2 курс / Биохимия / Экзаменационные_практические_работы_по_биохимии

№

Название

Принцип метода

Общепринятые

Клинико-диагностическое значение

метода

интервалы нормы

1.

Количественн

Количество

20

–

30

мг

Экскреция

витамина

С

с

мочой

ое

аскорбиновой

кислоты

аскорбиновой

снижается

при

цинге,

острых

и

определение

определяется

кислоты за сутки

хронических

инфекционных

витамина С в

титриметрически

по

заболеваниях,

при

недостаточном

моче.

количеству

2,6-

поступлении вит. С с пищей.

дихлорфенолиндо-

ДИАГНОСТИКА

фенола,

пошедшего

на

ГИПОВИТАМИНОЗА

С:

при

титрование,

и

введении в организм 100 мг

рассчитывается

на

аскорбиновой

кислоты

у

здорового

суточное

количество

человека концентрация витамина С в

мочи.

2,6-

моче

увеличивается.

При

дихлорфенолиндофе-

гиповитаминозе ткани

задерживают

нол

(синего

цвета)

аскорбиновую

кислоту

и

ее

восстанавливается

и

выведение из организма снижается.

обесцвечивается

витамином С.

2.

Количественн

Пировиноградная

0.3 – 0.9 мг%

Пировиноградная

кислота является

ое

кислота

в

щелочной

34 – 102 ммоль/л

продуктом

метаболизма

углеводов,

определение

среде

дает

с

аминокислот, глицерина в клетке.

пировиноград

салициловым

Увеличение

количества

пирувата

в

ной

кислоты

альдегидом

оранжевое

крови

наблюдается

при

тканевой

в

сыворотке

окрашивание,

гипоксии и связано с торможением ее

крови.

пропорциональное

окислительного

содержанию

пирувата.

декарбоксилирования и дальнейшего

Оптическая

плотность

окисления в ЦТК. Увеличение: при

раствора

определяется

гиповитаминозах В1, В2, В3, В5, ИБС.

на ФЭКе.

3.

Количественн

Амилаза

сыворотки

16

–

30

мг

Определение

активности

амилазы

ое

крови

гидролизует

крахмала,

сыворотки

крови

является

определение

крахмал

в

течение

60

гидролизуемого за

диагностическим

тестом

при

активности

минут.

Остаток

1

час

1

мл

заболеваниях

поджелудочной

амилазы

крахмала

выявляется

сыворотки крови.

железы.

Фермент

обладает

сыворотки

качественной

реакцией

небольшой

молекулярной

массой

и

крови

с

йодом.

Активность

размерами, легко проникает в кровь

амилокластич

амилазы

определяется

из

поджелудочной

железы

и

еским

по

разности

окраски

кишечника, фильтруется в мочу.

методом.

между

контролем

и

Увеличение

активности

амилазы

опытом на ФЭКе.

крови наблюдается при заболеваниях

поджелудочной и околоушной желез,

диабетическом

кетоацидозе,

заболеваниях желчных путей.

4.

Количественн

Моча

разводится

в

16-34

мг

Увеличивается

при

острых

ое

геометрической

крахмала,

панкреатитах

(10-30

раз),

определение

прогрессии.

Каждое

гидролизованного

обострениях

хронических

активности

разведение инкубируют

за 30 мин 1 мл

панкреатитах, опухолях и травмах

амилазы

с крахмалом

в течение

мочи

поджелудочной

железы.

(диастазы)

30

минут.

Гиперамилаземия

наблюдается

при

мочи

по

Негидролизованный

паротитах, опухолях и травмах

Вольгемуту.

крахмал определяют по

слюнных

желез,

слюнокаменной

реакции

с

иодом.

болезни.

Снижение

активности

Активность

амилазы

амилазы наблюдается при сахарном

расчитывается

по

диабете.

наибольшему

разведению,

способному

гидролизовать крахмал.

5.

