6 курс / Клинические и лабораторные анализы / ВОЗ_Лабораторная_служба_в_программах_борьбы_с_туберкулезом_Часть (1)
.pdfОКРАСКА КИСЛОТОУСТОЙЧИВЫХ МИКОБАКТЕРИЙ
Проводите дополнительное окрашивание в течение 60 секунд
Тщательно промойте стекло водой. Удалите остатки влаги. Оставьте препарат высыхать на воздухе.
Не промокайте
7 . 2 Окрашивание флуорохромами
При люминесцентной микроскопии в качестве источника света используют кварцгалогеновую или ртутную лампу. Преимущество люминесцентного метода микроскопии заключается в том, что используя объектив с меньшим увеличением можно быстрее просмотреть большую площадь препарата. Недостатком является то, что при использовании объектива с меньшим увеличением, выше вероятность ошибочно принять артефакт за КУМ. Поэтому мы настоятельно рекомендуем, чтобы при выявлении «подозрительных микроорганизмов» обязательно было проведено исследование под большим увеличением, и чтобы при позитивном результате бактериоскопии препаратов, окрашенных флуорохромами, была проведена подтверждающая микроскопия препаратов, окрашенных по Цилю-Нильсену.
Для бактериоскопического исследования на туберкулез не следует приобретать очень дорогие современные люминесцентные микроскопы. Вполне достаточно иметь микроскоп со следующими техническими характеристиками:
•Достаточно галогеновых ламп. Обычно они уже встроены в микроскоп и имеют гораздо меньшую стоимость по сравнению с ртутными лампами, у которых, кроме того, еще и ограничен срок работы. Галогеновые лампы нагреваются практически сразу.
•Необходим достаточно мощный световой поток, поэтому значение апертуры конденсора и двух объективов должно быть достаточно большим. Необходимо иметь 3 объектива: например, с увеличениями в 10 и 25 раз для предварительного просмотра препаратов и с увеличением в 45 раз для уточнения морфологии выявленных элементов.
30
ЛАБОРАТОРНАЯ СЛУЖБА В ПРОГРАММАХ БОРЬБЫ С ТУБЕРКУЛЕЗОМ
31
ОКРАСКА КИСЛОТОУСТОЙЧИВЫХ МИКОБАКТЕРИЙ
7 . 3
32
ЛАБОРАТОРНАЯ СЛУЖБА В ПРОГРАММАХ БОРЬБЫ С ТУБЕРКУЛЕЗОМ
Поместите маркированные предметные стекла на подставку («салазки») группами (максимально по 12 шт.) так, чтобы они не касались друг от друга
Налейте на каждое стекло достаточное количество раствора аурамина О и оставьте на 15 минут; проследите, чтобы раствор краски оставался на препаратах.
Не нагревайте препараты и не используйте полоски фильтровальной бумаги
Аурамин О
Промойте дистиллированной водой и подсушите. Водопроводная вода содержит хлор, который может повлиять на интенсивность флуоресценции
33
ОКРАСКА КИСЛОТОУСТОЙЧИВЫХ МИКОБАКТЕРИЙ
Нанесите на препарат обесцвечивающий 3%-ный кислотно-спиртовой раствор на 2 минуты
Промойте дистиллированной водой и подсушите
Нанесите на мазок раствор перманганата калия или акридинового оранжевого и оставьте для докрашивания на 2 минуты. При использовании перманганата калия
точность экспозиции имеет решающее значение, так как при передержке интенсивность флуоресценции КУМ может уменьшаться
Промойте дистиллированной водой и слейте воду
Оставьте препараты сохнуть на воздухе. Не вытирайте. Исследуйте сразу же после окрашивания
34
ЛАБОРАТОРНАЯ СЛУЖБА В ПРОГРАММАХ БОРЬБЫ С ТУБЕРКУЛЕЗОМ
8
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
8 . |
1 |
Окуляр |
|
||
|
Бинокулярная |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
насадка |
Револьвер для |
|
|
|
|
|
|
|
|
крепления |
|
|
объективов |
|
Кронштейн |
|
|
|
|
|
конденсора |
Предметный |
|
Регулирующий винт |
|
|
столик |
|
|
грубого движения |
Ирисовая апертурная |
|
тубуса (макровинт) |
диафрагма |
|
|
|
|
Винт |
Тубусодержатель |
|
||
|
|
|
|
микромеханизма |
|
|
|
|
|
(микровинт) |
Набор полевых |
|
|
|
|
|
|
|
Электрошнур |
линз |
|
Ножка или башмак |
|
|
|
|
|
микроскопа |
|
|
|
|
Объектив
Механическая платформа (препаратодержатель)
Конденсор
Вспомогательные полевые линзы
Галогеновая лампа |
Световой фильтр |
35
МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ ПРЕПАРАТОВ
8.1.1
8.1.2
8.1.3
36
ЛАБОРАТОРНАЯ СЛУЖБА В ПРОГРАММАХ БОРЬБЫ С ТУБЕРКУЛЕЗОМ
8.1.4
37
МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ ПРЕПАРАТОВ
8 . 3
38
ЛАБОРАТОРНАЯ СЛУЖБА В ПРОГРАММАХ БОРЬБЫ С ТУБЕРКУЛЕЗОМ
39