- •Место микробиологии и иммунологии в современной медицине. Роль отечественных ученых в развитии микробиологии, вирусологии иммунологии.
- •Основные этапы развития микробиологии и иммунологии. Работы л.Пастера, р. Коха и их значение для развития микробиологии и иммунологии.
- •Основные принципы классификации микробов.
- •Принципы классификации бактерий.
- •Принципы классификации грибов.
- •Принципы классификации простейших.
- •Принципы классификации вирусов.
- •(Морфология микробов)
- •Морфологические свойства бактерий.
- •Структура и химический состав бактериальной клетки. Особенности строения грамположительных и грамотрицательных бактерий.
- •Морфология грибов.
- •Морфология простейших.
- •Особенности морфологии вирусов.
- •Структура и химический состав бактериофагов.
- •Тинкториальные свойства бактерий. Методы окраски.
- •Методы микроскопии (люминесцентная, темнопольная, фазово-контрастная, электронная).
- •(Физиология микробов)
- •Рост и размножение бактерий. Фазы размножения.
- •Способы получения энергии бактериями (дыхание, брожение).
- •Типы и механизмы питания бактерий.
- •Основные принципы культивирования бактерий.
- •Искусственные питательные среды, их классификация. Требования, предъяв-ляемые к питательным средам.
- •Принципы и методы выделения чистых культур бактерий.
- •Ферменты бактерий.
- •Особенности физиологии грибов.
- •Особенности физиологии простейших.
- •Типы взаимодействия вируса с клеткой. Стадии репродукции вирусов.
- •Бактериофаги. Взаимодействие фага с бактериальной клеткой. Умеренные и вирулентные бактериофаги. Лизогения.
- •Методы культивирования вирусов.
- •(Экология микробов. Влияние на микробы факторов окружающей среды)
- •Нормальная микрофлора организма человека и её значение.
- •Дисбиозы. Дисбактериозы.
- •Действие физических и химических факторов на микроорганизмы. Понятие о стерилизации, дезинфекции, асептике и антисептике.
- •(Генетика бактерий. Основы биотехнологии)
- •Строение генома бактерий. Понятие о генотипе и фенотипе. Виды изменчивости.
- •Механизмы передачи генетического материала у бактерий.
- •Внехромосомные факторы наследственности.
- •Мутации.
- •Генетика вирусов.
- •(Микробиологические основы химиотерапии)
- •Понятие о химиотерапии. История открытия химиопрепаратов.
- •Антибиотики. Природные и синтетические. История открытия природных антибиотиков.
- •Классификация антибиотиков по химической структуре, механизму, спектру и типу действия.
- •Механизмы лекарственной устойчивости возбудителей инфекционных болезней. Пути ее преодоления.
- •Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам.
- •(Инфекция и иммунитет)
- •Понятие об инфекции. Условия возникновения инфекционного процесса.
- •Формы инфекции.
- •Стадии развития и характерные признаки инфекционной болезни.
- •Патогенность и вирулентность бактерий. Факторы патогенности.
- •Характеристика бактериальных токсинов.
- •Неспецифические факторы защиты организма.
- •Комплемент, его структура, функции, пути активации, роль в иммунитете.
- •Интерфероны, природа. Способы получения и применения.
- •Понятие об иммунитете. Виды иммунитета.
- •Структура и функции иммунной системы.
- •Иммунокомпетентные клетки. Т- и в-лимфоциты, макрофаги.
- •Иммуноглобулины, структура и функции.
- •Классы иммуноглобулинов, их характеристика.
- •Антигены: определение, основные свойства. Антигены бактериальной клетки.
- •Антителообразование: первичный и вторичный ответ.
- •Иммунологическая память. Иммунологическая толерантность.
- •Теории иммунитета.
- •Особенности противовирусного, противоопухолевого, трансплантационного иммунитета.
- •Понятие о клинической иммунологии. Иммунный статус человека и факторы, влияющие на него.
- •Оценка иммунного статуса: основные показатели и методы их определения.
- •Расстройства иммунной системы: первичные и вторичные иммунодефициты.
- •Аутоиммунные процессы.
- •(Реакции иммунитета)
- •Реакция агглютинации. Компоненты, механизм, способы постановки. Применение.
- •Реакция пассивной гемагглютинации. Компоненты. Применение.
- •Реакция преципитации. Механизм. Компоненты. Способы постановки. Применение.
- •Реакция связывания комплемента. Механизм. Компоненты. Применение.
- •Реакция нейтрализации токсина антитоксином. Механизм. Способы постановки, применение.
- •Реакция иммунофлюоресценции. Механизм, компоненты, применение.
- •Иммуноферментный анализ, иммуноблоттинг. Механизм, компоненты, применение.
- •Серологические реакции, используемые для диагностики вирусных инфекций.
- •(Медицинские иммунобиологические препараты)
- •Вакцины. Определение. Современная классификация вакцин. Требования, предъявляемые к вакцинным препаратам.
