18. Специальная культуральная посуда: флаконы, колбы, матрасы, чашки Петри, платы, роллерные сосуды, пробирки, пипетки и т.Д.

Ответ. Основная часть ассортимента специальной культуральной посуды предназначена для роста клеток в монослое, что определяет особые требования к свойствам поверхности и материала изделий как из стекла, так и из пластика. Для культивирования клеток обычно используют флаконы, колбы, матрасы, чашки Петри, платы, роллерные сосуды, пробирки, пипетки и т. д. Флаконы для клеточных и тканевых культур предназначены для использования в целях культивирования и сбора клеток в малых и средних начальных объемах. Стерилизованы излучением, апирогенны, не содержат ДНКазы/РНКазы. Могут иметь как обработанную, так и необработанную поверхность. Поверхность флаконов плоская и не имеет дефектов материала, что увеличивает полезную площадь роста. Инновационная угловая конструкция горла обеспечивает удобную работу с пипеткой и скребком для клеток. На обеих сторонах флакона имеется гравированная градуировка. Колбы – один из основных типов лабораторной посуды. В зависимости от задач использования, колбы различают по форме, объему, наличию шлифов, количеству горл и отводов, а также по типу и толщине стекла. Колбы качалочные Эрлеймейера — плоскодонные колбы c широким основанием, без шлифа, c узким/широким горлом, c закруглёнными краями; возможны модели с отбойниками на дне колбы, что способствует более эффективному перемешиванию жидкости и лучшей аэрации; могут использоваться с алюминевыми крышками, ватно-марлевыми или целлюлозными пробками, полипропиленовыми крышками (винтовые); коническая форма позволяет легко перемешивать содержимое в лабораторных шейкерах-термостатах с подогревом или шейкерах без подогрева; плоское дно позволяет проводить перемешивание также при помощи магнитной мешалки с магнитным перемешивающим элементом. Колба Фернбаха — плоскодонная колба, диаметр основания которой примерно равен высоте, что способствует более мягкому перемешиванию и лучшему газообмену для культивирования клеточных культур с винтовой крышкой или без крышки, с отбойниками или без отбойников; для закрытия могут применяться ватно-марлевые пробки и полипропиленовые крышки. Колбы высокопроизводительные Ultra Yield Thomson — качалочные колбы для культивирования прокариот, дрожжей и грибов — представляют собой модифицированную колбы Эрленмейера: уменьшено основание, увеличен диаметр горла, на переходе к горлу колбы сделаны «плечики», что предотвращает запрос жидкости к крышке. Все это позволяет наполнять колбы средой не на 25% от объема, как у колб Эрленмейера, а на 50%, широкое горло и отбойники дают хорошую аэрацию, а немного уменьшенное основание позволяет размещать больше колб в шейкере, по сравнению с «обычными» колбами. Благодаря небольшому уменьшенному основанию, отбойникам и специальным крышкам обеспечивается эффективный рост и высокий выход биомассы (увеличение до 250%), ДНК и белков (до 600%). Широкое горлышко в сочетании со специальной крышкой способствует поступлению большего количества кислорода. У колб Optimum Growth также заметно увеличен диаметр основания и диаметр горла, используется для культивирования клеток млекопитающих и растений. Мерная колба предназначена для приготовления стандартных растворов (с точной концентрацией) и для разбавления исследуемых растворов до определенного объема. Мерная колба представляет собой сосуд со сферическим или грушевидным основанием, плоским дном и длинной узкой цилиндрической горловиной, на которую нанесена круговая метка. Данная конструкция позволяет осуществить точное отмеривание необходимого объёма жидкости. Пластик для культур клеток предназначен для успешного культивирования клеток in vitro, так как максимально воспроизводит окружение клеток данного типа in vivo. Пробирки — рабочий объем от 3 до 15 мл; чашки Петри — диаметр от 35 до 150 мм, выпускаются с вентилируемой и невентилируемой крышкой, доступный формат — круглая, квадратная форма, существуют чашки Петри со стеклянным дном для удобства при микроскопии, с обработанной или необработанной