Количественн

Пировиноградная

10 – 15 мг/сут.

Повышенное выделение

пирувата с

ое

кислота дает с 2,4-

мочой

наблюдается

при острых

определение

динитрофенилгидразино

гепатитах, мышечной дистрофии,

пировиноград

м

фенилгидразоны,

пневмониях.

ной кислоты

окрашенные

в

в моче.

коричневый

цвет,

интенсивность которого

пропорциональна

содержанию

пирувата.

Определение

проводится на ФЭКе.

6.

Количественн

Глюкоза

окисляется

3.3 – 5.5 ммоль/л

Гипергликемии

наблюдаются

при:

ое

глюкозооксидазой

с

60 - 100 мг%

сахарном диабете, с. Иценко-

определение

образованием

Н2О2.

кушинга, акромегалии, панкреатитах,

глюкозы

в

Перекись

водорода

тиреотоксикозе,

феохромоцитоме,

крови

образует

окрашенное

шоке. Также при увеличении приема

глюкозооксид

соединение

с

глюкозы в пище, при психическом

азным

энзимохромогенным

возбуждении.

методом.

реактивом,

Гипогликемии

наблюдаются

при:

интенсивность которого

мальабсорбции

дисахаридов

и

соответствует

глюкозы-галактозы,

галактоземии,

концентрации

глюкозы.

гликогенозах I, II, VI, гипогликемии

Определение на ФЭКе.

новорожденных, инсулиновом шоке,

ацетономической

–рвоте,

квашиоркоре, болезни Аддисона,

гипофункции гипофиза,

щитовидной

железы.

7.

Определение

Титриметрический

0.7 – 1.3 ммоль/ч

Снижение

активности

каталазы

активности

метод.

Активность

наблюдается

при

инфекционных

каталазы

по

каталазы

определяется

заболеваниях

(брюшной

тиф,

Баху

и

по

ее

способности

скарлатина, малярия, туберкулез

Зубковой

в

разрушать

перекись

легких), остром периоде вирусного

крови.

водорода

в течение

60

гепатита,

при

хронических

минут.

отравлениях ртутью, фосфором,

мышьяком, свинцом.

Увеличивается

активность

при

бронхо-легочной патологии у детей,

при

оперативных

вмешательствах

при местной анестезии.

8.

Определение

Проба

основана

на

Отсутствует

Появление глюкозы в моче: сахарный

глюкозы

в

редуцирующих

диабет, кома диабетическая, с.

моче

свойствах

глюкозы.

Иценко-Кушинга,

мальабсорбция

качественной

Глюкоза

глюкозы-галактозы,

реакцией

восстанавливает

гликоглицинурия,

гемохроматоз,

Бенедикта.

гидроксид

меди

до

острый

тяжелый

панкреатит,

гидрата закиси меди.

акромегалия, сепсис, с. де Тони-

Дебре-Фанкоми,

тиреотоксикоз,

кишечный токсикоз, цистиноз.

9.

Определение

Кетоновые

тела

Отсутствуют

Кетонурия

является

следствием

кетоновых

(ацетоацетат,

кетонемии и диагностическим тестом

тел в моче.

оксибутират, ацетон) в

при сахарном диабете. Ацетил-КоА

кислой

среде

с

образуется

в результате

окисления

нитропруссидом натрия

жирных

кислот,

при диабете

дает

красное

накапливается в клетках, так как его

окрашивание.

окисление в ЦТК снижается.

Избыток ацетил КоА идет на синтез

кетоновых тел, что ведет к кетонемии

и кетонурии.

10.

Количественн

Общие липиды крови –

4 – 8 г/л

При патологии чаще наблюдается

ое

это

ТАГ,

жирные

увеличение

содержания

общих

определение

кислоты,

ФЛ,

липидов за счет той или иной

общих

холестерин,

фракции

(гиперлипемия).