- •Иммунные сыворотки. Классификация. Получение, очистка. Применение.
- •Антитоксические сыворотки. Получение, очистка, титрование. Применение. Осложнения при использовании и их предупреждение.
- •Препараты иммуноглобулинов. Получение, очистка, показания к применению.
- •Понятие об иммуномодуляторах. Принцип действия. Применение.
- •Интерфероны. Природа, способы получения. Применение.
- •Иммунотерапия и иммунопрофилактика инфекционных болезней.
- •(Частная микробиология)*
- •Возбудители брюшного тифа и паратифов. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.
- •Возбудители эшерихиозов. Таксономия. Характеристика. Роль кишечной палочки в норме и патологии. Микробиологическая диагностика эшерихиозов. Лечение.
- •Возбудители кишечного иерсиниоза. Таксономия. Характеристика. Микро-биологическая диагностика. Лечение.
- •Возбудители шигеллеза. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.
- •Возбудители сальмонеллёзов. Таксономия. Характеристика. Микробиологический диагноз сальмонеллёзов. Лечение
- •Возбудители холеры. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.
- •Стафилококки. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика заболеваний, вызываемых стафилококками. Специфическая профилактика и лечение.
- •Стрептококки. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика стрептококковых инфекций. Лечение.
- •Менингококки. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика стрептококковых инфекций. Лечение.
- •Гонококки. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика гонореи. Лечение.
- •Возбудитель туляремии. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.
- •Возбудитель сибирской язвы. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.
- •Возбудитель бруцеллеза. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.
- •Возбудитель чумы, таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.
- •Возбудитель ботулизма. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.
- •Возбудитель столбняка. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика и лечение
- •Возбудитель дифтерии. Таксономия и характеристика. Условно-патогенные коринебактерии. Микробиологическая диагностика. Выявление антитоксического иммунитета. Специфическая профилактика и лечение.
- •Возбудители коклюша и паракоклюша. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.
- •Возбудители туберкулеза. Таксономия. Характеристика. Условно-патогенные микобактерии. Микробиологическая диагностика туберкулеза.
- •Возбудитель сыпного тифа. Таксономия. Характеристика. Болезнь Брилля-Цинссера. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.
- •Возбудители хламидиозов. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Лечение.
- •Возбудитель сифилиса. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Лечение.
- •Возбудитель лептоспирозов. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика. Лечение.
- •Возбудитель боррелиозов. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика.
- •Микоплазмы и уреаплазмы. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Лечение.
- •Синегнойная палочка. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика и лечение.
- •Классификация грибов. Характеристика. Роль в патологии человека. Лабораторная диагностика. Лечение.
- •Возбудители малярии. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Лечение.
- •Возбудитель амебиаза. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическое лечение.
- •Возбудители орви. Таксономия. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика и лечение.
- •Возбудитель гриппа. Таксономия. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика и лечение.
- •Возбудитель полиомиелита. Таксономия и характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.
- •Возбудители гепатитов а, в и с Таксономия. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.
- •Возбудитель клещевого энцефалита. Таксономия. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.
- •Возбудитель бешенства. Таксономия. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.
- •Возбудитель натуральной оспы. Таксономия. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика оспы.
- •Вирус кори. Таксономия. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.
- •Герпес-инфекция: таксономия, характеристика возбудителей. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика и лечение.
- •Классификация и характеристика онкогенных вирусов.
- •(Санитарная микробиология)
- •Микрофлора воздуха и методы ее исследования. Санитарно-показательные микроорганизмы воздуха.
- •Методы санитарно-бактериологического исследования воды. Показатели качества воды: микробное число, коли-индекс.
- •Санитарно-микробиологическое исследование почвы. Микробное число, коли-титр, перфрингенс-титр почвы.
Основные принципы культивирования бактерий.
Универсальным инструментом для производства посевов является бактериальная петля. Кроме нее, для посева уколом применяют специальную бактериальную иглу, а для посевов на чашках Петри — металлические или стеклянные шпатели. Для посевов жидких материалов наряду с петлей используют пастеровские и градуированные пипетки. Первые предварительно изготовляют из стерильных легкоплавких стеклянных трубочек, которые вытягивают на пламени в виде капилляров. Конец капилляра сразу же запаивают для сохранения стерильности. У пастеровских и градуированных пипеток широкий конец закрывают ватой, после чего их помещают в специальные пеналы или обертывают бумагой и стерилизуют.
При пересеве бактериальной культуры берут пробирку в левую руку, а правой, обхватив ватную пробку IV и V пальцами, вынимают ее, пронося над пламенем горелки. Удерживая другими пальцами той же руки петлю, набирают ею посевной материал, после чего закрывают пробирку пробкой. Затем в пробирку со скошенным агаром вносят петлю с посевным материалом, опуская ее до конденсата в нижней части среды, и зигзагообразным движением распределяют мате риал по скошенной поверхности агара. Вынув петлю, обжигают край пробирки и закрывают ее пробкой. Петлю стерилизуют в пламени горелки и ставят в штатив. Пробирки с посевами надг писывают, указывая дату посева и характер посевного материала (номер исследования или название культуры).
