Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

Лабор.діагност.вірус.хв

..pdf
Скачиваний:
45
Добавлен:
14.02.2015
Размер:
1.66 Mб
Скачать

буйством

і

агресією, порушенням

координації

рухів.

Температура тіла нормальна. У телят раннього віку деякі

штами

вірусу

ІРТ

викликають

гостре

захворювання

шлунково-кишкового тракту, що важко диференціювати від диспепсії, ентеротоксемії та враження новонароджених телят рота - і коронавірусами.

Ухворих тварин клінічно більш чітко виражена

респіраторна

форма;

генітальна

форма

часто

протікає

непомітно. Різке фізичне

навантаження

як

стрес

може

викликати

зрушення

в

імунітеті і

розмноження

, вірусу

впливати на функцію лімфоцитів і індукувати продукцію сироваткового фактора, що придушує бластогенну реакцію лімфоцитів і підсилює розмноження вірусу ІРТ.

При розтині тварин, убитих у період клінічного прояву хвороби, відзначають ціаноз слизистої оболонки носових раковин, скупчення гнійного ексудату у виді тяжів у носових

ходах, гіперемію

слизистої

оболонки

лобових . пазух

Кон’юнктива

гіперемована, набрякла,

частково

покрита

салоподібним

нальотом і

дрібною

висипкою

сіруватого

кольору. На слизистій оболонці гортані спостерігаютьсяі крапкові крововиливи; на слизистій трахеїті ж зміни і піниста рідина. Легені збільшені, у верхівкових частках— невеликі ділянки ателектазу. Просвіти бронхів, альвеол заповнені слизисто-гнійним ексудатом. Лімфатичні вузли набряклі, гіперемовані, збільшені, на розрізі соковиті, із крововиливами. Слизисті оболонки шлунка, товстого і тонкого кишечників набряклі і гіперемовані. В інших органах

ітканинах яких-небудь видимих змін немає. Описано форму ІРТ, що супроводжується гепатитом, некрозом слизистої оболонки надгортанника, некротичними вогнищами в печінці

ілегенях.

У препаратах клітинних культур, заражених вірусом і

 

пофарбованих

 

гематоксилин-еозином,

зустрічаються

 

внутрішньоядерні включення.

 

 

 

 

 

 

ЛАБОРАТОРНА ДІАГНОСТИКА. ІРТ діагностують

 

на

підставі

 

клініко-епізоотологічних ,

да

патологоанатомічних

змін

в

органах

і

тканинах

з

обов'язковим

підтвердженням

 

лабораторними

 

методами.

 

Латентну інфекцію встановлюють тільки лабораторними

 

дослідженнями. Лабораторна діагностика включає:

 

 

 

1) виділення

вірусу з

 

патологічного

матеріалу в

 

культурі клітин і його ідентифікації в РН чи РІФ;

2)виявлення антигену вірусу ІРТ у патологічному матеріалі РІФ;

3)виявлення антитіл у сироватці крові хворих і перехворілих тварин (ретроспективна діагностика) у РН чи РНГА.

 

Для

лабораторної

діагностики

ІРТ

використовують

 

набір

діагностикумів

інфекційного

ринотрахеїту

великої

 

рогатої худоби і набір еритроцитарного діагностикума для

 

серодіагностики ІРТ великої рогатої худоби в РНГА., а також

 

ПЛР, діагностикум на основі B.alvei.

 

 

 

 

 

 

 

Діагностику

 

інфекційного

ринотрахеїту

 

проводять

 

паралельно з дослідженням матеріалу на парагрипозну(ПГ-

 

3), аденовірусну (I і II), респіраторно-синцитіальну інфекції і

 

вірусну

діарею.

Попередній

діагноз

на

інфекційний

ринотрахеїт великої рогатої худоби ставлять на підставі

позитивних результатів виявлення антигену в патологічному

 

матеріалі РІФ з урахуванням епізоотологічних і клінічних

 

даних, а також патологічних змін.

