6 курс / Кардиология / Хламидийно_ассоциированные_инфекции_Хворик_Д_Ф_

—контроль растворов красителей (внешнее состоя-

ние, срок годности), условия и сроки хранения;

—контроль транспортных и питательных сред, реа-

гентов (внешнее состояние, срок годности), усло-

вия и сроки хранения;

качество лабораторной посуды.

Мероприятия аналитического этапа:

—включение официально зарегистрированных кон-

трольных материалов;

—соблюдение технологии окраски в соответствии с

инструкцией производителя;

—контроль качества среды;

—учет результатов в соответствии с официально

признанными критериями.

Мероприятия постаналитического этапа:

—правильность внесения результатов в бланк ис-

следования и формулировка лабораторного заклю-

чения;

—своевременное доведение информации до врача,

назначившего исследование.

Перечень воз-

Нарушение техники взятия, правил хранения и

можных ошибок

транспортировки клинического материала. Техника

при выполнении

взятия материала, правила хранения и транспорти-

и пути их устра-

ровки биологического материала должны прово-

нения

диться в строгом соответствии с Приложением 2

настоящей инструкции.

Неудовлетворительное техническое состояние обо-

рудования. Оборудование, используемое для про-

ведения культуральных исследований, должно

иметь соответствующие сертификаты о государст-

венной поверке и метрологической аттестации.

Нарушение методики проведения культурального

исследования, окраски по Романовскому – Гимза,

ПИФ. Проведение культурального исследования с

последующей окраской по Романовскому – Гимза

или постановкой реакции прямой иммунофлуорес-

ценции для выявления возбудителя C.trachomatis

должно проводиться в строгом соответствии с ин-

струкцией производителя тест-системы, а также

настоящей инструкцией.

Противопоказа-

Противопоказаний для применения нет.

ния для приме-

нения

Название

Описание

Принцип

Метод основан на взаимодействии хламидийных ан-

тител, меченых ФИТЦ, с поверхностным антигеном

C.trachomatis.

Материал для

соскоб из уретры;

исследования

соскоб из цервикального канала;

отделяемое из заднего свода влагалища у девочек.

Необходимое

1)

люминесцентный микроскоп (или оптический

оборудование

микроскоп с люминесцентной насадкой) с системой

и материалы

фильтров для ФИТЦ (возбуждающий свет длиной

волны <490 нм и эмиссией 520 нм);

2)

термостат;

3)

влажная камера;

4)

перчатки медицинские;

5)

емкости для сбора и обработки стекол;

6)

предметные стекла трехлуночные;

7)

покровные стекла;

8)

дозаторы переменного объема;

9)

карандаш для маркировки стекол.

Реагенты

ацетон или 96° этиловый спирт;

дистиллированная вода;

буферный раствор рН 7–8,5;

нефлуоресцирующее иммерсионное масло;

дезинфицирующие растворы;

коммерческий набор для проведения реакции пря-

мой иммунофлюоресценции, зарегистрированный в

МЗ РБ.

Подготовка к

Высушенный на воздухе мазок фиксируют холод-

проведению

ным ацетоном или 96° этиловым спиртом в течение

анализа

1–2 мин. Стекло с фиксированным мазком может

храниться при температуре +4 °С в течение 3 суток,

при -20°С – в течение 1 месяца.

Приготовление реагентов проводится в соответствии

с инструкцией производителя.

Постановка

Постановка реакции прямой иммунофлуоресценции

ПИФ

проводится в соответствии с инструкцией произво-

дителя.

Рекомендуется использовать масляную иммерсию с

объективом МИ 90х и окулярами 4-7х, либо водно-

иммерсионную систему с объективами ВИ 60-70х и

окулярами 7х. Используют микроскоп с фильтрами,

обеспечивающими возбуждающий свет с длиной

волны не более 490 нм и эмиссию с длиной волны

520 нм.