липидов

в

находящиеся

в

Концентрация общих липидов крови

сыворотке

различных

фракциях

увеличивается

при

ожирении,

крови.

липопротеинов

крови.

атеросклерозе, ИБС, при сахарном

После гидролиза серной

диабете, циррозе печени, липоидном

кислотой

с

циррозе, пенкреатите.

фосфованилиновым

реактивом

появляется

красное

окрашивание,

интенсивность которого

пропорциональна

содержанию липидов и

измеряется на ФЭКе.

11.

Количественн

ЛПНП

способны

3 – 4.5 г/л

Увеличение ЛПНП наблюдается при

ое

осаждаться

в

наследственном

холестеринозе,

определение

присутствии

хлорида

сахарном

диабете,

нефрозах,

содержания

кальция и гепарина. По

гепатитах, хроническом алкоголизме,

ЛПНП

в

степени

помутнения

ксантоматозе, ожирении.

сыворотке

раствора

судят

о

крови.

концентрации

ЛПНП

в

сыворотке крови.

12.

Количественн

При

взаимодействии

3.9- 6.6 ммоль/л

Гиперхолестеринемия

наблюдается

ое

холестерина с хлоридом

150 – 250 мг%

при: атеросклерозе, наследственных

определение

железа

в присутствии

гиперхолестеринозах,

сахарном

общего

ледяной

уксусной

диабете,

гепатитах,

нефрозах,

холестерина в

кислоты, конц. серной

ожирении.

сыворотке

кислоты

появляется

крови

фиолетовое

методом

окрашивание,

Златкис-Зака.

интенсивность которого

пропорциональна

содержанию

холестерина.

13.

Определение

К=Х – Х ЛВП

Здоровые 20 – 30

Индекс

атерогенности

является

холестеринов

ХЛВП

лет 2 – 2.5

прогностическим

показателем

ого

индекса

Старше 30 лет 3 –

развития атеросклероза.

атерогенност

3.5

и.

Больные

атеросклерозом 4

- 7

14.

Наличие

Для

реакции

на

20 – 40 титр. ед.

В клинической

практике

широко

свободной

свободную

HCl

используется как качественный, так и

HCl

в

используют

бумагу

количественный

метод

анализа

желудочном

Конго. В сильно кислой

желудочного

содержимого.

содеожимом.

среде

Конго

имеет

Патологические

изменения

синюю окраску, а в

содержания HCl: гиперхлоргидрия –

слабо

кислой,

увеличение

свободной

HCl

нейтральной

и

характерно

для

гиперацидного

Определение

щелочной – красную.

гастрита, язвы желудка и 12-

свободной

перстной кишки.

HCl

в

Титрование

40 – 60 титр. ед.

Гипохлоргидрия

–

снижение

желудочном

желудочного

свободной

HCl

наблюдается

при

содержимом.

содержимого

0.1N

гипоацидном гастрите.

раствором

NaOH

в

Ахлоргидрия

–

полное

отсутствие

присутствии

HCl в желудочном содержимом.

фенолфталеина

и

Повышение

общей

кислотности

диметиламиноазобензол

более 60 т. ед. – гиперацидитас (язва

а.

О

содержании

желудка,

12-перстной

кишки,

свободной HCl судят по

гиперацидный гастрит). Снижение

количеству 0.1 N NaOH,

общей кислотности (менее 40 т.ед.) –

пошедшего

на

гипоацидитас

наблюдается

при

титрование

100

мл

гипоацидном

гастрите,

снижении

желудочного

секреторной

функции

обкладочных

содержимого

клеток слизичтой желудка.

15.

Исследование

Реакция

Уффельмана с

Молочная

кислота

может

быть

патологическ

фенолятом

железа.

продуктом,

образующимся

при

ого

Молочная

кислота

развитии раковой опухоли.

желудочного

образует

железную

содержимого:

соль,

при

этом

а)

молочная

фиолетовая

окраска

кислота

фенолята

железа

переходит

в

желто-

зеленую (железная соль

молочной кислоты)

16.

