Задание 16. Качественные реакции на вещества, входящие в состав нуклеопротеидов

Оборудование и реактивы: 1) NaОН – 10 %, 2) Н₂SО₄ – 5 %,3) Сu SО₄ -1 %, 4) аммиачный р-р серебра: к 5 % р-ру АgNO₃ добавляют концентрированный р-р аммиака до растворения выпадающего осадка; 5) орциновый реактив: 1 г орцина растворяют в 500 мл 30 % НСl и добавляют 4-5 мл 10 % FeCl₃. Реактив хранят в темной, плотно укупоренной склянке; 6) 0,2 % р-р флороглюцина в НСl; 7) концентрированный NН₄ОН; 8) р-р молибденовокислого аммония в азотной кислоте (молибденовый реактив): 7,5 г молибденовокислого аммония растворяют в 100 мл 32 % НNО₃; 9) магнезиальная смесь: 3,5 г

Мg Cl₂, 1,8 г NН₄ Сl и 2 мл 25 % аммиака доводят водой до объема 100 мл.

Ход работы. Полученный препарат нуклеопротеидов помещают в колбу емкостью 20 мл, добавляют 20 мл р-ра Н₂SО₄. Колбу соединяют с обратным холодильником и несильно кипятят 1 ч.

В гидролизате определяют:

1. Пуриновые основания: к 1 мл гидролизата прибавляют 5 капель 10 % р-ра аммиака до щнлочной реакции (на лакмус), затем добавляют 0,5 мл аммиачного раствора серебра. Выпадает хлопьевидный осадок серебряных солей пуриновых оснований, который постепенно оседает на дно пробирки.

2. Пентозы: а) 1 мл орцинового реактива наливают в пробирку и нагревают до кипения. В кипящий реактив быстро добавляют 5 капель гидролизата. Через 2-3 мин. появляется зеленое окрашивание, которое указывает на присутствие в гидролизате рибозы и дезоксирибозы; б) при помощи флороглюцина: 1 млр-ра флороглюцина нагревают до кипения. В кипящий раствор быстро добавляют 5 капель гидролизата. Сейчас же появляется розовое окрашивание, которое в дальнейшем переходит в красное.

3. Фосфорную кислоту: а) 1 мл гидролизата переносят в пробирку, прибавляют равный объем молибденового реактива и нагревают. Появление желтого осадка указывает на присутствие фосфорной кислоты в гидролизате; б) при помощи магнезиальной смеси: к 1 г гидролизата, нейтрализованного 25 % р-ром аммиака, добавляют 1 мл магнезиальной смеси. Выпадающий белый кристаллический осадок указывает на присутствие Н₃РО₄.

Промежуточные продукты обмена веществ Задание 17. Обнаружение этилового спирта

Этиловый спирт образуется при анаэробном типе дыхания (брожение) в различных растениях. Например, анаэробное дыхание наблюдается в плодах, где оно является следствием недостатка кислорода во внутренних тканях. При созревании плодов и ягод усиливается анаэробное дыхание, которое сопровождается образованием этилового спирта и других продуктов неполного окисления углеводов. Особенно большое количество этилового спирта образуется при неполном распаде сахара в процессе анаэробного дыхания дрожжей без доступа воздуха.

Анаэробное превращение глюкозы, фруктозы и других сахаров дрожжами называется спиртовым брожением, которое используют в бродильных, хлебопекарных и других производствах.

Оборудование и реактивы: 0,1 н р-р КI , 10 % NaОН, термостат и водяная баня.

Ход работы. К двум каплям 0,1 н р-ра йода в йодистом калии добавляют 1-2 капли исследуемой жидкости и затем добавляют по каплям 10 % раствор NaОН до тех пор, пока бурый цвет раствора не перейдет в бледно-желтый. Раствор слегка подогревают (не выше 60^О), в присутствии этилового спирта образуется желтоватый осадок йодоформа (СI₃Н). Смесь имеет характерный запах йодоформа, который указывает на наличие спирта.