2 курс / Микробиология 1 кафедра / Доп. материалы / Микробиология 4
.pdf
З АВ В ЙТЕ, ДО Е Д Ь.
Кар н 2020 объед на и мы ре п о л ь а с и йло л ….
Это ен ер айло. Нап о к ь.
ma y S I_KE ’S A F UR
Оглавление - нажми и вернешься |
2 |
|
Ог а л е |
Наж ер еш н у н ра 
Стафилококки………………………………………………………………………………………………....3 Стрептококки………………………………………………………………………………………………...10
КЛОСТРИДИИ………………………………………………………………………………………………...14
○Возбудитель ботулизма
○Возбудитель столбняка
○Возбудители газовой гангрены
Бактероиды Bacteroides fragilis………………………………………………………………………...23
ЭНТЕРОБАКТЕРИИ………………………………………………………………………………………....25 ○ Эшерихии
Шигеллы……………………………………………………………………………………………………...28 Сальмонеллы………………………………………………………………………………………………..31
○Брюшной тиф и паратифы
○Сальмонеллез
○Внутрибольничный (нозокомиальный) сальмонеллез
Возбудитель кишечного иерсиниоза…………………………………………………………………..36
Возбудитель холеры………………………………………………………………………………..……..38 Возбудитель кампилобактериоза…………………………………………………….…………….…..41 Хеликобактерии……………………………………..……………………………...……………………....44
В БЛАГОДАРНОСТЬ ЗА НАШИ СТАРАНИЯ: 4276400090754301
Оглавление - нажми и вернешься |
3 |
Гнойно-воспалительные |
инфекции - инфекции разной локализации и характера |
(инфильтраты, флегмоны, абсцессы и др.) и сопровождающиеся воспалительной реакцией с образованием гноя.
Гнойно-септические инфекции - инфекции, характеризующиеся генерализацией с развитием сепсиса.
Раневые инфекции являются, как правило, частным случаем гнойно-воспалительных инфекций и имеют гнойный характер.
Стафилококки
Таксономия:
Отдел: Firmicutes
Семейство: Staphylococcaceae Род: Staphylococcus
Виды: S.aureus, S.epidermidis, S.saprophyticus, S.hominis, S.capitis, S.warneri, S.xylosus.
Морфологическая характеристика:
кокки в виде виноградной грозди (искл. - бывают единичные)
Окраска: Гр”+”, => фиолетовый
Особенности восприятия красителя связаны с особенностью клеточной стенки (толстый слой пептидогликана, на поверхности - тейхоевые и липотейхоевые кислоты.
●Микрокапсула (S.aureus) из полисахарида
-относится к факторам антифагоцитарной защиты => нужна для защиты от фагоцитарных клеток.
●Протеин А
-относится тоже к факторам антифагоцитарной активности - обуславливает формирование выросток клеточной стенки в виде шипов, благодаря которым фагоцитарные клетки не могут фиксироваться к клеточной стенке
Способ дыхания:
- факультативные анаэробы
Дыхательные ферменты: oxy+ оксидоредуктаза - есть только у облигатных, cat+ каталаза, NR+ нитратредуктаза
Идентификация:
1.на каталазную активность.
В процессе окисления флавопротеина в дыхательной цепи происходит образование Н2О2. Если капнуть на колонию перекись и увидеть выделение кислорода-пузырение, то это аэробы или факультативные анаэробы. Облигатно анаэробные погибают.
В БЛАГОДАРНОСТЬ ЗА НАШИ СТАРАНИЯ: 4276400090754301
Оглавление - нажми и вернешься |
4 |
2. на оксидоредуктазную активность, оксидазный тест, тест на цитохромоксидазу. К колонии М/о добавляют 2 реактива: альфа-нафтол и метиловый спирт. Если у бактерий есть оксидазная активность, то происходит окисление альфа-нафтола и в присутствии метилового спирта появляется характерное лиловое окрашивание.
В настоящее время существуют специальные диски, пропитанные этими двумя индикаторами. И на поверхность этих дисков наносят колонию, снятую с поверхности скошенного агара, аналогично ждут лиловово окрашивания.
3.нитратредуктазная активность - для факультативных анаэробов.
м/о, обладающие этой активностью засеиваются на питательную среду с нитратом калия, крахмалом и вроде йодидом калия. Когда микроорганизмы обладают ферментом нитратредуктазой - нитрат восстанавливается до нитрита, образуя кислород. Образовавшийся кислород окисляет йодид калия с образованием образовавшегося йода. Йод взаимодействует с крахмалом - синее окрашивание.
