Добавил:
kiopkiopkiop18@yandex.ru Вовсе не секретарь, но почту проверяю Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

2 курс / Биохимия / Экзаменационные_практические_работы_по_биохимии

.pdf
Скачиваний:
1
Добавлен:
23.03.2024
Размер:
320.6 Кб
Скачать

29.

Количест-

ХС и его эфиры выде-

3,9–5,18 ммоль/л

Увеличение

концентрации

холес-

 

венное опре-

ляются

из

липопро-

 

терина отмечается при врож-денной

 

деление

теинов

крови

детер-

 

гиперлипопротеидемии, а также при

 

общего

гентами.

Эфиры

ХС

 

приобретенной

(вто-ричной)

 

холестерина в

гидролизуются

холес-

 

гиперлипопротеидемии,

отмечается

 

сыворотке

теролэстеразой

с

 

об-

 

при ишемической бо-лезни

сердца

 

крови

разованием ХС и жир-

 

(ИБС), заболеваниях печени, почек

 

ферментатив-

ных кислот. ХС окис-

 

(ХПН), злокачест-венных опухолях

 

ным методом

ляется

холестеролок-

 

поджелудочной железы, гипотиреозе,

 

 

сидазой

 

кислородом

 

сахарном диабете.

 

 

 

 

воздуха.

 

Образовав-

 

Снижение концентрации холесте-

 

 

шаяся при этом пере-

 

рина обнаружено при злокачест-

 

 

кись водорода (Н2О2)

 

венных

опухолях

 

печени,

 

 

взаимодействует

с

 

4-

 

гипертиреозе,

 

нарушениях

 

 

аминоантипирином

при

 

всасывания, нарушениях питания,

 

 

участии перокси-дазы в

 

при обширных ожогах, хронических

 

 

присутствии

 

фенола.

 

обструктивных ожогах,

хронических

 

 

Образуется

окрашенное

 

обструктивных заболеваниях легких.

 

 

в

крас-ный

 

цвет

 

 

 

 

 

 

 

вещество хинонимин, по

 

 

 

 

 

 

 

интен-сивности окраски

 

 

 

 

 

 

 

ко-торого судят о коли-

 

 

 

 

 

 

 

честве ХС в исследу-

 

 

 

 

 

 

 

емом

образце.

Расчет

 

 

 

 

 

 

 

ведут по формуле:

 

 

 

 

 

 

 

 

 

ХС

(ммоль/л)

 

=

 

 

 

 

 

 

 

сывст) х 5,17;

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Аст = 0,3, это степень

 

 

 

 

 

 

 

поглощения

стандар-

 

 

 

 

 

 

 

тного

раствора

ХС

в

 

 

 

 

 

 

 

конц. 5,17 ммоль/л (2 г

 

 

 

 

 

 

 

ХС в 1 л раствора).

 

 

 

 

 

 

 

30

Количественн

Фракции

липопротеи-

 

ХС-ЛВП

используется

для

 

ое

нов крови (ХМ, ЛОНП,

 

определения

коэффициента

 

определение

ЛНП)

 

 

осажда-ют

 

атерогенности, по которому судят о

 

холестерина в

раствором фосфор-но-

 

вероятности

атеросклероза

(см.

 

ЛВП

вольфрамовой кис-лоты

 

выше)

 

 

 

 

 

и хлорида маг-ния. В

 

 

 

 

 

 

 

надосадочной жидкости

 

 

 

 

 

 

 

после

 

 

 

 

цен-

 

 

 

 

 

 

 

трифугирования

оста-

 

 

 

 

 

 

 

ются ЛВП, в которых

 

 

 

 

 

 

 

определяется ХС

фер-

 

 

 

 

 

 

 

ментативным методом

 

 

 

 

 

 

 

(см.выше). Расчет ве-

 

 

 

 

 

 

 

дут по формуле:

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

ХС(ЛВП) (ммоль/л)

=

 

 

 

 

 

 

 

центр/ Аст) х 1,29

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Аст = 0,4 это степень

 

 

 

 

 

 

 

поглощения

стандарт-

 

 

 

 

 

 

 

ного

раствора

ХС

с

 

 

 

 

 

 

 

конц. 1,29 ммоль/л (0,5 г

 

 

 

 

 

 

 

ХС в 1 л раствора).

 

 

 

 

 

 

 

31.

Количест-

ЛДГ

катализирует

в

0,8-4,0

мкМоль

Повышение

активности

ЛДГ

 

венное

опре-

щелочной

 

среде

пирувата на 1 мл

наблюдается при инфаркте миокарда

 

деление

ак-

обратимую

 

реакцию

сыворотки

 

в

(ЛДГ1 и ЛДГ2), остром лейкозе,

 

тивности

окисления

молочной

течение 10 минут

перрнициозной

 

 

анемии,

 

лактатде-

кислоты (лактата) до пи-

инкубации

 

злокачественных новообразованиях,

 

гидрогеназы

ровиноградной

кислоты

 

 

 

заболеваниях

гепатобилиарной

 

(ЛДГ)

в

(пирувата)

 

 

в

 

 

 

системы (ЛДГ4 и ЛДГ5), поражениях

 

сыворотке

присутствии НАД.

