91
, * $ $
. * *, 0 0 *
*$ 0
* * % % "2 (Almeida et al., 2001).
+ $ 0 %$ % ..
* * % /. !% ( $ % % .. ,
% ( ( $
* %. S. cerevisiae %$ % ..
% 0
& ( % / . /
% %$ /&&
(Käppeli, 1986). !% % . $
( ( $ % % %$ . $0 $ % ,
, * & ( . *
* . * 0 %
(De Deken, 1966). % .. ,
%$ Debaryomyces vanrijiae Rhodotorula rubra,
/, % *
* & &. .. Candida
albicans . . / .
& % *$ & ( $ %
% *$ , % , ( %
* % .. D. vanrijiae, C. albicans, R. rubra S. cerevisiae, $
* & & %
"2.
92
5.1. -
$ $ .
" % – |
|
|
( |
%$, |
0 |
|
% * |
/- |
|
|
( .% |
( |
3. |
/ |
( , ( 3
(Wilson, Chance, 1967). ,
, % * % * F1F0- "2 $ % "2 (Weber, Senior, 1998) * %$ & , % (Brown-Peterson, Salin, 1995)
%% (Misra, Fridovich, 1978). 9 % ,
. % , (
% %$ & (Slater, 1967).
( $ % .. S. cerevisiae %
$ % . $ % / .% % %$*
, % % (De Deken, 1966). 1 * % S. cerevisiae % * % YEPD 30oC, % 0.15 7 % 1 7 ( % %,
%$ ( . 6). + S. cerevisiae
% D. vanrijiae % * /
* (72-74%) * % 0
% 2 7 % $ ()),
( & * %$
(Vanlerberghe, McIntosh, 1997), $ $
%$ ( . 6). " *$ *, $ & ( * %$ ("!),
%$* (
, % % ( %,
* ).
93
* %- ( % %$ % .. C. albicans $ % ., D. vanrijiae. ' $ % %$ % .. / % * 90%.
2 / 6.
'&& % *$ %$
% ..
$2 |
S. cerevisiae |
D. vanrijiae |
C. albicans |
R. rubra |
|
8.21 + 0.18 |
33.83 + 1.45 |
23.93 + 4.21 |
8.88 + 0.52 |
|
|
|
|
|
2 mM |
8.21 + 0.18 |
33.83 + 1.45 |
23.93 + 4.21 |
8.88 + 0.52 |
|
|
|
|
|
1 mM NaCN |
0 |
8.75 + 1.43 |
2.27 + 0.11 |
4.43 + 0.29 |
NaCN + |
0 |
0 |
0 |
1.71 + 0.17 |
|
|
|
|
|
0.15 mM NaN3 |
0 |
7.70 + 1.74 |
2.13 + 0.05 |
4.96 + 0.21 |
NaN3 + |
0 |
0 |
0 |
1.74 + 0.26 |
a -- 0 YEPD
( # " .
30oC - ! O2 107 (
+ D. vanrijiae + 108
'&& % ( % %$ R. rubra $
% . * 50% %$
% * % 0,15 M NaN3 1 M NaCN
R. rubra. % 0 % 2 7 ) .
% % * % 80%,
%$ *. + % ( % ) $ /&& %$ % .. . '
$ , *$ * *
& & , %$
* . 7 % ( " (1999) $ *$,
% ) %$ % .. Yarrowia lipolytica.
94
) 9 2, +/(+ 3 107 )
(a)
10
8 |
|
|
|
6 |
|
|
|
4 |
|
|
|
2 |
|
|
|
0 |
|
|
+ 2 +" |
0 |
0,15 |
1 |
(+") |
|
2 |
||
|
|
||
|
|
|
) 9 2, +/(+ 3 107 )
(2)
10
8 |
|
|
|
6 |
|
|
|
4 |
|
|
|
2 |
|
|
|
0 |
|
|
+ 2 +" |
0 |
1 |
5 |
*(+") |
|
10 |
||
|
|
||
|
|
|
. 41. '&& $ ( ( % ( ) ( % ( ) % R. rubra.
-- 0 YEPD
( # " .
30oC - ! O2 107 .
# * /
D. vanrijiae, C. albicans R. rubra
95
S. cerevisiae %$ Veiga ,
0 % *, * %$
% % .. , % ..
$ / & ( (Veiga et al 2000).
$ R. rubra * %
% ( %, %$ D. vanrijiae S. cerevisiae.
$ * 0 % ( %
( " %$* * Rhodotorula glutinis
S. cerevisiae * (Matsunaka et al., 1966). / % $ /&&
%$ R. rubra $ ( (
. $ ( ( %,
0 /&& %$ .
( ( 1 2 7 % %$ R. rubra 61 67%, % 0 % ) % % %$
( . 41, ). % ( % *
$ ( ( ( % % 5 10 7. /
( ( 0 % . *,
%, $* ( . 41, ). 2 /&&
% , ( %
0 % (Webb, 1963).