Типы брожения:
муравьинокислое брожение, а именно ацетоиновый тип (продукты: ацетоин, бутандиол)
Биохимическая идентификация:
абс- МР – тест на метил-рот, VP – реакция Фогеса-Проскауэра (α-нафтоловый реактив и КОН(40%)
Ацетоиновый тип МКБ:
1.ПВК → Ацетоин + бутандиол
2.+ MR → Жёлтое окрашивание («отрицательный»)
3.+ VP → Красное окрашивание («положительный»)
Биохимические свойства:
(Способность к расщеплению углеводов и белков)
Глюкоза, Лактоза, Мальтоза, Маннит, Сахароза - с образованием кислоты (важно, т.к. кислота - доп. раздражающий фактор, из-за которого разрушается соед. ткань, рана не заживает)
Желатиназу - этот признак есть почти у всех раневых м/о
Биохимическая идентификация: На среде желатина. При добавлении в такую среду тех, кто разжижает желатин – происходит разжижение желатина
а/к серосодержащие
Биохимическая идентификация
На продукцию сероводорода (H2S):
В БЛАГОДАРНОСТЬ ЗА НАШИ СТАРАНИЯ: 4276400090754301
Оглавление - нажми и вернешься |
5 |
Выделение H2S (аминокислоты цистеин метионин используются) = получаем черный цвет от FeS.
а/к фенилаланин
Биохимическая идентификация
Дезаминазная активность:
Микроорганизмы, имеющие в составе фермент дезаминазу засеиваются на питательную среду с фенилаланином. Если есть дезаминаза, то фенилаланин расщепляется. Основной продукт - фенил-пвк и аммиак. Т.к. фенил-пвк не имеет цвета, добавляется FeCl3 - появляется комплексное соединение с зеленым окрашиванием. Зеленое окрашивание и дает положительный результат теста.
Антигены
К-антиген - микрокапсульный (!только у золотистого стафилококка)
аналог О-антигена - тейхоевые и липотейхоевые а/к
белковые АГ клеточной стенки (протеинА и доп. белки клеточной стенки стафилококков)
Факторы патогенности:
Факторы адгезии
Капсула (у золотистого) - фактор адгезии, способствует агрегации клеток (обр-е биопленки). Антифагоцитарная и антифаговая защита.
белок А - подавляет опсоническую активность Ig, присоединяет к себе молекулы Ig посредством Fc-фрагментов, способствует адгезии, защищает от бактериофагов, индуцирует синтез интерферонов, чем повышает чувствительность к вирусам.
ТК, ЛТК - факторы адгезии, защищают от фагоцитов, вызывая некроз клеток, обладают АГ-специфичностью Пептидогликан - хемоаттрактант для фагоцитов, усиливает синтез ИЛ-1, активирует
комплемент, связывает опсонизирующие факторы сыворотки крови, пирогенное
действие. Хемоаттрактанты - химические вещества, которые после соединения со специальными рецепторами лейкоцитов и мононуклеаров вызывают их передвижение по градиенту концентрации хемоаттрактантов.
Факторы инвазии и агресси - плазмокоагулаза, гиалуронидаза, нейраминидаза, ДНК-аза, лецитиназа, фибринолизин, липаза, лейкоцидин
-направлены на нарушение соединительнотканных элементов.
Из-за этого для стафилококков характерен гнойный ассункованный характер поражения - формирование гнойного мешка - округлое образования с тенденцией к увеличению, т.к. размножаясь, стафилококки выделяют всё больше ферментов.
Коагулазо+ S. aureus
В БЛАГОДАРНОСТЬ ЗА НАШИ СТАРАНИЯ: 4276400090754301
Оглавление - нажми и вернешься |
6 |
Коагулазо- все остальные стафилококки
Антифагоцитарные факторы - капсула, белок А, ТК, ЛТК, ПГ, плазмокоагулаза, лейкоцидин, альфа-гемолизин, пигменты, антифагин, каталаза.
Токсины
Гемолизины - мембранотоксины, обладают широкой биологической активностью, поражают эритроциты, лейкоциты и другие клетки и ткани.
альфа - вызывают лизис эритроцитов дельта - поражает большое разнообразие клеток и тканей (например дерматонекроз)
Лейкоцидин - мембранотоксин, действующий избирательно на лейкоциты, а именно нейтрофилы.
Эксфолиативные токсины - эпидермолитический токсин. Благодаря нему происходит
эпидермальный некролиз - поражение участков кожи.
Синдром ошпаренной кожи - эксфолиативный токсин разрушает межклеточные перегородки в зернистом слое эпидермиса, они заполняются жидкостью, образуются пузыри. Полиорганная недостаточность. Летальный исход.