Учет и оценка

Для оценки качества взятия материала просматри-

результатов

вают не менее 10 полей зрения, используя увеличе-

ние люминесцентного микроскопа х400. В одном

поле зрения должно быть не менее 5 клеток цилинд-

рического эпителия. Результат считается положи-

тельным, если в мазке регистрируют ярко-зеленое

свечение в виде кофейного зерна (элементарные

тельца – основной критерий положительного резуль-

тата). Эпителиальные клетки окрашены в красно-

оранжевый цвет.

Результат считается отрицательным, если в мазке от-

сутствует специфическое свечение при обязательном

наличии не менее 50 эпителиальных клеток.

Заключение

Антиген, специфичный для C.trachomatis, выявлен.

лабораторного

Антиген, специфичный для C.trachomatis, не выяв-

исследования

лен.

Контроль

На преаналитическом этапе оценивается:

качества

взятие биологического материала;

выполнение требований хранения и доставки мате-

риала в лабораторию;

выполнение требований маркировки проб и соот-

ветствия маркировки пробы маркировке направле-

ния;

контроль приготовления реагентов, условия и сро-

ки хранения;

качество лабораторной посуды.

Мероприятия аналитического этапа:

включение официально зарегистрированных кон-

трольных материалов;

соблюдение технологии постановки реакции пря-

мой иммунофлуоресценции в соответствии с инст-

рукцией производителя;

учет результатов в соответствии с официально

признанными критериями.

Мероприятия постаналитического этапа:

правильность внесения результатов в бланк иссле-

дования и формулировка лабораторного заключения;

своевременное доведение информации до врача,

назначившего исследование.

Перечень

Нарушение техники взятия, правил хранения и

возможных

транспортировки клинического материала.

ошибок при

Неудовлетворительное техническое состояние обо-

выполнении и

рудования. Оборудование, используемое для прове-

пути их устра-

дения реакции прямой иммунофлуоресценции,

нения

должно иметь соответствующие сертификаты о го-

сударственной поверке и метрологической аттеста-

ции.

Нарушение методики проведения реакции иммуноф-

луоресценции. Постановка реакции ПИФ для выяв-

ления антигена, специфичного для возбудителя

C.trachomatis, должна проводиться в строгом соот-

ветствии с данной инструкцией

Противопока-

Данный метод не может быть использован в реше-

зания для при-

нии спорных вопросов. Метод не может быть ис-

менения

пользован в качестве критерия излеченности. Метод

не может применяться для исследования биологиче-

ского материала, полученного неинвазивным спосо-

бом (моча, сперма).

Cкрининговые исследования

(ИФА, ПИФ)

ИФА “+”

ИФА “-”

ПИФ “-”

ПИФ “+”

ПЦР

ПЦР “-”

ПЦР “-”

отрицательный

отрицательный

результат

результат

ПЦР “+”

отсутствие уро-

отсутствие уро-

генитального

генитального

хламидиоза

хламидиоза

100–468

469–1,5х104

1,51х104–4,7х107 ко-

копий/мл

копий/мл

пий/мл

сомнительный

положительный

положительный

результат

результат

результат

диагностически зна-

высокая относитель-

культураль-

чимая относительная

ная концентрация

ные исследования

концентрация

культура “–”

культура “+”

отрицательный

результат

отсутствие уро-

назначение

генитального

этиотропной и иммуно-

хламидиоза

корригирующей

терапии

Повторное обследова-

ние через 3 мес.

Динамическое наблю-

дение угинеколога,

уролога, дерматовене-

ролога

ЛПУ

Обязательная

Дополнительная

(по показаниям)

В условиях

Физикальный осмотр.

Микроскопическое

поликлиники

Исследование крови на антите-

исследование

натив-

ла к T.рallidum.

ного мазка отделяе-

ИФА-ВИЧ. ИФА-Hbs антиген,

мого

мочеполовых

ИФА-HCV.

органов.