%$ / * %-
%$ CAI4 C. albicans $ %
*$ D. vanrijiae
* 8,8 % 0 %$ ( . 6). % ( * %$ , (
% *$ %$ (Huh, Kang 1999; Huh, Kang 2001), / CAI4
* % WH324 C. albicans
60 % YEPD c 10 7
( ". ' %$
WH324, CAI4 % %-
%$ % 21,4 % ( . 42).
) 9 2, +/(+ 3 107 )
30
20
10
0
96
1
1
3
2
2 3
CAI4 |
WH324 |
. 42. $* * C.albicans.
3 CAI4 WH324 YEPD
30 (1);
+ & + " 0,15 . NaN3 (2);
# + 60 10 6M
# (3).
7 - ( & (- % % %$* ( (Slater, 1966) ,
* , %$ &$. $
% .. % * %
0 % ( . 43),
0 % % ( % %$ / . % % .. ( . 6). 7 ( ( 10 7
97
%$ S. cerevisiae 33%, R. rubra
0 % $ . - 24% ( . 43). #
) 2O2 ( +/107 / +)
14
12
10
8
6
4
2
0
|
|
|
|
|
|
R. rubra |
|
|
|
S. cerevisiae |
|
||||||||||||||||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||||||||||||||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0 |
1 |
5 |
10 |
0 |
1 |
5 |
10 |
", mM
. 43. '&& %
R. rubra S. cerevisae.
-- 0 YEPD
( # " .
30oC - ! O2 107 .
0 * , , ; ,
( % %$ ( II)
/ -*
NADH % % ( I), .
*$ NADH % %$. S.
98
cerevisiae I %$* (, -%,
(Joseph-Horne 2001).
5.2. -
$ $
% .. D. vanrijiae, C. albicans S. cerevisiae,
% 0 / ( * & %
(YEPD) 30oC %$ 45oC$ * . * ( . 44). 2
, / %$ % .. $
% % % %
|
. |
NaN3 |
* |
. |
* % .. |
D. |
vanrijiae. |
||
44 $. * 0,15 7 %
$ * *, *$ . %
*, % % $
% D. vanrijiae .
% 30oC ( . 44, ). ' $ ,
- & ( .$ % .
% .
% *, % .. S. cerevisiae
. ( ( % % *
$ , 0
( . 44, ). %$ % $
$. * C. albicans ,
* ( . 44, ).
45 % (0,15 7)
* R. rubra ( . 44, ). ! -
/&& % / ( ( *
% , , *$
%$ ( . 6, . 42), . $
$. * R. rubra
|
|
|
|
|
|
99 |
|
|
|
|
|
A) |
100 |
|
|
|
|
&) |
100 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
&10 +(%) |
10 |
|
|
|
|
&10 +(%) |
10 |
|
|
|
|
0,1 |
|
|
|
|
0,1 |
|
|
|
|
||
|
1 |
|
|
|
|
|
1 |
|
|
|
|
|
0,01 |
|
|
|
|
|
0,01 |
|
|
|
|
|
0 |
15 |
30 |
45 |
60 |
|
0 |
15 |
30 |
45 |
60 |
|
|
|
& +, (+) |
|
|
|
|
|
& +, (+) |
|
|
) |
100 |
|
|
|
|
) |
100 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
&10 +(%) |
10 |
|
|
|
|
&10 +, (%) |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
10 |
|
|
|
|
||
0,1 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
1 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
1 |
|
|
|
|
|
0,01 |
|
|
|
|
|
0,1 |
|
|
|
|
|
0 |
15 |
30 |
45 |
60 |
|
0 |
15 |
30 |
45 |
60 |
|
|
|
& +, (+) |
|
|
|
|
|
& +, (+) |
|
|
. 44. % * 45 D. vanrijiae ( ), S.cerevisiae ( ), C. albicans ( ) R. rubra ( )
.
-- 0 YEPD ( # "
at 30oC ( ) 45oC
( ) ( )
(0,15 . – ; 1 . – ; 2 . - ).
45 . !% $ ( ( % % 1 7 %
* R. rubra / .
( ) |
100 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
(%) |
10 |
|
|
|
|
&10 +, |
|
|
|
|
|
1 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,1 |
|
|
|
|
|
0 |
5 |
10 |
15 |
20 |
|
|
|
& +, (+) |
|
|
100
(2) |
100 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
(%) |
10 |
|
|
|
|
&10 +, |
|
|
|
|
|
1 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,1 |
|
|
|
|
|
0 |
5 |
10 |
15 |
20 |
|
|
|
& +, (+) |
|
|
. 45. % * 50 R. rubra ( ), S.cerevisiae ( ), .
-- 0 YEPD
( # " 50oC
( ) ( ) 0,15 . .
. (50 ) *
R. rubra * , % % .
( ( . * ( . 45, ). 15 20 . %
0,15 7 NaN3 $. * R. rubra . *
* 5 . $ $
% 50 % . 45 $ $ /&& S. cerevisiae, . +$. * $ % %
$ $. * ( . 45, ).
2 , %, % * %$ ,
$ .$ /&&
* $ % % .. %
. $ $. * % .. S. cerevisiae C. albicans, . $. * R. rubra D. vanrijiae.