поверхностью; планшеты — количество лунок от 6 до 384 штук; флаконы (матрасы) — площадь культуральной поверхности от 25 до 500 см², со скошенным горлом для удобства пользователя и с прямым горлом для автоматизации процесса. Деления на боковой части флаконов помогают легко измерить объем среды роста, насечки помогают удобно захватить флакон, ножки для укладки на верхней части флакона обеспечивают удобство укладывания флаконов в термостате; ситечки/вставки в культуральный планшет; выпускаются для изучения адгезивных клеток, помогают молекулам и клеткам мигрировать и активно перемещаться; скребки — длина лезвия от 1,7 до 7,5 см; биореакторы — объем от 125 мл до 36 л; многоуровневые планшеты для масскультивирования — от 1 до 40 уровней увеличение объемов клеточной культуры без увеличения площади основания флакона, приводит к экономии пространства в термостате/инкубатора; специальные флаконы для роботизированных станций. Для выбора наиболее подходящего пластика необходимо учитывать, растут ли клетки в монослое или в суспензии, масштабирование, допустим ли газовый обмен с атмосферой. Основная часть ассортимента культурального пластика предназначена для клеток, растущих в монослое, поэтому решающее значение имеет поверхность культурального сосуда — необработанная поверхность или поверхность, обработанная различными способами в зависимости от задач: поверхность для адгезивных клеточных культур; поверхность, покрытая лизином или коллагеном для первичных и чувствительных клеток; поверхность для адгезивных клеток для снятия без использования химических агентов; для культивирования сфероидов и т.д. Чашка Петри — прозрачный лабораторный сосуд в форме невысокого плоского цилиндра, закрываемого прозрачной крышкой подобной формы, но несколько большего диаметра, широко применяется для культивирования бактерий, грибов, дрожжей и т.п. Культивирование происходит за счет пассивной аэрации — происходит поступление газообразной среды внутрь чашки, а крышка защищает от попадания посторонней флоры. Также чашки Петри позволяют отследить скорость и специфику прорастания растений и являются отличным средством для хранения и высушивания различных образцов. С помощью чашек Петри можно провести подсчет количества микробных клеток, установить, насколько последние чувствительны к антибиотикам, а также провести различные лабораторные операции. Бактериальные посевы производят на плотную питательную среду в чашке Петри. Для этого, приоткрыв левой рукой крышку, микробиологической петлёй или пипеткой наносят посевной материал на поверхность питательного агара по методу Дригальского. Затем шпателем или стеклянными шариками равномерно распределяют посевной материал на питательном агаре. Для удобства посева с помощью шпателя Дригальского используют вращающийся столик механический или электрический, данный столик уменьшает напряжение рук во время работы. Для автоматизации процесса посева существует устройство спирального посева с предварительным разбавлением, позволяющее сократить время посева и исключить человеческий фактор. После посева производят инкубирование в термостатах. Для удобства переноса чашек Петри в термостат используют специальные штативы для переноса и хранения. В данные штативы помещается до 36 чашек Петри. Далее производят подсчет колоний. Для удобства и ускорения подсчета колоний микроорганизмов используют полуавтоматические и автоматические счетчики колоний, автоматические счетчики способны также определять зоны ингибирования. Чашки Петри изготавливаются из различных материалов стекла, пластика (полистирола), нержавеющей стали и бывают различных диаметров 60, 90, 100, 120, 150, 180 или 200 мм. Преимущество стеклянных чашек в многоразовом использовании, но они требуют стерилизации перед повторным посевом. Пластиковые чашки Петри одноразовые и не требуют стерилизации. Стерилизация стеклянных чашек Петри происходит в суховоздушных стерилизаторах и автоклавах. Для удобства стерилизации используют специальные пеналы. Чашки Петри пластиковые поставляются стерильными в герметичной упаковке. Изделия имеют небольшой