициальный
13.Путь передачи менингококковой инфекции (один правильный ответ):
13.1водный
13.2пищевой
13.3воздушно-капельный
13.4трансплацентарный
13.5инъекционный
14.Входные ворота менингококковой инфекции (один правильный ответ): 14.1 слизистая мочеполового тракта 14.2 слизистая оболочка носоглотки 14.3 кожные покровы 14.4 кишечник 14.5 раневая поверхность
15.К генерализованным формам менингококковой инфекции относятся (несколько правильных ответов):
15.1 бактерионосительство
15.2 менингококцемия
15.3 менингит
15.4 назофарингит
15.5 пневмония
16.К локализованным формам менингококковой инфекции относятся (несколько правильных ответов):
16.1 бактерионосительство
16.2 менингококцемия
16.3 менингит
118
16.4назофарингит
16.5пневмония
17.Материал для бактериоскопической диагностики менингококковой инфекции (несколько правильных ответов):
17.1 слизь из носоглотки
17.2 кровь
17.3 ликвор
17.4 испражнения
17.5 моча
18.При микробиологической диагностике менингококковой инфекции используют методы (несколько правильных ответов):
18.1 микроскопический
18.2 культуральный
18.3 серологический
18.4 аллергический
18.5 биологический
19.Основной метод микробиологической диагностики менингококкового назофарингита (один правильный ответ):
19.1 микроскопический
19.2 культуральный
19.3 серологический
19.4 аллергический
19.5 биологический
20.Для диагностики менингококковой инфекции используются методы (несколько правильных ответов):
20.1 культуральный
20.2 биологический
20.3 аллергический
20.4 латекс-агглютинации
20.5 метод микрокультур (метод Прайса)
21.Для выделения менингококков из ликвора используют (один правильный ответ): 21.1 среду Плоскирева 21.2 сывороточный агар 21.3 среду Эндо 21.4 среду Левина
21.5 висмут-сульфитный агар
22.При микроскопии мазков, приготовленных из ликвора больного менингитом, обнаруживаются (один правильный ответ):
22.1 грамотрицательные диплококки
22.2 грамположительные диплококки
119
22.3грамотрицательные палочки в цепочке
22.4грамположительные палочки
22.5извитые бактерии
23.Препараты специфической профилактики менингококковой инфекции (один правильный ответ):
23.1 вакцины
23.2 антибиотики
23.3 пребиотики
23.4 пробиотики
23.5 диагностикумы
24.После генерализованных форм менингококковой инфекции формируется иммунитет (несколько правильных ответов):
24.1 длительный напряженный преимущественно гуморальный
24.2 длительный напряженный преимущественно клеточный
24.3 нестерильный
24.4 антибактериальный
24.5 антитоксический
Правильные ответы: 1.3; 2.2; 3.2; 4.1; 5.3, 5.4; 6.1, 6.4; 7.3, 7.5; 8.2, 8.4, 8.5; 9.3, 9.4;
10.1, 10.3; 11.2, 11.3, 11.4; 12.2; 13.3; 14.2; 15.2, 15.3; 16.1, 16.4; 17.1, 17.2, 17.3; 18.1, 18.2, 18.3; 19.2; 20.1, 20.4; 21.2; 22.1; 23.1; 24.1, 24.4.
120
2.2. Гонококки
Гонококковая инфекция (гонорея) - это инфекционное заболевание человека, вызываемое Neisseria gonorrhoeae, которое передается половым путем и характеризуется гнойным воспалением слизистой оболочки мочеполовых путей (гонорея), конъюнктивы глаз (бленнорея) или других органов.
N. gonorrhoeae относится к типу Proteobacteria, классу Betaproteobacteria, порядку Neisseriales, семейству Neisseriaceae, роду Neisseria.
Возбудитель гонореи был открыт А. Нейссером в 1879 г. Этиологическую роль N. gonorrhoeae в развитии гонореи доказал в 1885 г. немецкий акушергинеколог Э. Бумм (рисунок 2.27).
Рисунок 2.27 - Эрнст Бумм (Ernst Bumm, 1858 – 1925 гг.). Заимствовано из Интернет-ресурсов.
Морфологические и тинкториальные свойства. Гонококки представляют собой неподвижные диплококки размером 1,25÷1,0x0,7÷0,8 мкм. Они хорошо окрашиваются анилиновыми красителями (метиленовым синим, бриллиантовым зеленым и др.). По Граму окрашиваются в розовый цвет, то есть являются грамотрицательными (рисунок 2.28).
а б Рисунок 2.28 - Гонококки, форма клеток, компьютерная визуализация (а) и окраска
по Граму (б). Заимствовано из Интернет-ресурсов.