Отсутствие специфического свечения обозначают «—» (видны тени микроорганизмов).
При диагностике различных возбудителей положительным результатом чаще всего считают специфическое свечение бактерийных клеток не ниже чем на четыре или на три креста.
С целью уменьшения неспецифической фоновой флуоресценции исследуемых препаратов применяют так называемое контрастирование неспецифического свечения.
Для этого исследуемые мазки обрабатывают смесью специфической сыворотки, меченной ФИТЦ (и поэтому излучающей зеленый свет), и альбумина нормальной сыворотки лошади или быка, меченного родамином (излучающим красный свет).
Втаком препарате специфический антиген будет светиться зеленым,
афон препарата (свободные от вируса клетки и т.п.), адсорбируя альбумин, окрашивается в оранжево-красный или бурый цвет (контрольный по отношению к зеленому).
Р и с. 3. Положительная РИФ (видны флуоресцирующие извитые микроорганизмы)
6 Применение РИФ
РИФ находит все большее применение в различных областях биологии. Особенно широко используется в вирусологии. Благодаря специфичности, высокой чувствительности, доступности, быстроте и относительной простоте РИФ используют с целью индикации и идентификации вирусных
11
антигенов (особое значение приобретает этот метод для тех вирусов, которые не обладают цитопатогенными, гемагглютинирующими и гемадсорбирующими свойствами); выявления и титрования противовирусных антител, а также аутоантител. РИФ делает возможным морфологическое изучение процессов взаимодействия вирусов с клетками, динамики накопления вирусных антигенов в клетке, антигенных связей вирусов, а также патогенеза вирусных инфекций.
Особенно большое значение этот метод имеет при изучении смешанных и хронических инфекций.
РИФ относится к экспресс-методам диагностики, так как в течение короткого времени (нескольких часов) она позволяет обнаруживать вирусные антигены даже при наличии их малых доз.
Контрольные вопросы:
1.В чем состоит сущность РИФ?
2.Какие компоненты необходимы для постановки РИФ?
3.Какой патологический материал может быть использован для РИФ?
4.Какие методы постановки РИФ существуют?
5.Опишите технику постановки РИФ прямым методом.
6.Опишите технику постановки РИФ непрямым двухступенчатым методом.
7.Опишите технику постановки РИФ непрямым трехступенчатым методом.
8.Как проводится учет реакции?
9.С какой целью используется РИФ?
10.Укажите достоинства РИФ.
12
Список литературы
1.Белов, Л.Г. Руководство по микробиологии и иммунологии [Электронный ресурс] / Л.Г. Белов. – М.: Инфа-М, 2017. – С. 66–67.
2.Белоусова, Р.В. Практикум по ветеринарной вирусологии [Текст] / Р.В. Белоусова, Н.И. Троценко, Э.А. Преображенская. – М.: КолосС, 2006. –
С. 131–140.
3.Госманов, Р.Г. Ветеринарная вирусология [Текст] / Р.Г. Госманов, Н.М.Колычев. – М.: КолосС, 2006. – С.260–260.
4.Госманов, Р.Г. Ветеринарная вирусология [Текст] / Р.Г. Госманов, Н.М. Колычев, В.И. Плешакова. – М.: Лань, 2010. – С. 378–384.
5.Кисленко, В.Н. Практикум по ветеринарной микробиологии и иммунологии [Текст] / В.Н. Кисленко. – М.: КолосС, 2005. – С. 130–133.
6.Костенко, Т.С. Практикум по ветеринарной микробиологии и иммунологии [Текст] / Т.С. Костенко, В.Б. Родионова, Д.И. Скородумов. – М.:
КолосС, 2001.– С. 110–114.
7.Скородумов, Д.И. Микробиологическая диагностика бактериаль-
ных болезней животных [Текст] : справочник / Д.И. Скородумов, В.В. Субботин, М.А. Сидоров, Т.С. Костенко. – М., 2005.– С. 203–214.
8.Справочник [Текст]. Видаль. ЗАО «ЮБМ Медика Рус», 2013. –
С. 386, 400.
9.Фирсов, Г.М. Вирусология и биотехнология [Электронный ресурс] / Г.М. Фирсов. – Волгоград, 2015.– С. 194.
13
|
Содержание |
|
|
Введение............................................................................................................. |
3 |
1 |
Материальное обеспечение............................................................................ |
3 |
2 |
Сущность реакции иммунофлуоресценции............................................... |
4 |
3 |
Приготовление препаратов для РИФ.......................................................... |
5 |
4 |
Варианты (методы) постановки РИФ......................................................... |
6 |
5 |
Учет результатов РИФ................................................................................... |
9 |
6 |
Применение РИФ........................................................................................... |
11 |
|
Контрольные вопросы.................................................................................. |
12 |
|
Список литературы.......................................................................................... |
13 |
14
15
Ответственный за выпуск Е.Н. Закрепина Корректор Г.Н. Елисеева
Заказ № 273 –Р. Тираж 25 экз. Подписано в печать 28.11.2017 г. ФГБОУ ВО Вологодская ГМХА 160555, г. Вологда, с. Молочное, ул. Емельянова, 1
16