ТСТШ (экзотоксин с синдромом токсического шока) - если стафилококк его выбрабатывает, то токсин попадет в кровоток и будет инфекционный токсический шок, полиорганная недостаточность, летальный исход.
Энтеротоксины - только у S. aureus - обуславливают диарейные реакции. Действует как суперантиген, т.е вызывает поликлональную пролиферацию т лимфоцитов
токсины золотистого стафилококка - суперантигены
Эпидемиологические особенности:
●источник инфекции - больной человек - бактерионоситель, больное животное.
●механизмы передачи: контактный, аэрогенный, алиментарный, артифициальный (внутрибольничная инфекция, т.е. в условиях стационара).
●пути передачи: контактно-бытовой, воздушно-капельный, воздушно-пылевой, пищевой.
Основные заболевания, вызываемые стафилококками:
послеродовая патология у рожениц (послеродовые эндометриты, гнойные маститы и т.д.)
у новорожденных - нагноение пупочной раны, дерматиты, везикулопустулез, пузырчатка новорожденных, сепсис и др.
послеоперационные осложнения
раневые гнойно-воспалительные процессы
ВБЛАГОДАРНОСТЬ ЗА НАШИ СТАРАНИЯ: 4276400090754301
Оглавление - нажми и вернешься |
7 |
Возможная локализация стафилококковых поражений:
○верхние и нижние дыхательные пути
○ЖКТ
○урогенитальный тракт
○кожные инфекции:
-фурункулез: при ослабленном иммунитете стафилококки попадают в волосяной фолликул, появляется фурункул (часто при сахарном диабете, т.к. стафилококки сахаролитические м/о).
-множественный фурункулез - карбункул: там где много волосяных фолликулов.
После фурункула - абсцесс: внтури гнойный мешок, а поверх - воспалительная инфильтрация, связанная с действием токсических субстанция (дельта-некротина, дерматолизина и эксфолиативного токсина) и ферментов, которые разрушают соединительные ткани.
После фурункула - флегмона - тоже разлитое гнойное воспаление, в которое часто вовлечены сосуды. По сосудам стафилококки могут разлетать по макроорганизму с развитием вторичных септикотеемических очагов. Если такой стафилококк вырабатывает экзотоксин токсического шока, то будет токсический шок и летальный исход.
-стафилококковая пиодермия (сикоз) - множественные гнойнички на структуре эпидермиса (часто при иммунодефицитных состояниях).
Классификация стафилококков по патогенности:
●коагулазоположительные - патогенные
●коагулазоотрицательные - условно-патогенные - представители индигенной микрофлоры
- обладают низкой вирулентность., не обладают токсичностью и инвазивностью - вызывают заболевания, будучи занесенными в кровь, мочевой пузырь,
госпитальные инфекции - заболевают люди с ослабленным иммунитетом
●лецитиназопозитивные
●лецитиназопозитивные
●метициллинрезистентные штаммы стафилококков - это значит, что стафилококк резистентен к метициллину и автоматически ко всем бета-лактамам, имеют перекрестную резистентность линкозамидами, макролидами, фторхинолонами. Поэтому скорее всего летальный исход.
Механизм развития резистентности у стафилококков: выработка ферментов бета-лактамаз (разрушают структуру бета-лактамов).
В БЛАГОДАРНОСТЬ ЗА НАШИ СТАРАНИЯ: 4276400090754301
Оглавление - нажми и вернешься |
8 |
S.epidermidis
-коагулазонегативный
-не секретирует инвазивные и токсические субстанции
-имеет только мембранные факторы патогенности: ПГ, ТХ, ЛТК
-гидрофобный (легко прикрепляется к полимерам, применяемым в медицине -
протезы, катетеры, дренажи, искусственные сердечные клапаны) Заболевания:
сепсис
эндокардиты
артриты
поражает урогенитальный тракт
S.saprophyticus
-не секретирует инвазивные и токсические субстанции. слабо вирулентный
-имеет только мембранные факторы патогенности: ПГ, ТХ, ЛТК Заболевания:
в основном - урогенитальные инфекции
Резистентность у стафилококков: Солнечный свет - 10-12 часов Высушивание - до 6 месяцев
Температура 80 градусов по Цельсию 20-30 минут Сухожаровой шкаф - 2 часа
Методы лабораторной диагностики:
Бактериологический
Бактериоскопический
Серологический (РНГА, ИФА)
Биологический (стафилококковая пищевая интоксикация)
Материал для исследования:
1.Мокрота
2.Рвотные массы
3.Пищевые продукты
4.Кровь
5.Гной
6.Отделяемое слизистых
7.Моча
Бактериологический метод:
В БЛАГОДАРНОСТЬ ЗА НАШИ СТАРАНИЯ: 4276400090754301
Оглавление - нажми и вернешься |
9 |
Метод Дригальского - механическое разобщение микроорганизмов.