Микроскопическое

исследова-

Микроскопическое,

ние отделяемого мочеполовых

бактериологическое

органов.

исследование,

Бактериологическое

исследо-

МАНК,

РИФ,

ИФА

вание отделяемого

мочеполо-

(на антигены) на

вых органов на N.gonorrhoeae.

ИППП

(применяется

МАНК (беременным – на всех

один из

предложен-

уровнях) на C.trachomatis, РИФ

ных методов).

или ИФА на хламидийный ан-

Общий анализ крови.

тиген.

Общий анализ мочи.

Исследование секрета предста-

Флюорография.

тельной железы.

В условиях

Физикальный осмотр.

Микроскопическое

стационара

Исследование крови на антите-

исследование

натив-

ла к T.pallidum.

ного мазка отделяе-

ИФА-ВИЧ. ИФА-Hbs антиген,

мого

мочеполовых

ИФА-HCV.

органов.

Микроскопическое

исследова-

Микроскопическое,

ние отделяемого мочеполовых

бактериологическое

органов.

исследование,

Бактериологическое

исследо-

МАНК,

РИФ,

ИФА

вание отделяемого

мочеполо-

(на антигены) на

вых органов на N. gonorrhoeae.

ИППП

(применяется

МАНК (беременным – на всех

один из

предложен-

уровнях) на C.trachomatis, РИФ

ных методов).

или ИФА на хламидийный ан-

тиген.

Исследование секрета предста-

тельной железы.

Общий анализ крови.

Общий анализ мочи.

Флюорография.

В

условиях

Физикальный осмотр.

Микроскопическое

ис-

поликлиники

Общий анализ крови.

следование

нативного

Общий анализ мочи.

мазка отделяемого моче-

Исследование крови на ан-

половых органов.

титела к T.pallidum.

Микроскопическое,

бак-

ИФА-ВИЧ.

териологическое исследо-

ИФА-Hbs антиген, ИФА-

вание, МАНК, РИФ, ИФА

HCV.

(на антигены) на ИППП

Микроскопическое

иссле-

(применяется

один

из

дование

отделяемого

мо-

предложенных методов).

чеполовых органов.

УЗИ органов малого таза.

Бактериологическое иссле-

Консультация врача

аку-

дование

отделяемого

мо-

шера-гинеколога (врача-

чеполовых органов

на

N.

уролога).

gonorrhoeae.

Биохимическое

исследо-

МАНК (беременным – на

вание крови: определение

всех

уровнях)

на

общего билирубина, об-

C.trachomatis,

РИФ

или

щего белка, АлАТ, АсАТ,

ИФА на хламидийный ан-

ревматоидного

фактора,

тиген.

С-реактивного белка.

Исследование

секрета

Флюорография.

предстательной железы.

В

условиях

Физикальный осмотр.

Микроскопическое

ис-

стационара

Общий анализ крови.

следование

нативного

Общий анализ мочи.

мазка отделяемого моче-

Исследование крови на ан-

половых органов.

титела к T.pallidum.

Микроскопическое,

бак-

ИФА-ВИЧ.

териологическое исследо-

ИФА-Hbs антиген, ИФА-

вание, МАНК, РИФ, ИФА

HCV.

(на антигены) на ИППП

Микроскопическое

иссле-

(применяется

один

из

дование

отделяемого

мо-

предложенных методов).

чеполовых органов.

УЗИ органов малого таза.

Бактериологическое иссле-

Консультация врача

аку-

дование

отделяемого

мо-

шера-гинеколога (врача-

чеполовых

органов

на

уролога).

N.gonorrhoeae.

Биохимическое

исследо-

МАНК (беременным – на

вание крови: определение

всех

уровнях)

на

общего билирубина, об-

C.trachomatis,

РИФ

или

щего белка, АлАТ, АсАТ,

ИФА на хламидийный ан-

ревматоидного

фактора,

тиген.

С-реактивного белка.

Исследование

секрета

предстательной железы.