 

 

 

 

 

 

 

Остаточний

 

діагноз

ставлять

на

підставі

збігу

результатів РІФ з виділенням і ідентифікацією вірусу; збігу

 

результатів

РІФ

з

знаходженням

антитіл 30%у

і

більш

 

пробах сироваток у титрах не нижче1:2 у РН і 1:16 у РНГА і

 

виявленням 4-кратного і більш збільшення титру антитіл у

 

парних пробах сироваток. Попередній діагноз ставлять у

 

ветеринарних лабораторіях протягом2—3 днів, остаточний

 

— протягом 15—30 днів.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

ІМУНІТЕТ

 

 

І

 

 

ЗАСОБИ

 

СПЕЦИФІЧН

ПРОФІЛАКТИКИ. Імунітет у перехворілих тварин триває не

 

менш

1,5—2 років,

однак у тварин-реконвалесцентів, що

 

мають антитіла, стан абсолютної імунності буває рідко, і їх

 

варто розглядати як потенційне джерело інфікування інших

 

тварин.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Для профілактики ІРТ застосовують живі і інактивовані

 

вакцини.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Інактивовані

 

вакцини.

Застосовують

інактивовану

 

ГОА-етанолвакцину. Поствакцинальний імунітет тривалістю

 

6— 7 міс настає через 14 днів після другого (з інтервалом у

 

30 днів) щеплення.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Живі

вакцини.

Широко

застосовують

живі(моно - і

 

полівалентні) вакцини для інтраназального

введення.

Вони

 

мають гарну ефективність у зв'язку з раннім виробленням місцевих (секреторних) антитіл і інтерферону, що скорочує терміни настання несприйнятливості. Однак живі вакцини у тільних корів можуть викликати аборти і сприяти розвитку латентної інфекції.

ЗБУДНИК РИНОПНЕВМОНІЇ КОНЕЙ

Ринопневмонія коней( вірусний аборт кобил, статева екзантема) - гостра контагіозна хвороба, що характеризується гострим респіраторним захворюванням лошат і абортами в кобил у другій половині жеребності, що часто проходять без

помітних симптомів і провісників пологів.

 

 

 

 

Хворобу

вперше

описали

В .

СШАПотім

її

діагностували

в

Німеччині, Франції,

Італії,

Югославії,

 

Австрії, Угорщині, в останні роки— у Румунії, Чехії, Польщі

 

і Україні.

 

 

 

 

 

 

 

 

ВІРУС. Збудник хвороби Herpes virus equi 1.

 

 

 

КУЛЬТИВУВАННЯ. Для культивування і пасажування

 

вірусу

використовують

мишейсосунів

і

хом'ячків

(внутрішньочеревне

зараження), курячі

ембріони 8—12-

 

денного віку (у жовточний мішок, алантоїсну порожнина чи

 

амніон), а також культури клітин ниркової тканини різних тварин (коня, теляти, поросяти, собаки, вівці), тестикулів бичків чи їх ембріонів. Найбільш чутлива культура клітин нирки коня, особливо молодого лошати. Вірус розмножується також у культурах деяких перещеплювальних ліній клітин (HeLa, KB, Детройт-6, РК-15).

По чутливості до вірусу ринопневмонії коней первинні і перещеплювальні лінії клітин можна розділити на п'ять груп убік зниження її: 1) нирка свині (НС) і нирка коня (НК);

2)нирка теляти (НТ), тестикули теляти (ТТ), нирка хом'ячка (НХ), ВНК-21;

3)перещеплювальні лінії клітин: HeLa, TL (амніон людини), Lu 106 (легені людини), AND (нирка мавпи), КЛ (клітини роговиці кролика);

4)фібробласти курячого ембріона;

5)ML ( мишачі фібробласти).

Клітини першої групи придатні для виділення, нагромадження і пасажів усіх вивчених штамів вірусу

ринопневмонії. У

цих культурах на3— 5-у добу, після

 

зараження вірус

уже з першого пасажу проявляє ;

ЦПД

утворяться

вогнища

 

округлих

клітин

з

наступним

руйнуванням усього клітинного моношару. Розвиток ЦПД у

 

 

культурі кліток НС і НК завершується їхнім повним лізисом.

 

 

У клітинах другої групи вірус розмножується, але ЦПД

 

 

настає

повільно,

без

повного

лізису

культури. В

міру

 

адаптації титр вірусу підвищується і 4до—5-го пасажу

 

 

досягає 104,75 — 105 ТЦД 50/мл.

