Глава 6. Препараты, применяемые против ботулизма

Возбудитель ботулизма относится к роду Clostridium, виду C. botulinum и входит в группу 17 (Спорообразующие грамположительные палочки и кокки) определителя Берджи. C. botulinum - это крупные палочки, образующие субтерминальные споры. Подвижны, перитрихи. Капсулы не имеют Грамположительны. Облигатные анаэробы. Обладают выраженной биохимической активностью. Возбудитель ботулизма имеет ряд целлюлярных и экстрацеллюлярных антигенов. Последние представлены антигенами экзотоксина. Известно 7 типов токсинов C. botulinum (A, B, C, D, E и G). Наиболее распространены типы A, B и Е. Фактором вирулентности C. botulinum является продукция экзотоксина. C. botulinum широко распространены в природе; их обнаруживают в организме различных животных, рыб, ракообразных, в почве и воде. Благодаря образованию спор C. botulinum длительно сохраняется во внешней среде. Из почвы и воды он может попадать в пищевые продукты и при несоблюдении технологии приготовления пищевых продуктов размножаться в них и выделять экзотоксин. Экзотоксин C. botulinum - самый сильный из всех биологических ядов. Действие экзотоксина обусловлено блокированием освобождения ацетилхолина или его образования в синапсах и нейромышечных соединениях, в результате чего развиваются параличи.

Ботулизм как самостоятельная нозологическая форма относится к пищевым токсикозам, это сапронозная или зоонозная острая инфекция, характеризующаяся тяжелой интоксикацией, с преимущественным поражением ЦНС. Развиваются зрительные расстройства, нарушения координации глазных мышц, диплопия, затруднение глотания и расстройство речи. Признаки бульбарного паралича прогрессируют, и наступает смерть от паралича дыхательных мышц или остановки сердца. Постинфекционный иммунитет вариант-специфический. Микробиологическая диагностика основана на обнаружении экзотоксина в исследуемом материале методами иммуноиндикации и постановке биологической пробы на белых мышах (реакция токсиннейтрализации). Для лечения обязательно используют антитоксическую противоботулинистическую сыворотку. Специфическая профилактика не применяется.

Противоботулиновые антитоксические сывороткиочищенные и концентрированные Единственно надежным, всеми признанным средством для лечения заболевших ботулизмом являются специфические типовые антитоксические сыворотки, выпускают в жидком виде. Препарат изготовляют из нативных противоботулиновых сывороток, получаемых от лошадей, гипериммунизированных анатоксинами или токсинами возбудителей ботулизма соответствующих типов. Противоботулиновые сыворотки выпускают в виде комплекта моновалентных сывороток, включающего по 1 ампуле сыворотки каждого типа (A, B, C, D, E, F), или в виде поливалентной сыворотки, содержащей в 1  ампуле антитоксины трех, четырех или более типов. В ампуле с моновалентной сывороткой содержится одна лечебная доза антитоксина соответствующего типа, которая составляет для типа А - 10000 МЕ, типа В - 5000 МЕ, типа С - 10000 МЕ, типа Е - 10000 МЕ, типа F - 3000 МЕ. В ампуле с поливалентной сывороткой содержится указанное количество международных единиц антитоксинов всех типов. Сыворотки представляют собой прозрачную или незначительно опалесцирующую жидкость от бледно золотистого до желтоватого цвета. В коробки с противоботулинистическими сыворотками вкладывают также необходимое количество ампул с разведенной 1:100 лошадиной сывороткой, применяемой для внутрикожной пробы с целью выявления чувствительности пациента к лошадиному белку. С лечебной целью при первых признаках заболевания ботулизмом больному вводят поливалентную сыворотку или смесь моновалентных сывороток в соответствующих количествах:  10000 - 15000 МЕ типа А, 5000 - 7500 МЕ типа В и 15000 МЕ типа Е. Сыворотку предварительно подогревают до 37 °С. Вводят внутривенно. С профилактической целью сыворотку вводят людям, употреблявшим одновременно с больным продукты, которые вызвали отравление. Сыворотку вводят в дозе 1000-2000 МЕ каждого типа внутримышечно строго в соответствии с наставлением по ее применению. Сыворотки необходимо хранить в темном сухом помещении при температуре 3-10 °С. Сыворотки, подвергшиеся замораживанию и оттаиванию, но с сохранившимися физическими свойствами, годны к применению. Срок годности сывороток - 2 года. По истечении этого срока сыворотки могут быть направлены для переконтроля и продления годности в изготовивший их институт.

Диагностические типовые сыворотки Для подтверждения клинического диагноза ботулизма у человека и уточнения случаев, подозрительных на ботулизм, производят исследование крови и выделений больного, а также подозрительных продуктов, послуживших причиной отравления, в двух направлениях: получение чистой культуры и обнаружение токсина. Для определения типовой принадлежности выделенной чистой культуры возбудителя ботулизма, кроме изучения морфологии, культуральных и биохимических свойств, ставится реакция агглютинации с известными типовыми агглютинирующими сыворотками, а также реакция нейтрализации с антитоксическими типовыми сыворотками для обнаружения ботулинового токсина. С целью обнаружения ботулинового токсина в организме больного и во внешней среде выпускаются типовые антитоксические и агглютинирующие сыворотки. Для получения антитоксических типовых сывороток применяются лошади. Животные гипериммунизируются типовыми анатоксинами, полученными из токсинов, продуцируемых тщательно проверенными штаммами возбудителей ботулизма типов А, В, С, Е, и F.  Диагностические сыворотки выпускаются только моновалентными, нативными, в сухом виде. Разливаются по 1 мл в ампулы с титром для А типа 200-400 МЕ, В типа 100-200 МЕ, С типа  200-300 МЕ, Е типа 200-400 МЕ, F типа 50-100 МЕ. Перед разливкой и сушкой сыворотка проверяется на содержание антитоксина в перекрестной реакции нейтрализации со стандартными токсинами всех типов возбудителей ботулизма, а также на стерильность. Н а ампулы наклеиваются этикетки, заполненные по стандарту. Диагностические антитоксические типовые ботулинистические сыворотки применяются для постановки реакции нейтрализации с целью распознания токсина, находящегося в различных субстратах и в бульонных культурах при выделении возбудителя. Агглютинирующие типовые сыворотки получают для определения видовой и типовой принадлежностей возбудителя ботулизма при выделении чистой культуры его; ботулинические агглютинирующие сыворотки готовятся на кроликах. Для иммунизации применяют односуточную культуру, к которой добавляют 0,5-0,8 % формалина. После проверки суспензии бактерий на стерильность и безвредность кроликам вводят в вену уха по 0,5; 1,0; 2,0 и 2,0 мл убитой культуры с промежутками в 5-6 дней. При первой инъекции вводится 500 млн. микробных тел. В дальнейшем дозы удваиваются и достигают 20-50 млрд. микробных тел. На 6-8 день полсе последней инъекции у кроликов берется кровь. Полученная сыворотка проверяется на стерильность и титруется. Агглютинирующие сыворотки выпускаются с титром от 1:5000 до 1: 20000. Срок годности диагностических сывороток - 2 года.