Флюорография.

В

условиях

Физикальный осмотр.

Микроскопическое

ис-

поликлиники

Исследование крови на анти-

следование

нативного

тела к T.pallidum.

мазка отделяемого

мо-

ИФА-ВИЧ.

чеполовых органов.

ИФА-Hbs антиген, ИФА-

Микроскопическое,

HCV.

бактериологическое

ис-

Микроскопическое

исследо-

следование,

МАНК,

вание

отделяемого

мочепо-

РИФ, ИФА (на антиге-

ловых органов

ны) на ИППП (приме-

Бактериологическое

иссле-

няется один из предло-

дование отделяемого прямой

женных методов.)

кишки и мочеполовых орга-

Консультация

врача-

нов на N.gonorrhoeae

проктолога.

МАНК (беременным – на

Общий анализ крови.

всех

уровнях)

на

Общий анализ мочи.

C.trachomatis, РИФ или ИФА

Флюорография.

на хламидийный антиген.

Исследование секрета пред-

стательной железы.

В

условиях

Физикальный осмотр.

Микроскопическое

ис-

стационара

Исследование крови на анти-

следование

нативного

тела к T.pallidum.

мазка отделяемого

мо-

ИФА-ВИЧ, ИФА-Hbs анти-

чеполовых органов.

ген, ИФА-HCV.

Микроскопическое,

Микроскопическое

исследо-

бактериологическое

ис-

вание

отделяемого

мочепо-

следование,

МАНК,

ловых органов.

РИФ, ИФА (на антиге-

Бактериологическое

иссле-

ны) на ИППП (приме-

дование отделяемого прямой

няется один из предло-

кишки и мочеполовых орга-

женных методов).

нов на N.gonorrhoeae.

Консультация

врача-

МАНК (беременным – на

проктолога.

всех

уровнях)

на

C.trachomatis, РИФ или ИФА

на хламидийный антиген.

Исследование секрета пред-

стательной железы.

Общий анализ крови.

Общий анализ мочи.

Флюорография.

В

условиях

Физикальный осмотр.

Микроскопическое

ис-

поликлиники

Исследование крови на анти-

следование

нативного

тела к T.pallidum.

мазка отделяемого

мо-

ИФА-ВИЧ, ИФА-Hbs анти-

чеполовых органов.

ген, ИФА-HCV.

Микроскопическое,

Микроскопическое

исследо-

бактериологическое

ис-

вание

отделяемого

мочепо-

следование,

МАНК,

ловых органов.

РИФ, ИФА (на антиге-

Бактериологическое

иссле-

ны) на ИППП (приме-

дование отделяемого глотки

няется один из предло-

и мочеполовых органов на

женных методов).

N.gonorrhoeae.

Консультация

врача-

МАНК (беременным – на

оториноларинголога.

всех

уровнях)

на

Общий анализ крови.

C.trachomatis, РИФ или ИФА

Общий анализ мочи.

на хламидийный антиген.

Флюорография.

В

условиях

Физикальный осмотр.

Микроскопическое

ис-

стационара

Общий анализ крови.

следование

нативного

Общий анализ мочи.

мазка отделяемого

мо-

Исследование крови на анти-

чеполовых органов.

тела к T.pallidum.

Микроскопическое,

ИФА-ВИЧ.

бактериологическое

ис-

ИФА-Hbs антиген, ИФА-

следование,

МАНК,

HCV.

РИФ, ИФА (на антиге-

Микроскопическое

исследо-

ны) на ИППП (приме-

вание

отделяемого

мочепо-

няется один из предло-

ловых органов.

женных методов).

Бактериологическое

иссле-

Консультация

врача-

дование отделяемого глотки

оториноларинголога.

и мочеполовых органов на

N.gonorrhoeae.

МАНК (беременным – на

всех

уровнях)

на

C.trachomatis, РИФ или ИФА

на хламидийный антиген.

Флюорография.