 

 

 

 

скелетной

 

 

мускулатуры,

 

крови

 

Образовавшийся

 

 

 

 

травматическом

 

 

шоке,

 

 

 

пируват,

 

 

 

 

 

 

 

гемолитической анемии

 

 

 

 

 

взаимодействуя

с

2,4-

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

динитрофенил-

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

гидразином,

 

дает

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

фенилгидразон

желто-

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

кориченевого

цвета;

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

интенсивность

окраски

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

зависит

от

количества

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

пирувата.

Активность

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

ЛДГ

определяют

по

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

количеству

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

образовавшегося

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

пирувата.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

32

Количест-

КФК

 

катализирует

10-50 МЕ/л или

Повышение

активности

КФК

 

венное

опре-

обратимую

 

реакцию

40-200мМолей/л

 

наблюдается при инфаркте миокарда

 

деление

ак-

образования

АТФ

из

неорганического

 

(МВ),

повреждении

скелетной

 

тивности

креатинфосфата:

 

фосфора,

 

 

мускулатуры, после хирургических

 

креатинкиназ

креатинфосфат+АДФ→

выделяющегося

в

вмешательств

 

 

 

 

ы (КФК) в

АТФ+креатин

 

 

течение 10 минут.

 

 

 

 

 

 

сыворотке

В отсутствии АДФ КФК

 

 

 

 

 

 

 

 

 

крови

 

расщепляет

 

 

кре-

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

атинфосфат

с

выделе-

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

нием

неорганического

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

фосфата.

 

Неоргани-

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

ческий

 

фосфат

вза-

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

имодействует

с раст-

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

вором

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

молибденовокислого

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

аммония в присутствии

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

раствора

аскорбиновой

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

кислоты с образованием

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

соединения

 

синего

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

цвета..

 

 

 

 

По

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

интенсивности

окраски

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

судят

 

о

количестве

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

фосфата.

По количеству

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

неорганического

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

фосфата,

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

выделившегося во время

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

реакции,

 

определяют

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

активность КФК.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

33.

Количест-

 

Метод

 

 

основан

 

на

1,7-20,5 мкмоль/л

Определение общего билирубина и

 

венное

опре-

цветной

 

реакции

би-

 

его фракций в крови имеет важное

 

деление

би-

лирубина

с

 

диазореак-

 

значение при дифференциальной

 

лирубина

в

тивом.

Для

 

появления

 

диагностике желтух

 

 

сыворотке

 

розово-фиолетовой

 

 

 

 

 

 

крови

мето-

окраски

 

 

 

достаточно

 

 

 

 

дом

разбав-

0,00156

мг

билирубина

 

 

 

 

ления

 

по

в

1

 

 

мл,

 

что

 

 

 

 

Бакальчуку

соответствует,16

мг%.

 

 

 

 

 

 

 

Чтобы

 

 

 

 

 

найти

 

 

 

 

 

 

 

наименьшее количество

 

 

 

 

 

 

 

сыворотки,

 

дающее

с

 

 

 

 

 

 

 

диазореактивом

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

характерную

окраску

и

 

 

 

 

 

 

 

соответствующее

0,16

 

 

 

 

 

 

 

мг%

 

 

билирубина,

 

 

 

 

 

 

 

сыворотку разбавляют в

 

 

 

 

 

 

 

геометрической

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

прогрессии

 

пока

 

не

 

 

 

 

 

 

 

будет

найдена

граница

 

 

 

 

 

 

 

видимой

 

 

 

окраски.

 

 

 

 

 

 

 

Отметить

 

 

последнюю

 

 

 

 

 

 

 

пробирку,

 

в

которой

 

 

 

 

 

 

 

наблюдается окраска от

 

 

 

 

 

 

 

прибавления

 

реактива.

 

 

 

 

 

 

 

Расчет

 

ведут

 

по

 

 

 

 

 

 

 

формуле:

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Билирубин (мг%) =

 

 

 

 

 

 

 

0,00156мг•разведение

 

 

 

 

 

 

 

 

•100

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

34.

Определе-ние

Метод

 

 

основан

 

на

 

Определение желчных

пигментов в

 

желчных

 

способности

 

желчных

 

моче имеет важное значение при

 

пигментов

в

пигментов окисляться с

 

дифференциальной

диагностике

 

моче

 

 

образованием

 

 

 

 

желтух

 

 

 

 

 

окрашенных

 

в

разный

 

 

 

 

 

 

 

цвет продуктов

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Проба Гмелина:

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

При наслаивании мочи в

 

 

 

 

 

 

 

пробирку

со

смесью

 

 

 

 

 

 

 

азотной

 

и

 

азотистой

 

 

 

 

 

 

 

кислот

 

 

 

появляются

 

 

 

 

 

 

 

кольца: зеленое, синее,

 

 

 

 

 

 

 

фиолетовое,

 

 

красное,

 

 

 

 

 

 

 

желтое,

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

соответствующие

 

 

 

 

 

 

 

 

 

продуктам

 

 

разной

 

 

 

 

 

 

 

степени окисления;

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Проба Розина:

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

При наслаивании мочи в

 

 

 

 

 

 

 

пробирку

с

уксусной

 

 

 

 

 

 

 

кислоты

 

 

 

появляется

 

 

 

 

 

 

 

кольцо зеленого цвета