 

 

 

 

 

 

У культурах клітин третьої групи

розмножуються

не

 

всі штами вірусу ринопневмонії. У клітинах четвертої групи

 

 

вірус розмножується слабко і не викликає ЦПД. І, нарешті,

 

 

культура

клітин мишачих

фібробластів, що відноситься до

 

п'ятої групи, узагалі не придатна для розмноження вірусу.

 

 

При

 

виділенні

вірусу

багато

 

штамів

вимагають

попередньої

адаптації

 

до

тієї

 

чи

іншої

систем

культивування, особливо це відноситься до культивування

 

вірусу на хом'яках, мишенятах-сосунах і курячих ембріонах.

 

 

ГЕМАГЛЮТИНУЮЧІ

 

ВЛАСТИВОСТІ.

Вірус

 

 

аглютинує еритроцити коня і морської свинки при 4 і 37 °С

 

 

ливийСТІЙКІСТЬ ВІРУСУ. Вірус чутливий до зміни

 

концентрації водневих іонів. Інфекційність його зберігається

 

 

при порівняно широких коливаннях рН. Оптимальний для

 

 

його збереження рН 6—6,7; при рН нижче 4 і вище 10 вірус

 

 

швидко інактивується. Вірус краще зберігається при 4— 6°С

 

 

гірше — при 20°С. Добре консервується 50%-ним розчином

 

 

гліцерину, залишаючись

активним

при4 °С 5 міс. 1%-ний

 

 

метанол,

етиловий

спирт,

чи

гепарини

не

впливають

на

 

інфекційність культурального вірусу. Він не стійкий до дії

 

трипсину, чутливий до ефіру і хлороформу.

 

 

 

 

 

ПАТОГЕННІСТЬ.

Вірус

ринопневмонії

викликає

 

гостре респіраторне захворювання лошат у віці6—9 місяців,

 

 

аборти в кобил і паралітичний синдром. Інкубаційний період

 

 

у природних умовах у середньому3—4

тижні. Хвороба

 

 

протікає в респіраторній формі і може супроводжуватися

 

абортами.

Перша

форма

 

зустрічається

частіше, уражає

 

 

тварин восени і на початку зими. Вона характеризується

 

 

підвищенням

температури

тіла, депресією,

відсутністю

 

 

апетиту, кон’юнктивітом і запаленням слизистої оболонки

 

носа,

іноді

ринофарингітом.

Риніт

супроводжується

 

витіканням з носа, збільшенням підщелепних лімфатичних

 

вузлів. Легені уражаються

рідко. Через 10—15 днів

хворі

 

 

видужують. У деяких тварин відмічають кашель і утруднене

 

дихання унаслідок розвитку перипневмонії. У таких випадках хвороба нерідко ускладнюється бактеріальною

інфекцією, що звичайно

приводить до летального результату.

 

ЛАБОРАТОРНА

ДІАГНОСТИКА.

Діагноз

на

ринопневмонію коней ставлять на підставі результатів лабораторних досліджень з урахуванням епізоотичних, клінічних даних і патологоанатомічних змін. Якщо аборти відбуваються відразу в декількох кобил на7—11-м місяці

жеребності,

варто

підозрювати

ринопневмонію.

Контагіозність

хвороби,

аборти

і відсутність

виражених

ознак аборту,

що наближається,

швидке повернення до

нормального стану статевого трактуусе це характерно для

ринопневмонії.

 

 

 

 

 

 

 

Діагноз уточнюють на підставі патологоанатомічних

 

змін

і

результатів

 

гістологічного

досліджен

(плевропневмонія, перипневмонія, вогнища некрозу в печінці

 

абортованих

плодів,

ацидофільні

внутрішньоядерні

 

включення

в 50—80% печіночних

клітин), виділення вірусу

 

шляхом

заражень

 

культури

,клітинновонароджених

 

хом'ячків і вагітних морських свинок та його ідентифікації в

 

РІФ, ПЛР, РЗГАд, РН, РЗК і виявлення антитіл у сироватці

 

крові хворих і перехворілих тварин у РН, РЗК.