●Первый этап - посев на поверхность плотной питательной среды происходит на нескольких секторах (обычно 3-4). Сначала петлей собирается бактериологический материал. Затем петлей происходит засев на первый сектор – от периферии в центр. Затем, этой же петлей происходит посев во втором, третьем и четвертом, если есть необходимость, секторах.
●Ставим в термостат и через 24 часа вынимаем.
●1 секторсплошной рост, 2 сектор - есть изолированные колонии, 3 сектор - только изолированные колонии МО.
●Смотрим, где изолированная колония. Для каждой колонии предварительно готовим мазок, окрашиваем по методу Грама. Смотрим на культуральные свойства, характер колоний и также мы видим и морфологические свойства.
●Второй этап - идет посев на скошенный агар, т.к. площадь питательной среды увеличивается.
Можно получить большое количество биомассы МО. А в пробирке, тк открывая чашку Петри – высока вероятность заселения других микроорганизмов извне. А диаметр пробирки меньше и вероятность меньше.
●В пробирку заливается питательная среда под наклоном, так она и застывает. После этого
на нее осуществляется посев методом Шукевича (на конденсационную воду скошенного агара - в основании питательной среды, а м/о способны сами подняться наверх по скошенному агару).
●Посев осуществляется с помощью! Пламени горелки. Чтобы исключить попадание посторонних МО.
●Возможно осуществление посева методом укола, но редко.
●На третьем этапе- происходит контроль, берется петля, делается мазок, который
окрашивают по методу Грама, мы убеждаемся в чистоте культуры.
●Затем идет идентификация чистой культуры по морфологическим, биохимическим свойствам. Фаготипирование, определение чувствительности к а/б.
●Исходя из всех свойств мы определяем вид микроорганизмов.
●На четвертом этапе - учет того, что сделали на 3 этапе.
ЛЕЧЕНИЕ
Стафилококковый бактериофаг (или пиобактериофаг - там разные фаги)
Стафилококковый иммуноглобулин, анатоксин, вакцина
Антибиотики:
-защищенные пенициллины (амоксициллин/клавуланат) - когда речь идет о выработке бета-лактамаз. Клавулановая к-та приносит себя в жертву для фермента, а амоксициллин действует
-цефалоспорины 3 поколения (цефтриаксон, цефоперазон/сульбактам - похоже на клавулановую к-ту)
-макролиды (клавитромицин 14членный, азитромицин 15членный, джозамицин 16членный)
-фторхонолоны (ципрофлоксацин, левофлоксацин, моксифлоксацин)
-карбапенемы (имипинем)
-MRSA - ванкомицин, линезолид, ЦС 5 поколения - цефтаролин, цефтобипрол.
ВБЛАГОДАРНОСТЬ ЗА НАШИ СТАРАНИЯ: 4276400090754301
Оглавление - нажми и вернешься |
10 |
Стрептококки
Таксономия:
Отдел: Firmicutes семейство: Streptococcaceae род: Streptococcus
виды: Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, S.agalactiae
род: Enterococcus
виды: E. faecium, E. faecalis
Морфологическая характеристика: располагаются в виде цепочки, Гр”+”
исключение - пневмококк - диплококк -
●капула
-относится к факторам антифагоцитарной защиты => нужна для защиты от фагоцитарных клеток.
упневмококка - попарно расположенные кокки покрыты единым капсульным веществом полисахаридной культуры
уостальных стрептококков гиалуроновая капсула
●М-протеин
-дополнительный белок клеточной стенки, благодаря которому по поверхности клеток образуются бахромчатые субстанции, благодаря которым клетки защищаются от фагоцитов.
Способ дыхания:
факультативные анаэробы, НО с преобладанием аэробного метаболизма. => биохимическая идентификация
oxyоксидоредуктаза - есть только у облигатных, catкаталаза, NR+ нитратредуктаза
Идентификация
Провести тест на каталазную активность. Из всех кокков ее не имеют только стрептококки. Если не будет пузырения (выделения О2), то это стрептококки.
Типы брожения:
молочнокислое - восстановление ПВК до молочной к-ты раневые - муравьинокислое брожение, а именно ацетоиновый тип (продукты: ацетоин, бутандиол)
Биохимическая идентификация:
В БЛАГОДАРНОСТЬ ЗА НАШИ СТАРАНИЯ: 4276400090754301