Б) кровь

Бензидиновая

проба

Кровь

обнаруживается

при

основана

на

изъязвлении слизистой желудка, а

способности

также при распаде раковой опухоли.

гемоглобина

катализировать

окисление

бензидина

Н2О2 с образованием

продуктов синего цвета.

17.

В)

Определяют

определение

титроваанием

дефицита HCl

желудосного

содержимого 0.1N HCl в

присутствии

метилоранжа.

Рассчитывают на 100 мл

желудочного

содержимого,

титрование

ведут до

появления

разницы

между

опытной

и

контрольной

пробой

(розовый цвет)

18.

Количественн

Определение

20 – 40 мг%

Подъем

уровня остаточного

азота

ое

остаточного азота ведут

15 – 25 ммоль/л

(азотемия) наблюдается при ряде

определение

в

безбелковом

патологических

состояний.

В

остаточного

фильтрате

крови.

При

клинической

практике

азотемию

азота крови.

нагревании

с

конц.

подразделяют

на

2

типа:

серной

кислотой

ретенционную

и

продукционную.

безбелковый

фильтрат

Ретенционная в основном зависит от

минерализуется,

затем

недостаточной

функции

почек

и

определяются

обусловлена недостатком мочевины.

колориметрически

с

Продукционная

азотемия

связана

с

реактивом

Несслера.

поступлением

в

кровоток

Сульфат

аммония

избыточного

количества

образует

с

реактивом

азотсодержащих

веществ,

как

Несслера

желто-

правило, за счет повышенного

оранжевое

распада

тканевых

белков

при

окрашивание.

Расчет

сохраненной

выделительной

ведут

по

количеству

функции

почек.

Повышенное

стандартного

раствора

содержание

остаточного

азота

NH4Cl, пошедшего на

(свыше 80 – 90 мг%) – уремия.

титрование

опытной

пробы:

(А · 0.05) ·100% = мг%

0.066

мг% = 0.714 = ммоль/л,

где А

–

количество

стандартного

раствора,

пошедшего

на

титрование.

19. Белок плазмы

В

основу

метода

65-85 г/л

Гиперпротеинемия

–

увеличение

крови

положена

зависимость

6.5-8.5 мг%

общего

содержания белков

плазмы

А) экспресс-

между

содержанием

крови наблюдается при диарее у

метод (метод

белков

в

плазме

и

детей,

рвоте,

непроходимости

«висящей»

цельной

крови

и

ее

верхнего отдела тонкой кишки,

капли)

удельным

весом.

обширных ожогах. Потеря воды

Определение удельного

организмом приводит к повышению

веса

плазмы и цельной

концентрации белка в крови: а)

крови

осуществляется

относительная

гиперпротеинемия

путем

погружения

связана с потерей воды организмом

капли в растворы CuSO4

(диарея, рвота, ожоговая болезнь,

известного

веса.

Тот

травмы);

б)

абсолютная

раствор CuSO4 , в

гиперпротеинемия

обусловлена

котором

капля

сначала

резким нарастанием глобулинов при

повисает,

а

затем

инфекциях, а также синтезом

опускается,

равен

патологических белков

или

белков

удельному

весу

«острой фазы».

исследуемой жидкости.

Гипопротеинемия

–

снижение

общего

содержания белков

плазмы

может

быть

обусловлено

с

несколькими

причинами:

а)

нарушение

белок-синтезирующей

функции

печени

(паренхиматозная

желтуха, гепатиты, цирроз печени).

Происходит

снижение

белкового

коэффициента

за

счет

снижения

синтеза альбуминов; б) задержкой

воды при заболеваниях сердечно-

сосудистой системы; в) потерей

белка с мочой

при патологии почек;

г) кровопотерями при травмах и

операциях

метод

биуретового

комплекса

Cu(OН)2 с пептидными

связями,

имеющего

розово-фиолетовое

окрашивание.