 

 

ІМУНІТЕТ

 

 

І

 

ЗАСОБИ

СПЕЦИФІЧН

ПРОФІЛАКТИКИ.

У

перехворілих

тварин

розвивається

короткотерміновий

 

імунітет, причому

проти

абортивної

 

форми він буває більш тривалим, ніж проти респіраторної,

 

але не більше 4 місяців.

 

 

 

 

 

Для

профілактики

ринопневмонії

застосовують

інактивовані і живі вакцини. У нашій країні використовують живу вакцину зі штаму СВ/69.

Література:

1.А. Ройт, Дж. Бростофф, Д. Мейл. Иммунология. Из – во «Мир», Москва, 2000, 582с..

2.Б.Филдс, Д. Найп, Р. Ченок, Б. Ройзман, Дж. Мельник, Р. Шоуп. Вирусология в 3 – х томах. Москва.

«Мир», 1989.

3.В.А. Сергеев. Вирусные вакцины. – Киев.:Урожай, 1993. – 368 с.

4.А.А. Авакян, А.Ф. Быковский. Атлас анатомии и онтогенеза вирусов человека и животных. – Москва.:

«Медицина», 1970. – 272с.

5.В.Н. Сюрин, Н. В. Фомина. Частная ветеринарная вирусология: Справочная книга. – Москва.: Колос, 1979. – 472 с., ил.

6.В.Н. Сюрин, Р.В. Белоусова, Н. В. Фомина. Диагностика вирусных болезней животных: Справочник. – Москва.: Агропромиздат, 1991. – 528 с.

7.В.Н. Сюрин, А.Я. Самуйленко, Б.В. Соловьёв, Н. В. Фомина. Вирусные болезни животных. – Москва, ВНИТИБП, 928 с, ил.

8.Букринская А. Г. Вирусология. М.: Медицина, 1986. 336 с.

9.Иммунологическая диагностика вирусних инфекций

/Под ред. Т. Ф. Перадзе, П. Халонена; Совместное издание

СССР Финляндия. М.: Медицина, 1985. 302 с.

10.Инфекционные болезни животных: Справочник / Под ред. Д. Ф. Осидзе. – М.: Агропромиздат, 1987. – 288 с.

11.Кадымов Р. А., Кунаков А. А., Седов В. А. Инфекционные болезни овец. М.: Агропромиздат, 1987. – 303 с.

12.Коляков Я. Е. Ветеринарная иммунология. М.: Агропромиздат, 1986. 272 с.

13.Лабораторная диагностика вирусных болезней

животных / В. Н. Сюрин, Г. А. Иванова, Е. А. Краснобаев, Ю.

В. Фомин. – М.: Колос, 1972. 416 с.

14.

Лабораторные

исследования

в

ветеринарии.

Вирусные,

риккетсиозные

и

паразитарные

болезни:

Справочник / Под ред. Б. Н. Антонова.– М.: Агропромиздат,

1987.–251 с.

 

 

 

 

 

15.

Методы лабораторной

диагностики

вирусных

болезней

животных: Справочник / В. Н. Сюрин, Р. В.

Белоусова, Б. В. Соловьев, Н. В. Фомина. – М.:

Агропромиздат, 1986. – 351 с.

 

 

 

 

 

16.Панікар .І І., Скибіцький

В. Г., Калініна

О. С.

Практикум

з ветеринарної

вірусології.

Суми:

Козацький

вал, 1997. 236 с.

17. Троценко Н. И., Белоусова Р. В., Преображенская Э. А. Практикум по ветеринарной вирусологии. – М.: Агропромиздат, 1989. –287 с.

18. Троценко Н. И., Белоусова Р. В., Преображенская Э. А. Практикум по ветеринарной вирусологии. – М.: Колос,

1999. – 272 с.

 

 

19. Скибіцький

В.Г, Ташута

С.Г Ветеринарна

вірусологія. Посібник (КД), 2003.

 

.

 

 

20.Davison A. J. Evolution of herpesviruses // Vet. Microbiol. — 2002.

— Vol. 86. — P. 69—88.