Посевы «газоном» производят шпателем на питательный агар в чашке Петри. Для этого, приоткрыв левой рукой крышку, петлей или пипеткой наносят посевной материал на поверхность питательного агара. Затем проводят шпатель через пламя горелки, остужают его о внутреннюю сторону крышки и растирают материал по всей поверхности среды. После инкубации посева появляется равномерный сплошной рост бактерий.
Искусственные питательные среды, их классификация. Требования, предъяв-ляемые к питательным средам.
Питательной средой в микробиологии называют среды, содержащие различные соединения сложного или простого состава, которые применяются для размножения бактерий или других микроорганизмов в лабораторных или промышленных условиях.
Питательные среды готовят из продуктов животного или растительного происхождения. Большое значение имеет наличие в питательной среде ростовых факторов, которые катализируют метаболические процессы микробной клетки (витамины группы В, никотиновая кислота и др.).
Искусственные среды готовят по определенным рецептам из различных настоев или отваров животного или растительного происхождения с добавлением неорганических солей, углеводов и азотистых веществ.
В бактериологической практике чаще всего используют сухие питательные среды, которые получают на основе достижений современной биотехнологии. Для их приготовления используют экономически рентабельное непищевое сырье: утратившие срок годности кровезаменители (гидролизин—кислотный гидролизат крови животных, аминопептид — ферментативный гидролизат крови; продукты биотехнологии (кормовые дрожжи, кормовой лизин, виноградная мука, белколизин). Сухие питательные среды могут храниться в течение длительного времени, удобны при транспортировке и имеют относительно стандартный состав.
По консистенции питательные среды могут быть жидкими, полужидкими, плотными. Плотные среды готовят путем добавления к жидкой среде 1,5—2% агара, полужидкие — 0,3— 0,7 % агара. Агар представляет собой продукт переработки особого вида морских водорослей, он плавится при температуре 80—86 °С, затвердевает при температуре около 40 °С и в застывшем состоянии придает среде плотность. В некоторых случаях для получения плотных питательных сред используют желатин (10—15%). Ряд естественных питательных сред (свернутая сыворотка крови, свернутый яичный белок) сами по себе являются плотными.
По целевому назначению среды подразделяют на основные, элективные и дифференциально-диагностические.
К основным относятся среды, применяемые для выращивания многих бактерий. Это триптические гидролизаты мясных, рыбных продуктов, крови животных или казеина, из которых готовят жидкую среду — питательный бульон и плотную — питательный агар. Такие среды служат основой для приготовления сложных питательных сред — сахарных, кровяных и др., удовлетворяющих пищевые потребности патогенных бактерий.
Элективные питательные среды предназначены для избирательного выделения и накопления микроорганизмов определенного вида (или определенной группы) из материалов, содержащих разнообразную постороннюю микрофлору. При создании элективных питательных сред исходят из биологических особенностей, которые отличают данные микроорганизмы от большинства других. Например, избирательный рост стафилококков наблюдается при повышенной концентрации хлорида натрия, холерного вибриона — в щелочной среде и т. д.
Дифференциально-диагностические питательные среды применяются для разграничения отдельных видов (или групп) микроорганизмов. Принцип построения этих сред основан на том, что разные виды бактерий различаются между собой по биохимической активности вследствие неодинакового набора ферментов.
Особую группу составляют синтетические и полусинтетические питательные среды. В состав синтетических сред входят химически чистые вещества: аминокислоты, минеральные соли, углеводы, витамины. В полусинтетические среды дополнительно включают пептон, дрожжевой экстракт и другие питательные вещества. Эти среды чаще всего применяют в научно-исследовательской работе и в микробиологической промышленности при получении антибиотиков, вакцин и других препаратов.
В последние годы в целях экономии питательных сред и ускоренной идентификации некоторых микроорганизмов (энтеробактерии, стафилококки, стрептококки и др.) применяются так называемые микротест-системы (МТС). Они представляют собой полистироловые пластины с лунками, в которых содержатся стерильные дифференциально-диагностические среды. Стерилизацию МТС проводят УФ-облучением. Микротест-системы особенно удобны при массовых бактериологических исследованиях в практических лабораториях.
Требования, предъявляемые к питательным средам.
Любая питательная среда должна отвечать следующим требованиям: содержать все необходимые для размножения микроорганизмов вещества в легкоусвояемой форме; иметь оптимальные влажность, вязкость, рН, быть изотоничной и по возможности прозрачной. Каждую питательную среду стерилизуют определенным способом в зависимости от ее состава.