удельный вес, удобны в перевозке, могут использоваться в автоматических средоварках с автоматическим разливом в чашки Петри. Чашки Петри из нержавеющей стали используют для испарения жидкости, хранения образцов различных препаратов и микроорганизмов. Роллерные бутыли используются для масс-культивирования адгезивных клеточных культур. По мере вращения роллерной бутыли в роллерах и роллерах-инкубаторах вокруг своей оси происходит равномерное увлажнение культивируемых клеток питательной средой. Такой принцип позволяет экономить культуральный пластик поскольку задействована вся полезная площадь бутылей и питательной среды. Данное оборудование применяется для массового культивирования клеточных культур, например, для производства вакцин, наработки клеточной массы для вирусологических работ, культивирования клеток насекомых и т.п. В качестве материала для роллерных бутылей используется полистерол (ПС) или полиэтилентерефталат (ПЭТФ). Роллерные бутыли бывают стерильными, апирогенными, с поверхностью обработанной для оптимального прикрепления клеток. Роллерные бутыли выпускаются с гладкой или гофрированной поверхностью. Бутыли с гофрированной поверхностью при тех же размерах обладают вдвое большей площадью поверхности прикрепления клеток, что позволяет выращивать большие количества клеток, при этом клетки в ложбине получают меньше питательных веществе, чем клетки на поверхности. Для создания специальной атмосферы для работы с клеточными культурами в роллерных бутылях применяются СО₂-инкубаторы и мультигазовые инкубаторы. Данное оборудование позволяет культивировать исследуемые объекты при заданных параметрах процентного содержания углекислого газа, уровня влажности и значения температуры, то есть в условиях, максимально приближенных к условиям in vivo. В мультигазовых инкубаторах можно контролировать также содержание других газов — N₂ и O₂ — для создания гипоксических условий или условий с избыточным количеством кислорода. Крышки роллерных бутылей могут быть невентилируемыми или с воздухопроницаемой мембраной 0,22 мкм для обеспечения аэрации клеток. Внешний диаметр большинства производимых роллерных бутылей составляет 117 мм, а площадь поверхности зависит от высоты и характеристики поверхности (гладкая или гофрированная). Выпускаются бутыли с площадью поверхности 490, 850, 1050, 1450, 1700, 1750, 1800, 2100 и 4200 см². Для работ с культурами клеток используются также культуральные среды, сыворотки, компоненты, добавки. Пипетки находят широкое применение в лабораторной практике. В зависимости от их конструкции различают несколько типов. Пипетки мерные применяются для точного дозирования определённых объёмов жидкостей. Обычно в качестве материала используется нейтральное стекло. Пипетки аспирационные с градуировкой изготовлены из нетоксичного высококачественного полистерола или нейтрального стекла. Доступны в объёмах 1, 2, 5, 10 и 50 мл; используются для асептической аспирации жидкостей с помощью вакуумного отсоса, дозирования и пипетирования при бактериологических и санитарно-гигиенических исследований; стерилизованы гамма-облучением. Пробка из полиэфирного волокна обеспечивает защиту от переполнения, апирогенные, протестированы на отсутствие ДНК-аз/РНК-аз. Пипетки для переноса (пипетки Пастера) — для переноса жидкостей, пипетирования, а также капельного дозирования, где не требуется высокая точность измерения объема при переносе жидкостей между различными емкостями. Пипетки изготовлены из полиэтилена низкого давления (ПЭНД) и боросиликатного стекла. На каждую пипетку нанесена рельефная градуировка; постоянный диаметр носика позволяет всегда получать каплю заданного объема, замкнутый резервуар для заполнения жидкостью, исключает контаминацию. Пипетки Мора (аликвотные пипетки) имеют одну круговую метку в верхней части и предназначены для отбора проб жидкостей определенного объема. Пипетки изготовлены из боросиликатного стекла и представляют собой стеклянную трубку с расширением посередине и без расширения; пипетка заканчивается оттянутым носиком; доступны в объёмах 1, 5, 10, 20, 50, 100, 200 мл.