21.Davison A, J., Eberle R., Hayward G. S. et al. Family Herpesviridae. // In: Viras Taxonomy. Eight Report of the International Committee on Taxonomy of Viruses / С M. Fauquet, M. A. Mayo, J. Maniloff, U. Desselberger, L. A. Ball (eds.). — Elsevier Academic Press, 2005. — P. 193212.

22.Lehman I. R., Boehmer P. E. The herpes viruses replication // J. Biol. Chem. — 1999. — Vol. 274. — No. 40. - P. 28059-28062.

23.McGeoch D. J., Dolan A., Ralph A. C. Toward a comprehensive phylogeny for mammalian and avian herpesviruses // J. Virol. - 2000. - Vol. 74. - P. 10401-10406.

24.Roizman B. R., Knipe D. M. Herpes simplex viruses and their replication. // In: Fields Virology, 4th ed. / D. M. Knipe, P. M. Howley (eds.). — Philadelphia: Lippincott, Williams & Wilkins, 2001.-P. 23992459.

25.Zhou Z. H., Dougherty M., Jakana J. et al. Seeing the herpesvirus capsid at 8,5 A // Science. — 2000. - Vol. 288. - P. 877-880.

Питання для самоконтролю:

-Морфологія герпесвірусів.

-Репродукція герпесвірусів в клітині.

-Антигенна структура герпесвірусів.

-Класифікація герпесвірусів.

-Діагностика та профілактика ІЛТ.

-Діагностика та профілактика хвороби Ауескі.

-Діагностика та профілактика ринопневмонії коней.

ЛЕКЦІЯ 4.

Тема лекції : АДЕНОВІРУСНІ ІНФЕКЦІЇ

АНОТАЦІЯ. Викладено основні положення про родину аденовірусів. Охарактеризовані представники родини та показана їх роль в патології ссавців, проаналізовані сучасні методи лабораторної діагностики аденовірусних інфекцій тварин.

ПЛАН ЛЕКЦІЇ

1.характеристика представників родини аденовірусів.

2.Аденовірусна інфекція великої рогатої худоби.

3.Аденовірусна інфекція коней.

4.Аденовірусна інфекція собак (інфекційний гепатит

собак).

5.Аденовірусна інфекції птахів.

ЗМІСТ ЛЕКЦІЇ

 

 

 

Аденовіруси

складають

самостійну

родину

ADENOVIRIDAE , вперше описані

в1953 р. Роу

і

співавторами, при спробі одержати лінії клітин із тканин

мигдалин і аденоїдів, вилучених у дітей.

Був виділений

агент, що викликав

дегенерацію

епітеліальних

клітин.

Пізніше подібні вірусні агенти були виділені від військових, що хворіли різними респіраторними захворюваннями та

супроводжувалися

лихоманкою. Встановлено,

що

існує

безліч

серотипів

цих

нових

агентів і що серед перших

серотипів

шість

антигенно

родинні: мають

загальний

груповий специфічний комплементзвязуючий антиген.

 

 

 

 

Аденовіруси (від грецького - aden, adenos -

залоза)

-

група

вірусів, що уражає тварин у т. .чі птахів.

Спочатку

ці

віруси

називалиadenoid degeneration -

AD

(викликають

дегенерацію

аденоїдів), adenoid-pharyngeal

conjunctival - АРС (аденофарінго-кон’юнктивіти), і acute

respiratory disease - ARD agents (агенти

гострих

респіраторних

захворювань).

Сучасна

номенклатура

аденовірусів була прийнята в 1956 р.

 

 

 

Гострі

респіраторні

синдроми,

які

викликають аденовіруси ,були відомі більш ніж за100 років до опису цієї групи вірусів. Крім того, аденовіруси були виділені під час спалахів епідемічних кератокон’юнктивітів (ЕКК), що були описані як окреме захворювання німецькими клініцистами в 1920-х рр. В міру збільшення числа серотипів аденовірусів людини (у даний час їх нараховується близько 50) з ними зв'язували різні клінічні синдроми. Наприклад, аденовіруси можуть викликати гострі геморрагічні цистити. У 1962 р. був описаний перший випадок, коли патогенний вірус людини індукував злоякісні пухлини у тваринАd 12 викликав появу пухлин у гризунів. Онкогенний потенціал

аденовірусів

послужив

стимулом

їх

подальшого

молекулярно-біологічного вивчення, що дозволило детально

 

зрозуміти багато

аспектів

літичного і

трансформуючого

ефеків. .