Интенсивность окраски

пропорциональна

количеству

пептидных

связей.

21. Патологическ

γ-глобулины,

β- 0-0.4 ед. мутности

При некоторых

злокачественных

ие

белки

глобулины и некоторые

заболеваниях и иммунодефицитных

плазмы

липопротеины

состояниях

в

крови

появляются

крови.

сыворотки

крови

необычные

патологические белки.

выпадают

в

осадок в

Такое

явление

называется

присутствии буферного

парапротеинемией.

раствора

с

рН=7.5

насыщенного

тимолом.

Степень

развивающегося

помутнения находят по

калибровочному

графику

после

измерения на ФЭКе.

22.

Активность

Метод

определения

АлАт 0.1-0.7

Повышение

активности

аминотрансфе

активности

АлАт

и

аминотрансфераз в сыворотке крови

раз (АлАт

и

АсАт

основан

на

АсАт 0.1-0.55

отмечено

при

целом

ряде

АсАт)

в

определении

заболеваний

и

особенно

при

крови.

оптической

плотности

поражении органов и тканейЮ,

дифенилгидразона

богатых

данными

ферментами

пирувата,

явлвющегося

(печень, миокард). АсАт – резкое

продуктом

повышение через 6-12 часов после

дезаминирования

возникновения инфаркта

миокарда,

аланина и иаспартата.

достигает максимума к 24-48 часам, а

затем постепенно к 5 дню приходит к

норме. Если к 4-5 дню активность

АсАт не снижается, то пророгноз

плохой.

АлАт – при заболеваниях печени,

токсических

поражениях

печени,

холепатиях,

холестазе,

дерматомиозите.

Повышение

активности АлАт

наблюдается

при

остром инфаркте миокарда, но не

столь резко по сравнению с

изменением

АсАт.

В

норме

соотношение

акимвности

АлАт и

АсАт= 1.33±0.42. У больных

инфекционным

гепатитом

происходит снижение коэффициента,

а при инфаркте миокарда – резко

возрастает.

23.

Аминный

α-аминокислоты

при

4 – 11 мг%

Изменение

содержания

аминного

азот

в

взаимодействии

с

2.5 – 7.8 ммоль/л

азота в сыворотке крови может

сыворотке

нингидрином

служить

одним

из

показателей

крови.

подвергаются

катаболических или

анаболических

окислительному

процесов в организме. Увеличение

дезаминирванию

и

содержания

аминного

азота

–

декарбоксилированию.

гипераминоацидемия

– наблюдается

При этом

нингидрин,

при болезнях печени, приводимых к

восстанавливаясь,

ослаблению

синтеза

мочевины,

вступает

в

реакцию

а

повышенном

распаде

тканевых

продуктами,

белков,

нарушении

выделительной

образовавшимися

из

функции почек (задержка азотистых

аминокислот.

шлаков). Уменьшение уровня азота

Образуется

соединение,

может

наблюдаться

при

окрашенное

в

недостаточном поступлении белка с

фиолетовый

цвет,

пищей,

нарушении

всасывания

интенсивность которого

азотистых

продуктов,

истощения

пропорциональна

больного,

избыточное

удаление

количеству

свободных

аминаз с мочой.

аминокислот.

24.

Количественн

Метод

основан

на

9-11 мг%

Гиперкальциемия

при:

ое

взаимодействии

Са2+

гиперпаратиреоз,

нефропатия

определение

сыворотки

крови

с

гиперкальцемическая,

алкалоз

кальция

в

мурексидом,

который в

респираторный, с. Иценко-Кушинга,

сыворотке

свободном

состоянии

феохромоцитома,

тиреотоксикоз,

крови.

окрашен в синий цвет, а

гипернефрома, болезнь Бехтерева,

в комплексе с Са2+ в

акромегалия,