 

 

 

 

Структура вірусу .

Вісони аденовірусів мають форму ікосаедра(20 триангулярних поверхней і12 вершин), діаметр вібріонів - 70 до 90 нм .

. В серцевині віріону знаходяться білки V і VІІ, m і 55Ккінцевий білок (ТР), ковалентно зв’язаний з кожним із 5’- кінців ДНК. Від кожної з вершин ікосаедра відходить структурний компонент, що отримав назву фібрила. Його довжина варіює в різних серотипів аденовірусів. Білкова

оболонка

(капсид)

складається

з 252 субодиниць

(капсомерів), 240 із

яких - гексони і 12— пентони. Пентон

має основу пентону на поверхні капсида і фібрилу, що

відходить

від основи

пентону. Кожен

пентон оточений

п'ятьма гексонами,

завдяки

чому

він

і

одержав

назву

«пентон». Всі інші капсомери— гексони, що називаються

так тому, що кожний сусідить із шістьма ідентичними

структурами. Гексони

і

пентони

містять

різні

вірусні

поліпептиди. Руйнування

віріону 5M сечовиною, 10%-ним

піридином,

ацетоном

 

чи

шляхом

багаторазового

заморожування-відтавання

 

приводить

 

до

звільнення

внутрішньої

структури (серцевини),

що

складається

з

дволанцюгової ДНК із чотирма вірусними білками, що не входять до складу капсиду. Плавуча щільність аденовірусів у CsCI складає 1,34 г/см3. У віріонах аденовірусів міститься 86-88% білка і 12-14% ДНК. ММ віріонів 170 МД, коефіцієнт седиментації 560S. Аденовіруси стабільні при рН6-9, стійкі до розчинників ліпідів, але швидко інактивуються при 56°С.

Геном

аденовірусів

представлений

єдиною2-

спіральною

молекулою ДНК ММ 20-25 МД. На

кінцях

молекули ДНК є інвертовані повтори довжиною50-200 п.н. Кожен 5-кінець молекули ДНК ковалентно зв'язаний з білком (55КД). Частка Г+Ц складає 48-61%, в аденовірусів птахів - 54-55%. ДНК володіє інфекційністю. У віріонах їх виявлено 10 поліпептидів з ММ5-120 КД. Поліпептид гексонів має

групо - і

типоспецифічні

АГ

детермінанти. Останні

індукують

синтез AT, що

нейтралізують

інфекційну

активність вірусу.

 

 

 

Класифікація.

 

 

 

Родина

складається

2з-х

родів: Mastadenovirus,

Aviadenovirus.

 

 

 

 

1.Рід Mastadenovirus (від грец. mastos - молочна залоза). До складу роду входять аденовіруси ссавців: людини (47 серотипів), мавп (27), ВРХ (10), свиней (4), овець (6), кіз (1), коней (1), собак (2), мишей (2 серотипи). Типовим представником роду є аденовірус людини серотипу 2.

2.Рід Aviadenovirus (від лат. avis - птах). До складу роду входять аденовіруси птахів: курей (12 серотипів), індичок (3), качок (2), фазанів (1 серотип). Типовий представник роду - аденовірус курей серотипу1 (вірус

CELO).

Хоча

існують

широкі

антигенні

перехрести

по

гексоновим

комплементзвязуючих

антигенах

усередині

 

кожного роду, немає загального антигену, що характеризував

 

би родину в цілому.

 

 

 

 

 

АДЕНОВІРУСНА ІНФЕКЦІЯ ВЕЛИКОЇ РОГАТОЇ ХУДОБИ

Аденовірусна інфекція ВРХ(АВІ ВРХ, аденовірусна

 

пневмонія

телят,

аденовірусний

пневмоентерит) у телят

протікає

гостро

і

характеризується

ураженням

органів

дихання, травлення і кон’юнктивітами. ВРХ часто є носієм

латентних

аденовірусів (АВ)

ВРХ, що

викликають